MABC949

Przeciwciało przeciwko glikoproteinie 78, klon 3F3A

clone 3F3A, from rat

• Synonim(y): E3 ubiquitin-protein ligase AMFR, AMF receptor, Autocrine motility factor receptor, gp78, RING finger protein 45
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 3F3A, monoclonal
• Application: ICC, IHC, WB
• Citations: 1

Właściwości

• biological source: rat
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 3F3A, monoclonal
• species reactivity: mouse, human
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgMκ
• NCBI accession no.: NP_001135
• UniProt accession no.: Q9UKV5
• shipped in: ambient
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... GPR78(27201)

Opis

General description

Ligaza białkowa E3 ubikwityny AMFR (UniProt Q9UKV5; znana również jako receptor AMF, receptor czynnika ruchliwości autokrynnej, gp78, białko palca RING 45) jest kodowana przez gen RNF45 (znany również jako AMFR) (identyfikator genu 267) u człowieka. Glikoproteina 78 (gp78) jest zakotwiczoną w błonie retikulum endoplazmatycznego (ER) ligazą ubikwityny E3, która odgrywa kluczową rolę w degradacji związanej z ER (ERAD). Gp78 jest zlokalizowany w domenie ER związanej z mitochondriami, gdzie indukuje fragmentację mitochondriów poprzez celowanie w mitochondrialne białka fuzyjne mitofusynę 1 i 2 (odpowiednio Mfn1 i Mfn2) w celu degradacji po depolaryzacji mitochondriów. Inne znane substraty ERAD przetwarzane przez gp78 obejmują lipoproteinę ApoB, reduktazę HMG CoA, CD3-delta, transmembranowy regulator przewodnictwa mukowiscydozy, supresor przerzutów KAI1, nieglikozylowane białko prionowe (PrP) i receptor komórek T. Gp78 jest białkiem 7-transmembranowym (a.a. 82-102, 122-142, 145-165, 186-206, 215-235, 276-296, 429-449) z palcem cynkowym typu RING (a.a. 341-379), domeną CUE (a.a. 456-498) i motywem interakcji VCP/p97 (VIM; a.a. 622-640).

Zaobserwowano ~78 kDa. Docelowy rozmiar pasma wydaje się większy niż obliczona masa cząsteczkowa 73,00 kDa z powodu glikozylacji. W niektórych lizatach można zaobserwować niescharakteryzowane pasma.

Immunogen

Epitop: domena zewnątrzkomórkowa

Oczyszczona z żywicy lektyna orzechowa (PNA) glikoproteina błonowa 78 z komórek B16-F1 (Nabi, I.R., and Raz, A. (1987). Int. J. Cancer. 40(3):396-402).

Application

Immunocytochemia: Reprezentatywna partia wykryła immunoreaktywność glikoproteiny 78 kolokalizowaną z markerem mitochondriów OxPhosV w komórkach COS-7 (dzięki uprzejmości I. Robert Nabi, Ph.D., University of British Columbia, Kanada).

Wpływa na funkcjonowanie: Reprezentatywna partia stymulowała mobilność komórek czerniaka myszy B16-F1 na powierzchni pokrytej złotem koloidalnym (Nabi, I.R., et al. (1990). Cancer Res. 50(2):409-414).

Analiza immunocytochemiczna: Reprezentatywna partia wykryła zarówno powierzchniową jak i cytoplazmatyczną immunoreaktywność gp78 poprzez fluorescencyjne barwienie immunocytochemiczne nienaruszonych lub utrwalonych MeOH/3% paraformaldehydem i 0,5% Tritonem X-100 przesączonych mysich fibroblastów A31 i komórek naczyniakomięsaka A31M (Niinaka, Y., et al. (1998). Cancer Res. 58(12):2667-2674).

Analiza immunocytochemiczna: Płyn puchlinowy klonu 3F3A immunolokalizował gp78 na powierzchni przylegających komórek czerniaka myszy B16-F1 za pomocą fluorescencyjnego barwienia immunocytochemicznego komórek utrwalonych 3% paraformaldehydem (Nabi, I.R., et al. (1990). Cancer Res. 50(2):409-414).

Analiza immunohistochemiczna: Reprezentatywna partia wykryła podwyższoną immunoreaktywność gp78 w zamrożonych skrawkach gruczołu sutkowego myszy transgenicznych 235RLF w porównaniu z dopasowanymi wiekowo myszami typu dzikiego (Joshi, B., et al. (2010). J. Biol. Chem. 285(12):8830-8839).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła regulację w dół gp78 za pośrednictwem shRNA w ludzkich komórkach włókniakomięsaka HT-1180 (Fu, M., et al. (2013). Mol. Biol. Cell. 24(8):1153-1162).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła endogenną ekspresję gp78 i transgenu gp78 w gruczołach sutkowych myszy dzikich i transgenicznych. Klon 3F3A wykrył wyższą ekspresję gp78 w przerzutowych komórkach MDA-435 niż w nieprzerzutowych komórkach raka piersi MCF7 (Joshi, B., et al. (2010). J. Biol. Chem. 285(12):8830-8839).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła znacznie wyższą ekspresję gp78 w liniach angiosarcoma (ludzki HT-1180 i mysi A31M) niż w liniach fibroblastów (ludzki IMR90 i mysi A31) (Niinaka, Y., et al. (1998). Cancer Res. 58(12):2667-2674).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła gp78 i pasmo ~150 kDa w ekstrakcie z komórek czerniaka myszy B16-F1. Autokrynny czynnik ruchliwości (AMF) konkurował z klonem 3F3A o wiązanie docelowego pasma gp78. Leczenie sialidazą ekstraktu komórkowego zmniejszyło immunoreaktywność przeciwciała wobec gp78 i zniosło wykrywanie pasma ~150 kDa (Nabi, I.R., et al. (1990). Cancer Res. 50(2):409-414).

Wykryj GP78 za pomocą tego szczurzego monoklonalnego antyglikoproteiny 78, klon 3F3A, nr kat. Nr kat. MABC949, zatwierdzonego do stosowania w testach funkcji, immunocytochemii, immunohistochemii i Western Blotting.

Research Category
Apoptosis & Cancer

Biochem/physiol Actions

Klon 3F3A wykrywał glikoproteinę 78 (gp78) i glikoproteinę ~150 kDa w ekstrakcie z komórek czerniaka myszy B16-F1. Leczenie sialidazą ekstraktu komórkowego zmniejszyło immunoreaktywność przeciwciała wobec gp78 i zniosło wykrywanie pasma ~150 kDa (Nabi, I.R., et al. (1990). Cancer Res. 50(2):409-414).

Physical form

Format: Oczyszczony

Oczyszczona szczurza IgM w buforze zawierającym PBS bez azydku.

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu i przed zdjęciem nasadki odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek do mikrowirówki i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Western Blotting Analysis: A 1:62.5 dilution of this antibody detected glycoprotein 78 (gp78) in 50 µg of HeLa cell lysate.

Other Notes

Stężenie: Należy zapoznać się z arkuszem danych dla konkretnej partii.

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable