Bufory HPLC
Bufory to roztwory słabego kwasu i jego sprzężonej zasady lub słabej zasady i jej sprzężonego kwasu. W chemii analitycznej bufory są zwykle stosowane w wysokosprawnej chromatografii cieczowej z odwróconymi fazami (RP-HPLC), gdy próbka zawiera kwaśne lub zasadowe grupy funkcyjne. Bufory łagodzą wpływ jonów wodorowych/hydronowych i wodorotlenkowych, zmniejszając wahania pH.
Produkty
Powiązane zasoby
- Brochure: LC-MS Resource Guide
A Comprehensive Portfolio for Consistent Results in Routine and Advanced LC-MS applications
- Kalkulator transferu metody HPLC
Łatwe przenoszenie metody między kolumnami HPLC (skala od mikroporów do zakresu preparatywnego) w oparciu o wymiary 2 kolumn i bieżące warunki metody.
Bufory fazy ruchomej
Właściwy wybór buforu, pod względem gatunków buforujących, siły jonowej i pH, jest najbardziej krytycznym etapem opracowywania metody RP-HPLC dla analitów jonowych. Na retencję analitów jonowych w RP-HPLC zasadniczy wpływ ma pH fazy ruchomej. W związku z tym kontrola pH fazy ruchomej w RP-HPLC jest jednym z najważniejszych parametrów skutecznej separacji analitów.
Typowy zakres pH dla separacji w fazie odwróconej na kolumnach krzemionkowych wynosi od 2 do 8. Bufor musi mieć pKa zbliżone do pożądanego pH, ponieważ bufory najlepiej kontrolują pH przy swoim pKa. Zasadniczo idealnie jest wybrać bufor o wartości pKa <2 jednostki pożądanego pH fazy ruchomej. Oferujemy bufory klasy HPLC dla szerokiego zakresu pH dla wszystkich wymagań chromatografii laboratoryjnej.
Factors to be considered while choosing a HPLC Buffer
Chemical Purity.
Jakość dodatków do fazy ruchomej (bufory, sole, kwasy i zasady) wraz z rozpuszczalnikami organicznymi wykorzystywanymi w eksperymencie HPLC musi być dostosowana do czułości detektora i protokołu elucji. Wysokiej jakości rozpuszczalniki i odczynniki są zalecane do optymalnej chromatografii.
Kompatybilność chemiczna
Skład buforu wraz z pH fazy ruchomej musi być dobrany w porozumieniu z materiałem obudowy kolumny i charakterem fazy stacjonarnej. Zapobiega to uszkodzeniu sprzętu i złoża kolumny.
Rozpuszczalność buforu
Zasadniczo bufor powinien być całkowicie rozpuszczalny w wodzie i nie powinien się wytrącać. Stężenie buforu musi być starannie dobrane, aby uniknąć wytrącania przy wyższych stężeniach, gdy bufor jest mieszany z rozpuszczalnikiem organicznym. Jeśli zostanie to zaniedbane, może to spowodować problemy operacyjne w pompach i blokadę kolumny HPLC.
Siła buforu
Eluent wykazujący słabe oddziaływanie z fazą stacjonarną jest zdolny do elucji tylko słabo związanych analitów z kolumny, podczas gdy silne oddziaływanie powoduje elucję silnie związanych cząsteczek próbki. Siła elucji lub rozpuszczania różnych rozpuszczalników zależy od rodzaju zastosowanej fazy stacjonarnej. Po sile elucji, lepkość i absorbancja UV buforu odgrywa ważną rolę pod względem ich przydatności do stosowania w analizach HPLC.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?Dla wygody naszych klientów ta strona została przetłumaczona maszynowo. Dołożyliśmy starań, aby zapewnić dokładne tłumaczenie maszynowe. Tłumaczenie maszynowe nie jest jednak doskonałe. Jeśli tłumaczenie maszynowe nie spełnia Twoich oczekiwań, przejdź do wersji w języku angielskim.
