Testowanie sterylności

Procedury testowania sterylności są stosowane do produktów w wielu branżach, w tym producentów żywności i napojów, ale głównymi branżami są sektor farmaceutyczny i medyczny, w których testowanie sterylności produktów pozostaje istotnym i rutynowym zadaniem mikrobiologów.

• Farmaceutyczne metody testowania sterylności
• Metody testowania sterylności dla urządzeń medycznych
• Przebieg testów sterylności

Farmaceutyczne metody testowania sterylności

Kompendialne metody testowania sterylności produktów farmaceutycznych wymagają hodowli próbek w dwóch oddzielnych podłożach. W testach sterylności stosuje się dwa różne rodzaje podłoży hodowlanych w celu promowania wzrostu resztkowych beztlenowców, a także tlenowców i grzybów. Płynna pożywka tioglikolanowa (FTM) jest zwykle używana do hodowli bakterii beztlenowych i niektórych bakterii tlenowych, podczas gdy pożywka trawiona kazeiną sojową (SCDM) jest zwykle używana do hodowli grzybów i bakterii tlenowych. Próbki są inkubowane przez 14 dni w temperaturze odpowiednio 32,5 °C i 22,5 °C przed badaniem. Jakiekolwiek zmętnienie pożywki może wskazywać na wzrost i musi zostać zbadane. Istnieją dwie zalecane metody testowania sterylności farmaceutyków: filtracja membranowa i bezpośrednia inokulacja.

Testowanie sterylności metodą filtracji membranowej

Testowanie sterylności metodą filtracji membranowej jest metodą regulacyjną z wyboru dla produktów farmaceutycznych, które można filtrować, zgodnie z USP <71>, Farmakopeą UE < 2.6.1> i Farmakopeą JP <4.06>. Próbki są przepuszczane przez filtr membranowy 0,45 µm w kanistrze filtracyjnym i dodawana jest pożywka do inkubacji. Ta metoda testowania sterylności może zapewnić większą czułość w porównaniu z innymi metodami, ponieważ cała próbka lub próbka złożona jest przepuszczana przez pojedynczy filtr. Filtracja zapewnia również możliwość wypłukania składników próbki, które mogą powodować zmętnienie lub hamować wzrost, takich jak antybiotyki lub konserwanty.

Bezpośrednie badanie sterylności metodą inokulacji

W bezpośredniej inokulacji niewielka objętość próbki jest aseptycznie usuwana z jednostki próbkującej i zaszczepiana bezpośrednio do odpowiedniej objętości pożywki wzrostowej przed inkubacją. Chociaż prosta, ta metoda testowania może mieć pewne istotne ograniczenia. Do pożywki hodowlanej można zaszczepić tylko niewielkie objętości produktu, co ogranicza czułość testu. Jeśli próbka wydaje się mętna lub mętna po zaszczepieniu, wykrycie zmętnienia spowodowanego wzrostem drobnoustrojów pod koniec okresu inkubacji może być trudne. Dodatkowo, jeśli produkt ma właściwości przeciwdrobnoustrojowe, próbka musi zostać zneutralizowana, aby wzrost drobnoustrojów nie został zahamowany.

Metody testowania sterylności wyrobów medycznych

Testy sterylności z bezpośrednim transferem są zalecane do testowania sterylności wyrobów medycznych. Badane urządzenie jest w bezpośrednim kontakcie z podłożem testowym przez cały okres inkubacji, podczas którego wszelkie mikroorganizmy w urządzeniu lub na nim będą rosły i rozmnażały się. Co więcej, testowanie sterylności metodą płukania produktu jest preferowane w przypadku produktów z wydrążonymi rurkami, takich jak zestawy do transfuzji i infuzji, w których ścieżka płynu jest oznaczona jako sterylna. Światło produktu jest przepłukiwane płynem płuczącym, eluent jest filtrowany przez membranę i umieszczany w odpowiednim podłożu do inkubacji.

Testowanie sterylności

1. Przygotowanie do testu - umieść rurkę urządzenia do filtracji membranowej w pompie

2. Wstępne zwilżanie filtra - zwilż urządzenie do filtracji membranowej, aby zoptymalizować filtrację i zminimalizować wiązanie produktu z filtrem.

3. Filtracja próbki - przefiltruj równą ilość produktu do obu kanistrów. Mikroorganizmy są zatrzymywane przez filtr o wielkości porów 0,45 µm.

4. Płukanie - Wszystkie związki hamujące są płukane przy użyciu odpowiedniego roztworu (roztworów) do płukania.

5. Wypełnianie podłoża hodowlanego - urządzenia do filtracji membranowej są wypełniane sterylnym podłożem hodowlanym TSB i FTM.

6. Czas inkubacji-14 dni.

7. Końcowe wyniki testu - wizualne zmętnienie / brak kontroli zmętnienia.