17-613

ChIPAb+ p53 - przeciwciało z walidacją ChIP i zestaw starterów

from mouse

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: monoclonal
• Species reactivity: human
• Application: ChIP, WB
• Citations: 11

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• clone: monoclonal
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NP_000537
• UniProt accession no.: P04637
• shipped in: dry ice

Opis

General description

53 kDa

Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ p53 zawiera przeciwciało p53 podniesione przeciwko rekombinowanemu ludzkiemu p53, przeciwciało kontroli ujemnej (normalne mysie IgG) oraz startery qPCR flankujące miejsce wiązania Sp1 (do którego można rekrutować p531) w ludzkim promotorze p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A), amplifikujące produkt PCR o długości 105 par zasad. Przeciwciała p53 i przeciwciała kontroli ujemnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z p53.

Application

Analiza immunoprecypitacji chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z nietraktowanych lub traktowanych aktynomycyną D (30 ng/ml, 6 godz.) komórek U2OS (3 X¹⁰⁶ równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 1 μg mysiego anty-p53 i zestawu Magna ChIP^® G (nr kat. 17-611). Immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z p53 została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów ChIP p21 flankujących ludzki promotor p21, który zawiera miejsce wiązania Sp1 (patrz rysunki).
Krotny wzrost jest stosunkiem znormalizowanych średnich ilości IP wyekstrahowanych z krzywych standardowych pochodzących z wejść każdej próbki chromatyny. Jak wcześniej opublikowano, asocjacja p53 z tym regionem promotora p21 wzrasta po leczeniu aktynomycyną D.

Analiza immunoprecypitacji chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z nieleczonych lub poddanych działaniu promieniowania UV (6 godzin, 50 dżuli/m2.) komórek U2OS (3 X¹⁰⁶ równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 1 μg mysiego anty-p53 i zestawu Magna ChIP A (nr kat. 17-610).
Immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z p53 została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów ChIP p21 flankujących ludzki promotor p21, który zawiera miejsce wiązania Sp1 (patrz rysunki).
Krotny wzrost jest stosunkiem znormalizowanych średnich ilości IP wyekstrahowanych z krzywych standardowych pochodzących z wejść każdej próbki chromatyny. Aktywność immunoprecypitacji p53 związana z tym promotorem wzrasta wraz z traktowaniem UV, jak zaobserwowano w innych badaniach.

Zestaw ChIPAb+ p53 -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Research Category
Epigenetics & Nuclear Function

Research Sub Category
Chromatin Biology

Biochem/physiol Actions

Rozpoznaje p53 w typie dzikim i zmutowanych formach pochodzenia ludzkiego.

Packaging

25 testów na zestaw. ~1 μg na immunoprecypitację chromatyny

Physical form

Anty-p53 (mysia monoklonalna IgG). Jedna fiolka zawierająca 25 μg białka A oczyszczonej mysiej IgG2a w 25 μL buforu do przechowywania (PBS, pH 7,4, zawierający 0,05% azydku sodu i 1 mg/ml BSA). Przechowywać w temperaturze -20°C.

Normalne mysie IgG. Jedna fiolka zawierająca 25 μg normalnej mysiej IgG w 25 μL objętości. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery ChIP p21. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla regionu ludzkiego promotora p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A). Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: GTG GCT CTG ATT GGC TTT CTG
REV: CTG AAA ACA GGC AGC CCA AG

Format: Oczyszczony

Protein A purified

Preparation Note

Stabilność przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania

Analysis Note

Kontrola
Zawierała przeciwciało kontroli ujemnej, mysią normalną IgG i startery kontrolne specyficzne dla ludzkiego promotora p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A).

Routinely evaluated by chromatin immunoprecipitation and immunoblot on RIPA lysate of human Raji cells.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 2