07-424

Przeciwciało anty-fosfo-histonowe H3 (Thr3)

Upstate^®, from rabbit

• Synonim(y): H3T3P, histon H3 (fosfo T3)
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: mouse, human
• Application: ICC, WB, inhibition assay
• Citations: 57

Właściwości

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• antibody form: unpurified
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: mouse, human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, inhibition assay: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: Q16695

Opis

General description

Histon H3.1t (UniProt: Q16695; znany również jako H3/t, H3t, H3/g) jest kodowany przez gen HIST3H3 (znany również jako H3FT) (Gene ID: 8290) u człowieka. Histony są wysoce konserwatywnymi podstawowymi białkami jądrowymi, które są odpowiedzialne za strukturę nukleosomową chromatyny u eukariontów. Odgrywają one kluczową rolę w regulacji transkrypcji, naprawie DNA, replikacji DNA i stabilności chromosomów. Dwie cząsteczki każdego z czterech podstawowych histonów (H2A, H2B, H3 i H4) tworzą oktamer, wokół którego DNA jest owinięte w powtarzające się jednostki, zwane nukleosomami, co ogranicza dostępność DNA dla maszyn komórkowych, które wymagają DNA jako szablonu. Histon H3 posiada główną domenę kulistą i długi N-końcowy ogon, który wystaje z kulistego rdzenia nukleosomu i może podlegać kilku różnym rodzajom modyfikacji epigenetycznych, które wpływają na procesy komórkowe. N-końcowe ogony histonów podlegają modyfikacjom potranslacyjnym, w tym fosforylacji, acetylacji i metylacji, które rekrutują czynniki regulacyjne, wpływają na strukturę chromatyny i są krytycznymi determinantami transkrypcji. Histon H3 może ulegać acetylacji na kilku resztach lizyny w ogonie histonu przez acetylotransferazy histonowe. Acetylacja jest generalnie związana z aktywnością transkrypcyjną, a metylacja reszt lizyny i argininy może aktywować lub represjonować w zależności od zmodyfikowanej reszty. Trimetylacja histonu H3 jest jednym z najczęściej badanych znaczników epigenetycznych. Stwierdzono, że modyfikacje H3K4me3 występują konsekwentnie w miejscach startu transkrypcji, a domena H3K4me3 jest związana z wyższą aktywnością transkrypcji i tożsamością komórek w rozwoju przedimplantacyjnym oraz w procesie wyprowadzania embrionalnych komórek macierzystych z wewnętrznej masy komórkowej i komórek macierzystych trofoblastu z trophektodermy. Histon H3 jest fosforylowany przy treoninie 4 (H3T3ph) przez kinazę białkową związaną z histonem H3 (HASPIN) podczas profazy i jest defosforylowany podczas anafazy, a fosforylacja przy serynie 11 (H3S10ph) przez kinazę Aurora B jest kluczowa dla kondensacji chromosomów i progresji cyklu komórkowego podczas mitozy i mejozy. (Ref.: Sharifi-Zarchi, A., et al. (2017). BMS Genomics. 18; Artykuł 964; Liu, X., et al. (2016). Nature. 537(7621); 558-562).

Zaobserwowano ~17 kDa; obliczono 15,51 kDa. W niektórych lizatach można zaobserwować niescharakteryzowane pasma.

Immunogen

Liniowy peptyd sprzężony z KLH odpowiadający 13 aminokwasom otaczającym fosfotreoninę 3 ludzkiego histonu H3.

Application

Testy kontroli jakości

Oceniane metodą Western Blotting w ekstrakcie kwasowym z komórek HeLa traktowanych kolcemidem. Analiza Western Blotting: Rozcieńczenie 1:5000 tego przeciwciała wykryło fosfo-histonę H3 (Thr3) w ekstrakcie kwasowym z komórek HeLa traktowanych kolcemidem (50 ng/mL, przez noc), ale nie rekombinowane białko histonu H3.


Testowane zastosowaniaTest inhibicjipeptydowej: Wykrywaniu pasma docelowego w ekstrakcie kwasowym z komórek HeLa poddanych działaniu kolcemidu (50 ng/mL; przez noc) zapobiegało wstępne blokowanie reprezentatywnej partii fosfopeptydem immunogenu, ale nie niefosforylowanym peptydem Histone H3.Analiza immunocytochemiczna: Rozcieńczenie 1:500 z reprezentatywnej partii wykryło fosfo-histonę H3 (Thr3) w komórkach NIH3T3.Uwaga: Rzeczywiste optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego jako próbki, a warunki eksperymentalne mogą się różnić w zależności od użytkownika końcowego.

Biochem/physiol Actions

To królicze przeciwciało poliklonalne wykrywa histon H3 fosforylowany na treoninie 3.

Physical form

Format: Nieoczyszczony

Immunodepletowana surowica królicza z 0,05% azydkiem sodu z 30% glicerolem.

Pozbawiony odporności

Preparation Note

Przechowywać w temperaturze od -10°C do -25°C. Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu i przed zdjęciem nasadki odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Kontrola
Ekstrakt kwasu z komórek HeLa traktowanych kolcemidem

routinely evaluated by immunoblot in acid extracted proteins from mitotic HeLa cells

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable