03-108

RIPAb+ Fragile X Mental Retardation Protein - RIP Validated Antibody i zestaw primerów

from mouse

• Synonim(y): Białko 1 upośledzenia umysłowego typu X
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• clone: monoclonal
• species reactivity: human, rat, mouse
• manufacturer/tradename: RIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ELISA: suitable, RIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_002015.1
• UniProt accession no.: Q06787
• shipped in: dry ice

Opis

General description

71 kDa

Przeciwciała RIPAb+ są oceniane przy użyciu testu immunoprecypitacji białka wiążącego RNA (RIP). Każdy zestaw przeciwciał RIPAb+ zawiera ujemne przeciwciało kontrolne w celu zapewnienia swoistości reakcji RIP i jest weryfikowany pod kątem koimmunoprecypitacji RNA związanego specyficznie z immunoprecypitowanym białkiem wiążącym RNA będącym przedmiotem zainteresowania. W stosownych przypadkach zestaw RIPAb+ zawiera również startery kontrolne do ilościowego RT-PCR (startery RIP) w celu biologicznego potwierdzenia wyników IP poprzez udaną ko-precypitację określonych docelowych RNA, takich jak informacyjny RNA. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów RIP podczas stosowania przeciwciała w ich kontekście eksperymentalnym. Jeśli nie dostarczono testu specyficznego dla celu, zestaw RIPAb+ jest walidowany przy użyciu zautomatyzowanego testu opartego na mikroprzepływach poprzez wzbogacenie wykrywalnego RNA w stosunku do kontrolnej immunoprecypitacji.

Immunogen

Białko fuzyjne z FMRP o pełnej długości (ludzkie).

Application

Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Lizat rdzenia kręgowego myszy E17 (Lane 1), lizat mózgu myszy E16 (Lane 2) i lizat NIH/3T3 (Lane 3) rozdzielono metodą elektroforezy, przeniesiono na membranę PVDF i wysondowano za pomocą anty-Fragile X Mental Retardation Protein (rozcieńczenie 1:500 z poprzedniej partii).
Białka uwidoczniono przy użyciu koziego przeciwciała anty-mysiego sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji.
Strzałka wskazuje białko upośledzenia umysłowego Fragile X (~71 kDa) (patrz rysunki).


Immunohistochemia: Skrawki mrożone i parafinowe. Zastosowano rozcieńczenie 1:500-1:5,000 z poprzedniej partii.

ELISA: W teście ELISA zastosowano rozcieńczenie 1:500-1:5,000 poprzedniej partii.

Wykrywanie FMRP na rozmazach krwi: Użyto rozcieńczenia 1:500-1:5,000 z poprzedniej partii.

Immunocytochemia: Na transfekowanych komórkach zastosowano rozcieńczenie 1:500-1:5,000 z poprzedniej partii. Utrwalanie światłem (2% PFA, permeabilizacja 0,1% tritonem tylko w bloku) (patrz rysunki).

Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.

Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe

Neuronauka

Podkategoria badawcza
Białko wiążące RNA (RBP)

Metabolizm i białka wiążące RNA

Choroby neurodegeneracyjne

Zestaw RIPAb+ Fragile X Mental Retardation Protein -RIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Biochem/physiol Actions

FMRP. Reakcja krzyżowa z białkiem FXR może być wykryta w przypadkach wysokiej ekspresji u myszy.

Packaging

10 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~5 μL przeciwciała na RIP (w zależności od kontekstu biologicznego).

Physical form

Anti-Fragile X Mental Retardation Protein (Mouse Monoclonal IgG1κ). Jedna fiolka zawierająca 50 μl płynu, nie zawiera konserwantów. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Normalna mysia IgG.
Jedna fiolka zawierająca 125 μg oczyszczonej mysiej IgG w 125 µL buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery RIP, Iqsec1.

Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla mysiego Iqsec1.
Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: GCG TCT AGG ACC TTG TGA GC
REV: GAA GGC TGA CCT CCA TGT TG

Format: Oczyszczony

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu, a przed zdjęciem nasadki, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Kontrola
Zawiera mysie przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery kontrolne specyficzne dla mysiego Iqsec1.

RNA Binding Protein Immunoprecipitation:
RIP Lysate prepared from NIH/3T3 cells (2 x 10⁷ cell equivalents per IP) were subjected to immunoprecipitation using 5 µL of either a normal mouse IgG or 5 µL of Anti-Fragile X Mental Retardation Protein antibody and the Magna RIP^® RNA-Binding Protein Immunoprecipitation Kit (Cat. # 17-700).
Successful immunoprecipitation of Fragile X Mental Retardation Protein-associated RNA was verified by qPCR using RIP Primers Iqsec1 (Please see figures).
Please refer to the Magna RIP (Cat. # 17-700) or EZ-Magna RIP (Cat. # 17-701) protocol for experimental details.

Legal Information

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 1