AB5719

Przeciwciało anty-KCa3.1

Chemicon^®, from rabbit

• Synonim(y): Intermediate conductance Ca2+-activated K+ Channel 4, SK4, IKCa1, KCNN4
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: WB
• Citations: -

Właściwości

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: affinity purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: human, mouse
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_002250.2
• UniProt accession no.: O15554
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... KCNN4(3783)

Opis

Immunogen

Syntetyczny peptyd z C-końcowego obszaru szczurzego KCa3.1 (przystąpienie Q9QYW1).

Application

Western blot: 1:300 z użyciem ECL na komórkach KCa3.1 transfekowanych HEK-293 i K562.

Rozcieńczenia należy wykonywać przy użyciu białka nośnikowego, takiego jak BSA (1-3%)

Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.

SUGEROWANY PROTOKÓŁ WESTERN BLOT

1. Wymieszać próbki (błony narządów: 50 μg/pas; transfekowane komórki: 500 000 komórek/pas) z buforem do próbek X 2 i ogrzewać przez 10 minut w temperaturze 70°C.

2. 5-50 μL nanieść na pas Minigel (szerokość 0,75-1,5 mm) i przeprowadzić w standardowych warunkach. (60 mA dla 2 żeli Minigel 1,5 mm, 1,4 h). Sugeruje się, aby uruchomić 5-15% akryloamid (37,5:1 akryloamid:bisakryloamid) minigel (szerokość 1,5 mm) przy 30 mA/żel ~1-1,5 godziny.

3. Transfer w systemie półsuchym w standardowych warunkach (3 h 100 mA dla dwóch żeli minigel).

4. Wybarwić przeniesione pasma za pomocą Chemicon BLOT-FastStain (numer katalogowy 2076).

5. Odbarwić za pomocą wody dejonizowanej. 6. Zablokować za pomocą 5% beztłuszczowego mleka (Marvel lub Carnation) w PBS i 0,025% azydku sodu, przez noc w temperaturze 2-8°C. Mleko beztłuszczowe powinno być świeżo rozpuszczone, odwirowane z prędkością 10 000 obrotów na minutę przez 10 minut i przefiltrowane przez filtr szklany (Gelman Acrodisc). 7.

7. Inkubacja z pierwszym przeciwciałem przez 2 godziny w temperaturze pokojowej lub przez noc w temperaturze 4°C w roztworze blokującym. Preparat przeciwciała należy odwirować przed użyciem (10 000 g 5 min.). Optymalne rozcieńczenia robocze i czas inkubacji muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.

8. Płukać 4 x 10 min. za pomocą PBS-0,1% tween 20. Na tym etapie należy pominąć azydek.

9. Inkubacja z przeciwciałem drugorzędowym (kozie przeciwciało przeciwkrólicze sprzężone z HRP, na przykład Chemicon nr katalogowy AP132P, odpowiednio rozcieńczone) przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej.

10. Płukać 4 x 10 min. za pomocą PBS-0,1% tween 20.

11. Wykonać ECL przy użyciu komercyjnych zestawów (Chemilucent, numer katalogowy Chemicon 2600).

Wykrywaj KCa3.1 przy użyciu tego przeciwciała Anti-KCa3.1 zatwierdzonego do stosowania w WB.

Research Category
Neuroscience

Research Sub Category
Ion Channels & Transporters

Biochem/physiol Actions

KCa3.1 (Kanał K+ aktywowany pośrednim przewodnictwem Ca2+4, IKCa1, SK4, KCNN4)

Physical form

Immunoglobulina oczyszczona metodą powinowactwa. Liofilizowana z soli fizjologicznej buforowanej fosforanami, pH 7,4, zawierającej 1% BSA i 0,025% azydku sodu jako środka konserwującego. Rozpuścić w 50 μl sterylnej wody dejonizowanej. Przed użyciem odwirować preparat przeciwciała (10 000 xg przez 5 min).

Preparation Note

Przechowywać liofilizowany materiał w temperaturze -20°C przez okres do 12 miesięcy od daty otrzymania. Po rekonstytucji przechowywać w temperaturze -20°C w nierozcieńczonych podwielokrotnościach przez okres do 6 miesięcy. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania.

Analysis Note

Kontrola
Do przeciwciała dołączono bezpłatnie 40 μg antygenu kontrolnego. Roztwór podstawowy antygenu można sporządzić przy użyciu 100 μl sterylnej wody destylowanej. W przypadku kontroli negatywnej należy wstępnie inkubować 2 μg peptydu z 1 μg przeciwciała przez godzinę w temperaturze pokojowej. Optymalne stężenia muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.

Other Notes

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• hcodes: H412
• pcodes: P273 - P501
• Hazard Classifications: Aquatic Chronic 3
• Klasa składowania: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3