Wybierz wielkość
| Gabaryty przesyłki | SKU | Dostępność | Cena netto |
|---|---|---|---|
| 200 μL | Dostępne do wysyłki DZISIAJzKuehne + Nagel Sp. z o.o. | 2350,00 zł |
Informacje o tej pozycji
biological source
rabbit
Quality Level
antibody form
affinity isolated antibody
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
form
liquid
does not contain
preservative
species reactivity
mouse, rat, human
manufacturer/tradename
Calbiochem®
storage condition
OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles
dilution
(Immunoblotting (1:1000)
Immunocytochemistry (1:200))
isotype
IgG
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... MAPK8(5599)
General description
Immunogen
Application
Immunocytochemia (1:200)
Physical form
Preparation Note
Analysis Note
Komórki HEK293 poddane działaniu promieniowania UV
Other Notes
Coso, O.A., et al. 1995. Cell81, 1137.
Derijard, B., et al. 1994. Cell76, 1025.
Kyriakis, J.M., et al. 1994. Nature369, 156.
Hibi, M., et al. 1993. Genes Dev.7, 2135.
Kyriakis, J.M. and Avruch, J. 1990. J. Biol. Chem.265, 17355.
Zalecany protokół dla immunoblottingu
Roztwory i odczynniki
-Bufor transferowy: 25 mM zasada Tris, 0,2 M glicyna, 20% metanol, pH 8,5.
-SDS Sample Buffer: 62,5 mM Tris-HCl, pH 6,8, 2% SDS, 10% glicerol, 50 mM DTT, 0,1% błękit bromofenolowy.
-10X TBS (sól fizjologiczna buforowana Tris): Aby przygotować 1 litr, 24,2 g zasady Tris, 80 g NaCl, dostosować pH do 7,6 za pomocą HCl. Rozcieńczyć 1:10 do użycia.
-Bufor blokujący: 1X TBS, 0,1% Tween®-20 detergent z 5% beztłuszczowym suchym mlekiem.
-Bufor do rozcieńczania przeciwciał pierwotnych: 1X TBS, 0,1% Tween-20 detergent z 5% BSA
-Bufor do płukania (TBST): 1X TBS, 0,1% Tween-20 detergent
Membrana do blottingu
Można stosować membrany nitrocelulozowe lub PVDF.
Blotting białek
Ogólny protokół przygotowania próbek przy użyciu 2x106 komórek 293 na studzienkę w 6-dołkowej płytce jest następujący:
1. Zassać pożywkę. Poddać komórki działaniu świeżej pożywki zawierającej regulator przez żądany czas.
2. Odessać pożywkę z hodowli; przemyć komórki PBS; odessać.
3. Przeprowadzić lizę komórek, dodając 100 µl buforu SDS Sample Buffer i natychmiast zeskrobać komórki z płytki, a następnie przenieść ekstrakt do probówki. Przechowywać na lodzie.
4. Sonikować przez 2 s w celu ścinania DNA i zmniejszenia lepkości próbki.
5. Podgrzewać próbkę do 95-100°C przez 5 min. Schłodzić na lodzie.
6. Mikrowirować przez 5 min.
7. Nałożyć 20 µl na żel SDS-PAGE (10 cm x 10 cm).
8. Elektrotransfer na membranę nitrocelulozową.
Jako kontrolę zalecamy użycie 20 µl lizatu z komórek HEK293 poddanych działaniu promieniowania UV.
Blokowanie membrany, żel i inkubacja przeciwciał
1. Po przeniesieniu przemywać membranę 25 ml TBS przez 5 minut w temperaturze pokojowej.
2. Inkubować membranę w 25 ml buforu blokującego przez 1-3 h w temperaturze pokojowej lub przez noc w temperaturze 4°C.
3. Płukać 3 razy po 5 min w 15 ml TBST.
4. Inkubować membranę i przeciwciało pierwotne (w odpowiednim rozcieńczeniu) w 10 ml buforu do rozcieńczania przeciwciał pierwotnych z delikatnym mieszaniem przez noc w temperaturze 4°C.
5. Płukać 3 razy po 5 minut w 15 ml TBST.
6. Inkubować membranę ze sprzężonym przeciwciałem drugorzędowym w odpowiednim rozcieńczeniu w 10 ml buforu blokującego z delikatnym mieszaniem przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej.
7. Przemyć membranę jak w kroku 5.
Wykrywanie białek
Chemiluminescencja.
Legal Information
Disclaimer
1 of 1
Ta pozycja | |||
|---|---|---|---|
| Quality Level 100 | Quality Level - | Quality Level 100 | Quality Level 100 |
| biological source rabbit | biological source rabbit | biological source rabbit | biological source rabbit |
| antibody form affinity isolated antibody | antibody form affinity isolated antibody | antibody form affinity isolated antibody | antibody form purified antibody |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −70°C |
| clone polyclonal | clone polyclonal | clone polyclonal | clone polyclonal |
| species reactivity mouse, rat, human | species reactivity human, mouse, rat | species reactivity mouse, rat, human | species reactivity human, mouse, rat |
Still not finding the right product?
Wypróbuj nasze narzędzie Narzędzie selektora produktów, aby zawęzić opcje.
Klasa składowania
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 1
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Numer pozycji handlu globalnego
| SKU | NUMER GTIN |
|---|---|
| 559304-200UL | 04055977192421 |



