07-473

Przeciwciało przeciw trimetylo-histonowi H3 (Lys4)

Upstate^®, from rabbit

• Synonim(y): H3K4me3, histon H3 (tri metyl K4), rodzina histonów H3, członek T, histon 3, H3, klaster histonów 3, H3
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: human
• Application: ChIP, DB, ICC, WB
• Citations: 1097

Właściwości

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• antibody form: affinity isolated antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• mol wt: (~17 kDa observed; 15.51 kDa calculated.. Uncharacterized bands may be observed in some lysate(s).)
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): vertebrates (based on 100% sequence homology.)
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable (ChIP-seq), dot blot: suitable, immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: Q16695
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: trimethylation (Lys4)
• Gene Information: human ... H3C1(8350)

Opis

General description

Anti-trimethyl-Histone H3 (Lys4), Nr kat. 07-473, jest króliczym przeciwciałem poliklonalnym, które wykrywa trimetylację histonu H3 na lizynie 4 i jest testowane do stosowania w ChIP, Dot Blot, immunocytochemii i Western Blotting.

Histon H3.1t (UniProt: Q16695; znany również jako H3/t, H3t, H3/g) jest kodowany przez gen HIST3H3 (znany również jako H3FT) (Gene ID: 8290) u człowieka. Histony są wysoce konserwatywnymi podstawowymi białkami jądrowymi, które są odpowiedzialne za strukturę nukleosomową chromatyny u eukariontów. Odgrywają one kluczową rolę w regulacji transkrypcji, naprawie DNA, replikacji DNA i stabilności chromosomów. Dwie cząsteczki każdego z czterech podstawowych histonów (H2A, H2B, H3 i H4) tworzą oktamer, wokół którego DNA jest owinięte w powtarzające się jednostki, zwane nukleosomami, co ogranicza dostępność DNA dla maszyn komórkowych, które wymagają DNA jako szablonu. Histon H3 posiada główną domenę kulistą i długi N-końcowy ogon, który wystaje z kulistego rdzenia nukleosomu i może podlegać kilku różnym rodzajom modyfikacji epigenetycznych, które wpływają na procesy komórkowe. N-końcowe ogony białek histonowych podlegają modyfikacjom potranslacyjnym, w tym fosforylacji, acetylacji i metylacji, które rekrutują dalsze czynniki regulacyjne, wpływają na strukturę chromatyny i są krytycznymi determinantami transkrypcji. Histon H3 może ulegać acetylacji na kilku resztach lizyny w ogonie histonu przez acetylotransferazy histonowe. Acetylacja jest generalnie związana z aktywnością transkrypcyjną, a metylacja reszt lizyny i argininy może aktywować lub represjonować w zależności od zmodyfikowanej reszty. Trimetylacja histonu H3 jest jednym z najczęściej badanych znaczników epigenetycznych. Stwierdzono, że modyfikacje H3K4me3 występują konsekwentnie w miejscach rozpoczęcia transkrypcji, a domena H3K4me3 jest związana z wyższą aktywnością transkrypcji i tożsamością komórek w rozwoju przedimplantacyjnym oraz w procesie wyprowadzania embrionalnych komórek macierzystych z wewnętrznej masy komórkowej i komórek macierzystych trofoblastu z trophektodermy. (Ref.: Sharifi-Zarchi, A., et al. (2017). BMS Genomics. 18; Artykuł 964; Liu, X., et al. (2016). Nature. 537(7621); 558-562).

Oczyszczone królicze przeciwciało poliklonalne w buforze zawierającym 0,1 M Tris-Glicyny (pH 7,4), 150 mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu.

Immunogen

Epitop: Trimetylowany (Lys4)

Liniowy peptyd sprzężony z KLH odpowiadający 10 aminokwasom z N-końcowego regionu ludzkiego histonu H3 trimetylowanego na lizynie 4.

Application

Analiza ChIP:
Niezależne laboratorium wykazało, że to przeciwciało działa w immunoprecypitacji chromatyny (ChIP).
Analiza Dot Blot: Rozcieńczenie 1:10 000 z reprezentatywnej partii wykryło trimetylo-histonę H3 (Lys 4 ) w macierzy swoistości przeciwciał Absurance Histone H3 (nr kat. 16-667) i macierzy swoistości przeciwciał Absurance Histone H2A, H2B, H4 (nr kat. 16-665).
Analiza ChIP-seq:
Immunoprecypitację chromatyny przeprowadzono przy użyciu zestawu Magna ChIP HiSens (nr kat. 17-10460), 1 µL przeciwciała anty-trimetylo-histonowego H3 (Lys4) (nr kat. 07-473), 20 µL kulek Protein A/G i 1e6 usieciowanej chromatyny komórek HeLa, a następnie oczyszczono DNA za pomocą kulek magnetycznych. Biblioteki zostały przygotowane z próbek Input i ChIP DNA przy użyciu standardowych protokołów z adapterami Illumina z kodem kreskowym i analizowane na instrumencie Illumina HiSeq. Ponad osiemnaście milionów odczytów z plików FastQ zmapowano za pomocą Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) po usunięciu tagów TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/). Piki zostały zidentyfikowane przy użyciu MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/), z pikami i odczytami wizualizowanymi jako niestandardowa ścieżka w UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) z plików BigWig i BED. Najwyższe 25% pików zidentyfikowanych w zbiorze danych 07-473 wykazało 99% pokrycie z pikami zidentyfikowanymi w ścieżce ENCODE H3K4me3 BROAD Histone dla HeLa S3.

Anti-trimethyl-Histone H3 (Lys4), Nr kat. 07-473, jest króliczym przeciwciałem poliklonalnym, które wykrywa trimetylację histonu H3 na lizynie 4 i jest testowane do stosowania w ChIP, Dot Blot, immunocytochemii i Western Blotting.

Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe

Podkategoria badawcza
Histony

Biochem/physiol Actions

To królicze przeciwciało poliklonalne specyficznie wykrywa trimetylację histonu H3 na lizynie 4 (H3Kme3).

Physical form

Oczyszczone przez powinowactwo królicze przeciwciało poliklonalne w buforze zawierającym 0,1M Tris-Glicyna (pH 7,4), 150mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu.

Oczyszczony przez powinowactwo

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze 2-8°C od daty otrzymania.

Analysis Note

Evaluated by Western Blotting on HeLa acid extracted nuclear preps (positive) and recombinant Histone H3 (negative).

Western Blotting Analysis:
1:5,000 – 1:10,000 dilution of this antibody was used to detect trimethylated-Histone H3 (Lys4) in HeLa nuclear acid extracts.

Kontrola
Ekstrakty jądrowe HeLa

Other Notes

Zastępuje: 04-791

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids