Przejdź do
PP2381
Zestaw wektorów peptydów sygnałowych drożdży
plasmid vectors for molecular cloning
Synonim(y):
szybki wektor
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Informacje o tej pozycji
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: TEF1
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast
Origin of replication:
2Micron, pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Peptide cleavage:
TEV, no cleavage
tag
6-His tagged
form
buffered aqueous solution
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
2Micron, pUC (500 copies)
peptide cleavage
TEV, no cleavage
peptide tag location
N-terminal
promoter
Promoter name: TEF1
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast
secretion signal
Inulase, alpha factor FL, alpha factor SP, alpha-amylase, glucoamylase
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
Klonowanie molekularne często korzysta z optymalizacji wektora używanego do ekspresji.
Zestaw wektorów peptydów sygnałowych drożdży umożliwia porównanie aktywności dziewięciu różnych znaczników wydzielniczych drożdży (peptydów sygnałowych) w celu określenia, który z nich jest preferowany dla danego genu. Najbardziej wydajny znacznik wydaje się zależeć od białka będącego przedmiotem zainteresowania, a także od użytych komórek, dlatego uważamy, że ważne jest porównanie kilku znaczników w celu wybrania najlepszego. Wstawienie interesującego genu do MCS tych plazmidów spowoduje umieszczenie go za peptydem sygnałowym, pod kontrolą regulacyjną silnego promotora TEF1 drożdży. Ten zestaw plazmidów został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie używanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny można wstawiać przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.
Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: Istnieje kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca poniżej do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA z kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania. Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początek i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne lokalizacje kodonów start i stop.
Zakończenie transkrypcji: Plazmidy do klonowania molekularnego zawierają trzy alternatywne terminatory transkrypcji dla ekspresji bakterii ssaków i bakteriofagów (T7). Oznacza to, że tylko promotor musi zostać zmieniony, aby zmienić używany system ekspresji. Sprzedajemy wiele promotorów, które mogą być używane w każdym z tych systemów. Obecność każdego terminatora nie zmniejsza ekspresji w alternatywnych systemach.
Zestaw wektorów peptydów sygnałowych drożdży umożliwia porównanie aktywności dziewięciu różnych znaczników wydzielniczych drożdży (peptydów sygnałowych) w celu określenia, który z nich jest preferowany dla danego genu. Najbardziej wydajny znacznik wydaje się zależeć od białka będącego przedmiotem zainteresowania, a także od użytych komórek, dlatego uważamy, że ważne jest porównanie kilku znaczników w celu wybrania najlepszego. Wstawienie interesującego genu do MCS tych plazmidów spowoduje umieszczenie go za peptydem sygnałowym, pod kontrolą regulacyjną silnego promotora TEF1 drożdży. Ten zestaw plazmidów został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie używanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny można wstawiać przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.
Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: Istnieje kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca poniżej do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA z kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania. Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początek i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne lokalizacje kodonów start i stop.
Zakończenie transkrypcji: Plazmidy do klonowania molekularnego zawierają trzy alternatywne terminatory transkrypcji dla ekspresji bakterii ssaków i bakteriofagów (T7). Oznacza to, że tylko promotor musi zostać zmieniony, aby zmienić używany system ekspresji. Sprzedajemy wiele promotorów, które mogą być używane w każdym z tych systemów. Obecność każdego terminatora nie zmniejsza ekspresji w alternatywnych systemach.
Analysis Note
To view the Certificate of Analysis for this product, please visit www.oxfordgenetics.com.
Other Notes
Linki do sekwencji Genebank, sekwencji FASTA, mapy plazmidu Quick-reference i pełnej mapy plazmidu znajdują się na stronie poszczególnych produktów wektorowych.
Szukasz więcej opcji wektorów, aby przyspieszyć swoje eksperymenty? Rozważ niestandardowy wektor do klonowania zaprojektowany i zbudowany przez Oxford Genetics™. Więcej informacji można znaleźć na stronie Oxford Genetics - partnera firmy Sigma w zakresie wektorów do klonowania i ekspresji do zastosowań w biologii molekularnej i biologii syntetycznej.
Legal Information
Plazmidy te są sprzedawane bez praw dostępu i mogą być wykorzystywane do wytwarzania produktów komercyjnych. Jednak same plazmidy (lub ich pochodne) nie mogą być sprzedawane.
Oxford Genetics is a trademark of Oxford Genetics Ltd
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Elementy zestawu są też dostępne oddzielnie
Numer produktu
Opis
Karta charakterystyki & Cennik
Klasa składowania
12 - Non Combustible Liquids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.