SCR703

Ludzki OKSG-cMyc Simplicon^® RNA

• UNSPSC Code: 12352207
• NACRES: NA.51
• eCl@ss: 32161000

Właściwości

• technique(s): cell culture | stem cell: suitable
• Quality Segment: 100
• input: sample type induced pluripotent stem cell(s)
• shipped in: ambient
• storage temp.: -65 to -96°C

Opis

General description

Opracowano różne metody wykorzystujące wirusy, DNA, RNA, miRNA i białka do generowania wolnych od integracji indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC). Wady istniejących metod obejmują: (1) niską skuteczność przeprogramowania (tj. DNA i białka), (2) długotrwały wymóg selekcji negatywnej i etapów subcloingu w celu usunięcia trwałych śladów wirusa (tj. wirusa Sendai)1 oraz (3) codzienną transfekcję komórek przy użyciu czterech syntetycznych mRNA w okresie 14 dni (tj.

Simplicon^® OKSG-cMyc RNA firmy EMD Millipore wykorzystuje bezpieczną i wydajną metodę generowania wolnych od integracji i wirusów ludzkich komórek iPSC przy użyciu jednego etapu transfekcji. Technologia ta wykorzystuje pojedynczy samoreplikujący się gatunek RNA wenezuelskiego końskiego zapalenia mózgu (VEE), który wyraża ORFy czynników reprogramujących (RF)3. Replikon RNA Simplicon to syntetyczny polikistroniczny RNA VEE-RF wyrażający pięć czynników reprogramujących (OKSG-cMyc; Oct4, Klf4, Sox2, Glis1 i cMyc), zdolny do samoreplikacji w ograniczonej liczbie podziałów komórkowych. Pięcioczynnikowy OKSG-cMyc Simplicon jest szczególnie przydatny do generowania iPSC z komórek somatycznych, które są trudniejsze do przeprogramowania (tj. wolniej proliferujące komórki lub starzejące się komórki somatyczne).

Application

Zalety Simplicon^® OKSG-cMyc RNA:

• Generowanie iPSC bez integracji i bez pozostawiania śladów. Brak ryzyka integracji genomu.
• Bezpieczny, wolny od wirusów, syntetyczny policistronowy replikon RNA (wszystkie pięć czynników przeprogramowujących w pojedynczej nici RNA).
• Wymagana tylko jedna transfekcja. Replikon RNA jest zdolny do samoreplikacji, eliminując potrzebę dodatkowej codziennej transfekcji wielu pojedynczych mRNA w ciągu 14 dni.
• Wydajne i szybkie przeprogramowanie.
• Brak konieczności przeprowadzania badań przesiewowych w celu zapewnienia braku pozostałości wirusa.
• Kontrolowana eliminacja syntetycznego replikonu VEE RNA poprzez usunięcie białka B18R.
• Zatwierdzony do przeprogramowania w warunkach hodowli bez podajnika i z podajnikiem.

Research Category
Stem Cell Research

Preparation Note

RNA VEE-OKSG-cMyc i B18R: Stabilny przez 4 miesiące od daty otrzymania, jeśli jest odpowiednio przechowywany w temperaturze -80°C. Aby uzyskać najlepszy odzysk, należy szybko odwirować fiolkę po rozmrożeniu na lodzie i przed otwarciem. Rozdzielić do sterylnych, wolnych od nukleaz probówek typu eppendorf na lodzie i przechowywać w temperaturze -80°C. Ograniczyć powtarzanie cykli zamrażania-rozmrażania. Używać w sterylnym środowisku wolnym od RNazy.

Analysis Note

Tested to confirm the generation of iPS cells from p6 human foreskin fibroblasts. Other cell types have not been tested and thus similar results can not be guaranteed.

Other Notes

1. VEE-OKSG-cMyc RNA: (Part No. CS221303) One (1) vial containing 10 L of RNA (1 ug/uL). Store at -80°C.

2. B18R-E3L RNA: (Part No. CS224503) One (1) vial containing 10 L of RNA (1 ug/uL). Store at -80°C.

Legal Information

SIMPLICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable