MAB5300
Przeciwciało przeciw dopaminie, klon K56A
clone K56A, Chemicon®, from mouse
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Informacje o tej pozycji
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Clone:
K56A, monoclonal
Species reactivity:
rat
Application:
IHC
Citations:
14
biological source
mouse
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
K56A, monoclonal
species reactivity
rat
manufacturer/tradename
Chemicon®
technique(s)
immunohistochemistry: suitable
isotype
IgG
shipped in
dry ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
rat ... Slc6A3(24898)
Immunogen
Dopamina-Gluteraldehyd-BSA.
Application
Immunohistochemia: 1:500-1:2,500 przy użyciu swobodnie pływających skrawków techniką PAP na obszarach dopaminergicznych szczura.
Optymalne rozcieńczenia robocze muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.
PROTOKÓŁ wykrywania dopaminy metodą immunohistochemiczną/cytochemiczną. Przykład dla mózgu szczura.
1. ROZTWORY DO PRZYGOTOWANIA - Roztwory należy przygotować w zależności od potrzeb.
Roztwór A: 0,1M kakodylan, 10g/L metabisiarczyn sodu, pH 6,2.
Roztwór B: 0,1M kakodylanu, 10g/L metabisiarczynu sodu, 3-5% aldehydu glutarowego, pH 7,5.
2. PERFUZJA SZCZURA - Szczur jest znieczulany pentobarbitalem sodu lub Nembutalem i perfundowany wewnątrzsercowo przez aortę za pomocą pompy z roztworem A (30 ml): 150-300 ml/min, roztworem B (500 ml): 150-300 ml/min.
3. POST FIXATION: 15 do 30 minut w roztworze B, a następnie 4 płukania w 0,05M Tris z 8,5 g/L metabisiarczynem sodu, pH 7,5 (roztwór C).
4. SKROJENIE TKANKI: Można użyć skrawków z wibrotomu lub kriostatu.
5. ETAP REDUKCJI: Skrawki są redukowane roztworem C zawierającym 0,1M borohydryku sodu przez 10 minut. Skrawki są płukane 4 razy w roztworze C bez borohydratu sodu.
6. ZASTOSOWANIE PRZECIWCIAŁA DOPAMINY: Użyć końcowego rozcieńczenia 1:2,500-1:10,000 w roztworze C zawierającym 0,1% Triton X100 i 2% surowicy niespecyficznej. Inkubować 12 skrawków na 2 ml rozcieńczonego przeciwciała przez noc w temperaturze +4°C. Następnie płukać skrawki trzy razy po 10 minut w roztworze C. (Należy pamiętać, że przeciwciało może być użyteczne w wyższym rozcieńczeniu. Należy to sprawdzić, aby zminimalizować możliwość wystąpienia wysokiego tła. Ponadto należy pamiętać, że zmiana systemu buforowania, jak wskazano w protokole, może zmienić tło i rozpoznawanie przeciwciała). Specyficzna reakcja jest następnie ujawniana przez procedurę PAP.
6. DRUGIE PRZECIWCIAŁO: Inkubować skrawki z rozcieńczeniem 1:50 do 1:200 koziego przeciwciała anty-króliczego w roztworze B zawierającym 1% niespecyficznej surowicy przez 3 godziny w temperaturze 20°C lub 2 godziny w temperaturze 37°C. Następnie przepłukać skrawki 3 razy po 10 minut roztworem B.
7. PAP: Inkubować skrawki z odpowiednim rozcieńczeniem antyperoksydazy peroksydazowej (dla metody free floating) w roztworze B zawierającym 1% niespecyficznej surowicy przez 1-2 godziny w temperaturze 37°C. Następnie płukać skrawki 3 razy po 10 minut w roztworze B.
8. WIZUALIZACJA: Kompleksy antygen-przeciwciało są wizualizowane przy użyciu DAB-4-HCl (25 mg/100 mL) (lub innego chromogenu) w 0,05M Tris i filtrowane; dodawany jest 0,05% nadtlenek wodoru. Inkubować skrawki przez 10 minut w temperaturze pokojowej. Zatrzymać reakcję, przenosząc skrawki do 5 ml 0,05M Tris. Przemyć tkankę roztworem D stosując 2, 10-minutowe płukania. Zamontować skrawki na szkiełkach pokrytych chromem i aluminium. Suszyć przez noc w temperaturze 37°C. Nawodnić skrawki stosując konwencjonalne procedury histologiczne. Nałożyć szkiełko nakrywkowe przy użyciu środków do szybkiego montażu.
Wyłącznie do użytku badawczego; nie do użytku diagnostycznego.
Optymalne rozcieńczenia robocze muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.
PROTOKÓŁ wykrywania dopaminy metodą immunohistochemiczną/cytochemiczną. Przykład dla mózgu szczura.
1. ROZTWORY DO PRZYGOTOWANIA - Roztwory należy przygotować w zależności od potrzeb.
Roztwór A: 0,1M kakodylan, 10g/L metabisiarczyn sodu, pH 6,2.
Roztwór B: 0,1M kakodylanu, 10g/L metabisiarczynu sodu, 3-5% aldehydu glutarowego, pH 7,5.
2. PERFUZJA SZCZURA - Szczur jest znieczulany pentobarbitalem sodu lub Nembutalem i perfundowany wewnątrzsercowo przez aortę za pomocą pompy z roztworem A (30 ml): 150-300 ml/min, roztworem B (500 ml): 150-300 ml/min.
3. POST FIXATION: 15 do 30 minut w roztworze B, a następnie 4 płukania w 0,05M Tris z 8,5 g/L metabisiarczynem sodu, pH 7,5 (roztwór C).
4. SKROJENIE TKANKI: Można użyć skrawków z wibrotomu lub kriostatu.
5. ETAP REDUKCJI: Skrawki są redukowane roztworem C zawierającym 0,1M borohydryku sodu przez 10 minut. Skrawki są płukane 4 razy w roztworze C bez borohydratu sodu.
6. ZASTOSOWANIE PRZECIWCIAŁA DOPAMINY: Użyć końcowego rozcieńczenia 1:2,500-1:10,000 w roztworze C zawierającym 0,1% Triton X100 i 2% surowicy niespecyficznej. Inkubować 12 skrawków na 2 ml rozcieńczonego przeciwciała przez noc w temperaturze +4°C. Następnie płukać skrawki trzy razy po 10 minut w roztworze C. (Należy pamiętać, że przeciwciało może być użyteczne w wyższym rozcieńczeniu. Należy to sprawdzić, aby zminimalizować możliwość wystąpienia wysokiego tła. Ponadto należy pamiętać, że zmiana systemu buforowania, jak wskazano w protokole, może zmienić tło i rozpoznawanie przeciwciała). Specyficzna reakcja jest następnie ujawniana przez procedurę PAP.
6. DRUGIE PRZECIWCIAŁO: Inkubować skrawki z rozcieńczeniem 1:50 do 1:200 koziego przeciwciała anty-króliczego w roztworze B zawierającym 1% niespecyficznej surowicy przez 3 godziny w temperaturze 20°C lub 2 godziny w temperaturze 37°C. Następnie przepłukać skrawki 3 razy po 10 minut roztworem B.
7. PAP: Inkubować skrawki z odpowiednim rozcieńczeniem antyperoksydazy peroksydazowej (dla metody free floating) w roztworze B zawierającym 1% niespecyficznej surowicy przez 1-2 godziny w temperaturze 37°C. Następnie płukać skrawki 3 razy po 10 minut w roztworze B.
8. WIZUALIZACJA: Kompleksy antygen-przeciwciało są wizualizowane przy użyciu DAB-4-HCl (25 mg/100 mL) (lub innego chromogenu) w 0,05M Tris i filtrowane; dodawany jest 0,05% nadtlenek wodoru. Inkubować skrawki przez 10 minut w temperaturze pokojowej. Zatrzymać reakcję, przenosząc skrawki do 5 ml 0,05M Tris. Przemyć tkankę roztworem D stosując 2, 10-minutowe płukania. Zamontować skrawki na szkiełkach pokrytych chromem i aluminium. Suszyć przez noc w temperaturze 37°C. Nawodnić skrawki stosując konwencjonalne procedury histologiczne. Nałożyć szkiełko nakrywkowe przy użyciu środków do szybkiego montażu.
Wyłącznie do użytku badawczego; nie do użytku diagnostycznego.
Przeciwciało antydopaminowe, klon K56A wykrywa poziom dopaminy i zostało opublikowane i zatwierdzone do stosowania w IH.
Research Category
Neuroscience
Neuroscience
Research Sub Category
Neurotransmitters & Receptors
Neurotransmitters & Receptors
Biochem/physiol Actions
Dopamina.
Reaktywność krzyżową określono za pomocą testu ELISA poprzez eksperymenty konkurencji z następującymi związkami:
Związek Reaktywność krzyżowa
Dopamina-G-BSA 1
L-DOPA-G-BSA 1/10,000
Tyrozyna-G-BSA 1/36,000
Tyramina-G-BSA 1/>50,000
Noradrenalina-G-BSA 1/>50,000
Oktopamina-G-BSA 1/>50,000
Adrenalina-G-BSA 1/>50,000
Dopamina 1/>50,000
Skróty:
(G) Glutaraldehyd
(BSA) Albumina surowicy bydlęcej
Reaktywność krzyżową określono za pomocą testu ELISA poprzez eksperymenty konkurencji z następującymi związkami:
Związek Reaktywność krzyżowa
Dopamina-G-BSA 1
L-DOPA-G-BSA 1/10,000
Tyrozyna-G-BSA 1/36,000
Tyramina-G-BSA 1/>50,000
Noradrenalina-G-BSA 1/>50,000
Oktopamina-G-BSA 1/>50,000
Adrenalina-G-BSA 1/>50,000
Dopamina 1/>50,000
Skróty:
(G) Glutaraldehyd
(BSA) Albumina surowicy bydlęcej
Physical form
Format: Oczyszczony
Oczyszczona immunoglobulina. Płyn zawierający 50% glicerolu.
Preparation Note
Przechowywać w temperaturze -20°C w nierozcieńczonych podwielokrotnościach przez okres do 6 miesięcy od daty otrzymania.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Still not finding the right product?
Wypróbuj nasze narzędzie Narzędzie selektora produktów, aby zawęzić opcje.
Klasa składowania
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.