CBA042

InnoZyme TACE Activity Kit

• Synonim(y): Zestaw aktywności ADAM17, zestaw aktywności α-sekretazy, zestaw aktywności enzymu konwertującego TNF-α, Zestaw aktywności sekretazy α, zestaw aktywności enzymu konwertującego TNF-α, zestaw aktywności ADAM17
• NACRES: NA.84
• UNSPSC Code: 41116133

Właściwości

• usage: sufficient for 96 tests
• Quality Level: 100
• packaging: pkg of 1 96-well plate(s)
• manufacturer/tradename: Calbiochem^®
• storage condition: OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles, protect from light
• assay range: standard curve range: 5-100 ng/mL; (as measured with purified recombinant human TACE)
• input: sample type cells
• detection method: fluorometric
• shipped in: wet ice

Opis

General description

Zestaw InnoZyme TACE Activity Kit to specyficzny i czuły test przeznaczony do pomiaru aktywności ludzkiej TACE w lizatach komórkowych i próbkach biologicznych oraz do badań przesiewowych inhibitorów enzymu. 96-dołkowa płytka pokryta anty-ludzką TACE jest wstępnie pokryta przeciwciałem monoklonalnym specyficznym dla ludzkiej TACE, które wychwytuje enzym. Niezwiązany materiał jest odrzucany, płytka jest płukana, a aktywność wychwyconej TACE jest mierzona przy użyciu wewnętrznie wygaszonego substratu fluorescencyjnego, MCA-KPLGL-Dpa-AR-NH2. Rozszczepienie wiązania amidowego, G-L, uwalnia fluorofor z cząsteczki wygaszającej, Dpa, powodując wzrost fluorescencji. Fluorescencja rozszczepionego produktu, MCA-KPLG, jest mierzona przy długości fali wzbudzenia ~324 nm i długości fali emisji ~400 nm. Poziom fluorescencji jest bezpośrednio związany z aktywnością enzymu.

- Wysoka specyficzność: w oparciu o immunokapsulację ludzkiej TACE
- Wysoka czułość i ilość: zakres testu 5-100 ng/ml
- Wygoda: format 96-dołkowy i nieradioaktywna detekcja
- Wszechstronność: odpowiedni do pomiaru aktywnej TACE i wysokoprzepustowych badań przesiewowych inhibitorów TACE

Biochem/physiol Actions

Zestaw InnoZyme TACE Activity Kit jest przeznaczony do pomiaru aktywności ludzkiej TACE w lizatach komórkowych i próbkach biologicznych. Test może być również stosowany do badań przesiewowych inhibitorów enzymu, ale użytkownik końcowy musi dostarczyć oczyszczony enzym do tego zastosowania.

Preparation Note

Wszystkie odczynniki niezbędne do przeprowadzenia testu są dostarczane wraz z zestawem. Bezpośrednio przed użyciem ogrzać wszystkie odczynniki do temperatury pokojowej (15-25°C). Do analizy próbek biologicznych wymagane jest następujące przygotowanie odczynników:- Wash Buffer (1X): Rozcieńczyć bufor płuczący w stosunku 1:20 z _dH2O. Aby przygotować bufor płuczący (1X) do pojedynczego etapu płukania całej płytki, dodaj 2 ml buforu płuczącego do 38 ml _dH2O. - Kontrola: Rozcieńczyć kontrolę schłodzonym buforem do próbek. Ważna uwaga: Po wstępnym rozmrożeniu Kontrolę należy rozdzielić na podwielokrotności i przechowywać w temperaturze -70°C. Unikać cykli zamrażania/rozmrażania. Unikać cykli zamrażania/rozmrażania.- Substrat (1X): Rozcieńczyć substrat 1:200 buforem testowym. Aby przygotować substrat (1X) na całą płytkę, dodaj 50 µl substratu do 9,95 ml buforu testowego. Do badań przesiewowych inhibitorów wymagane jest następujące dodatkowe przygotowanie odczynników:- Inhibitor(y) testowy(e): W razie potrzeby przygotuj rozcieńczenia inhibitorów testowych w buforze testowym.- Rozcieńczony substrat: Rozcieńczyć substrat w stosunku 1:50 z buforem testowym. Aby przygotować substrat dla całej płytki, dodaj 40 µl substratu do 1,95 ml buforu testowego.

Po otrzymaniu nieotwarty zestaw należy przechowywać w temperaturze -20°C lub -70°C. Wszystkie składniki zestawu po otwarciu mogą być przechowywane do 3 miesięcy w następujących warunkach:



Przechowywać w lodówce (4°C):

Bufor do próbek

Bufor testowy

Bufor płuczący

Substrat

96-dołkowa płytka pokryta anty-ludzkim TACE



Głębokie zamrożenie (-70°C):

Kontrola*



*Uwaga: Po pierwszym użyciu kontrola powinna być dozowana do podwielokrotności i przechowywana w temperaturze -70°C. Unikać cykli zamrażania/rozmrażania.

Zalecane wytyczne dotyczące przygotowania próbek:1. Całkowite stężenie białka w lizatach komórkowych powinno wynosić >5 mg/ml2. Współczynnik rozcieńczenia dla lizatów komórkowych o stężeniu >5 mg/ml wynosi około 1:20 lub więcej.

Analysis Note

Kontrola pozytywna
Ludzka rekombinowana TACE

Wyniki są wyświetlane we względnych jednostkach fluorescencji (RFU): 1. Skorygować fluorescencję każdej próbki i kontroli, odejmując fluorescencję próby ślepej. 2. Obliczyć średnią fluorescencję dla każdej próbki i kontroli z podwójnych odczytów, aby uzyskać ostateczną wartość RFU.

Other Notes

Kirkegaard, T., et al. 2004. Clin. Exp. Immunol.135, 146.
Neumann, U., et al. 2004. Anal. Biochem.328, 166.
Skovronsky, D.M., et al. 2001. J. Neurobiol.49, 40.
Black, R.A., et al. 1997. Nature385, 729.
Moss, M.L., et al. 1997. Nature385, 733.



Wybrane cytowania
DasGupta S., et al. 2009. Bioorg. Med. Chem.</A>17, 3604.

Anti-Human TACE-Coated 96-Well Plate, Control, Substrate, Sample Buffer, Assay Buffer, Wash Buffer, Plate Sealer, and a user protocol.

anti-human TACE-coated 96-well plate, TACE control, substrate, sample buffer, assay buffer, wash buffer, plate sealer, user protocol

Legal Information

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toksyczność: Wiele wartości toksyczności, patrz MSDS (O)

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10-13 - German Storage Class 10 to 13