17-671

ChIPAb+ Trimethyl-Histone H4 (Lys20) - przeciwciało z walidacją ChIP i zestaw primerów, królicze monoklonalne

culture supernatant, from rabbit

• Synonim(y): H4K20me3, histon H4 (tri metyl K20), rodzina histonów H4, członek A, histon 1, H4a, klaster histonów 1, H4a
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: monoclonal
• Species reactivity: human, vertebrates, plant
• Application: ChIP, IP, WB
• Citations: 1

Właściwości

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• antibody form: culture supernatant
• clone: monoclonal
• species reactivity: human, vertebrates, plant
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_003538.3
• UniProt accession no.: P62805
• shipped in: dry ice

Opis

General description

Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ Trimethyl-Histone H4 (Lys20) zawiera przeciwciało Anti-trimethyl-Histone H4 (Lys20), supernatant kontroli ujemnej i startery qPCR, które amplifikują region 110 bp w promotorze genu ludzkiejβ-globiny. Przeciwciała trimetylo-histonu H4 (Lys20) i kontroli ujemnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z trimetylo-histonem H4 (Lys20).

~11 kDa

Immunogen

Epitop: n.d. 18-22

Przeciwciało trimetylowe histonu H4 (Lys20) jest wytwarzane przeciwko syntetycznemu peptydowi odpowiadającemu aminokwasom 18-22 histonu H4. trimetylowany na lizynie 20.

Application

Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (2 X¹⁰⁶ równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 10 μL supernatantu kontroli negatywnej lub przeciwciała przeciw trimetylohistonowi H4 (Lys20) i zestawu Magna ChIP A (nr części 17-610). Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z trimetylohistonem H4 (Lys20) została zweryfikowana za pomocą qPCR przy użyciu Primerów ChIP β-globiny w porównaniu z Primerami kontrolnymi odpowiadającymi promotorowi GAPDH (patrz rysunki). Dane są przedstawione jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej, z immunoprecypitowanym DNA z supernatantu kontroli ujemnej pokazanym jako (-) i trimetylowym histonem H4 (Lys20) pokazanym jako (+).
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).

Analiza Western Blot:
Ekstrakty kwasowe z komórek HeLa nietraktowanych lub wstępnie zaabsorbowanych 1 μM trimetylowanego (Lys20) peptydu histonu H4 (odpowiednio paski 1 i 2) były sondowane anty-trimetylo-Histon H4 (Lys20) (1:1,000) (patrz rysunki).

Analiza Dot Blot: Absurance Histone H3 Antibody Specificity Array (nr kat. 16-667) i Absurance Histone H2A, H2B, H4 Antibody Specificity Array (nr kat. 16-665), które zawierają peptydy histonowe z różnymi modyfikacjami, były sondowane za pomocą Cat. 04-079, Anti-trimethyl-Histone H4 (Lys20); rozcieńczenie 1:500. Białka były wizualizowane przy użyciu anty-króliczej IgG osła skoniugowanej z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji.

Zestaw ChIPAb+ Trimethyl-Histone H4 (Lys20) -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Research Category
Epigenetics & Nuclear Function

Research Sub Category
Chromatin Biology

Histones

Biochem/physiol Actions

Nie testowano na innych gatunkach. Sekwencja immunogenu jest identyczna u wielu gatunków zwierząt i roślin, więc spodziewana jest szeroka reaktywność krzyżowa.

Rozpoznaje histon H4, Mr 11 kDa

Packaging

10 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~10 μL przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).

Physical form

Anty-trimetylo-histon H4 (Lys20) (królicza monoklonalna IgG). Jedna fiolka zawierająca 100 μl supernatantu hodowli komórkowej w 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Supernatant kontroli negatywnej. Jedna fiolka zawierająca 100 μL supernatantu hodowli komórkowej królika monoklonalnego w 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery ChIP B-Globin. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiej β-globiny. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Kontrola
Zawiera przeciwciało królicze kontroli ujemnej i startery kontrolne specyficzne dla ludzkiego promotora β-globiny.

Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 10⁶ cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using 10 µL of either a negative control supernatant, or Anti-Trimethyl-Histone H4 (Lys20) antibody and the Magna ChIP^® A Kit (Cat. # 17-610).
Successful immunoprecipitation of trimethyl-histone H4 (Lys20)-associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers B-Globin.
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 1