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form
lyophilized
packaging
pkg of 100 mg (05466202001 [2 x 50 mg]), pkg of 10 mg (05401160001 [2 x 5 mg])
manufacturer/tradename
Roche
parameter
35-37 °C optimum reaction temp.
optimum pH
7.4
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
Application
Features and Benefits
- クロストリパインとトリプシンの活性が低く、エンドトキシンの含量を抑えた酵素ブレンドを用いることで、分離細胞の生存率と収率を最大化します。
- この酵素ブレンドは、コラゲナーゼI + IIの純度(HPLC分析により測定)が高いことから、高い比活性を期待できます。
- ロット間の一貫性が高いため、実験の再現性が高くなります。
Preparation Note
ワーキング濃度:リベラーゼリサーチグレード酵素ワーキング濃度
リベラーゼ酵素は、従来のコラゲナーゼよりも非常に高い比活性を示します。これはmg/mLを単位として表記されるリベラーゼリサーチグレード精製酵素のワーキング濃度が、従来のコラゲナーゼの使用濃度よりも低いことを意味します。
アプリケーションがwww.collagenase.comで示されたRocheのアプリケーションリストにある場合、そのアプリケーションに推奨されるリベラーゼリサーチグレードの濃度を用いてください。
アプリケーションがこのリストに記載されていない場合は、最初に0.08~0.28 Wünsch units/mLの濃度でリベラーゼTMリサーチグレードを使用してください。
リベラーゼリサーチグレード酵素混合物の最適な開始濃度を決定することが望まれます。これは出発点であり、手順の違いや従来のコラゲナーゼのロット間の違いにより、最終濃度が変わる場合があります。
コラゲナーゼワーキング濃度
前のコラゲナーゼワーキング濃度(mg/mL)とその比活性(Wünsch単位/mg、[上記で決定])を掛ければ、Wünsch単位/mLが得られます。使用するリベラーゼリサーチグレード酵素混合物の量を決定するために、まず、コラゲナーゼワーキング濃度(Wünsch単位/mL)にワーキング酵素溶液の総量を掛けて、必要な総コラゲナーゼ活性(Wünsch単位)を得てください。次に、必要な総コラゲナーゼ活性をリベラーゼリサーチグレード保存溶液濃度で割ります(「再構成と保存」)。これはワーキング酵素溶液に使用するリベラーゼリサーチグレード酵素混合物保存溶液のミリリットル数を示しています。
保存条件(ワーキング溶液):未使用の保存溶液は、単回使用のアリコートにして-15~-25°Cで保管してください。製品の安定性に関する詳細については、Rocheリベラーゼ酵素のウェブサイトをご覧ください。www.collagenase.com.
注:凍結融解の繰返しはしないでください。
全バイアルを復元調製してください。凍結乾燥物の個々のアリコートを計量しないでください。バイアルの中に水分が混入すると、酵素活性が低下します。
バイアルを氷上に置き、凍結乾燥した酵素を再水和します。
酵素が完全に溶解するまで、2~8°Cでバイアルを穏やかに攪拌(最大30分間)してください。
リベラーゼリサーチグレード精製酵素混合物を溶解するために使用する組織解離緩衝液の種類によっては、わずかな沈殿が希釈されたワーキング溶液に容易に溶解し、酵素活性に影響しないことが観察される場合もあります。
保存溶液のアリコートを取り出し、ワーキング溶液を調製してください。
再構成用量
2 mL(1バイアルに5 mg~10 mg入り)
10 mL(1バイアルに50 mg~100 mg入り)
コラゲナーゼWünsch (単位/mL)
13(1バイアルに5 mg~10 mg入り)
26(1バイアルに50 mg~100 mg入り)
総コラゲナーゼ濃度[mg/mL]
2.5(1バイアルに5 mg~10 mg入り)
5.0(1バイアルに50 mg~100 mg入り)
Other Notes
Legal Information
signalword
Danger
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
保管分類
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_c
does not flash
プロトコル
Your current tissue dissociation protocol, and the extent to which you have been successful with traditional collagenase are good guides for selecting the appropriate Liberase Enzyme Blend.
関連コンテンツ
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コラゲナーゼガイド。動物組織を結合する天然コラーゲンを分解する酵素であるコラゲナーゼは、さまざまな微生物や多様な動物細胞によって作られます。
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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