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HPLCバッファー

バッファーとは、弱酸とその共役塩基または弱塩基とその共役酸からなる溶液です。分析化学においては、通常、酸性または塩基性の官能基を含むサンプルの逆相高速液体クロマトグラフィー（RP-HPLC）でバッファーを用います。バッファーは、水素／ヒドロニウムイオンおよび水酸化物イオンの影響を緩和することにより、pHの変動を押さえます。

移動相バッファー
HPLCバッファーを選ぶ際に考慮するポイント

移動相バッファー

イオン性分析対象物質のためのRP-HPLCでは、緩衝塩の種類、イオン強度およびpHの点から適切なバッファーを選ぶことが最も重要です。基本的に、RP-HPLCにおけるイオン性分析対象物質の保持は、移動相のpHが影響します。したがって、RP-HPLCにおける移動相のpHコントロールは、分析対象物質の効率のよい分離のために最も重要なパラメータの1つです。

シリカベースカラムでの逆相分離におけるpHは通常、2～8の範囲です。バッファーは、そのpKa値においてもっともよくpHをコントロールするため、pKa値は求められるpHに近くなければなりません。経験則では、求められる移動相のpHから2未満しか離れていないpKa値のバッファーを選ぶのが理想的とされています。メルクは、ラボのクロマトグラフィー要件すべてに対応できる幅広いpH範囲のHPLCグレードバッファーを提供しています。

HPLCバッファーを選ぶ際に考慮するポイント

化学的純度

HPLC分析で使用する移動相添加物（緩衝液、塩、酸および塩基）ならびに有機溶媒の品質は、検出器の感度および溶出プロトコルに適していなければなりません。最適なクロマトグラフィー分析には高品質の溶媒および試薬が必要です。

化学適合性

バッファー組成と移動相のpHはともに、カラムの部材および固定相の性質に合ったものを選ばなければなりません。これにより、カラムのハードウェアおよびベッドへのダメージを防ぐことができます。

バッファーの溶解度

バッファーは、完全に水溶性で沈殿が見られないのが理想的です。バッファーを有機溶媒と混合する場合は、高濃度における沈殿を避けるために注意してバッファー濃度を選ばなければなりません。そうしないと、ポンプに運転上の問題やHPLCカラムの目詰まりが生じる可能性があります。

バッファーの強度

固定相との相互作用の弱い溶離液は、弱く結合している分析対象物質のみをカラムから溶出することができますが、相互作用が強い場合は強く結合した分子を溶出させます。さまざまな溶媒の溶離強度または溶媒強度は、用いる固定相の種類に依存します。溶離強度以外に、バッファーの粘度やUV吸光度も、HPLC分析における使用に関する適合性の点から、重要な役割を果たします。

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さまざまなアプリケーションに対応するため、酸を3種類のポートフォリオとして提供しています。広範囲をカバーするポートフォリオの内容をご覧ください：分析化学用のSupelco®製品、研究から製造用までのSigma-Aldrich®製品、医薬品・バイオ医薬品製造用のSAFC®製品。

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ウェットケミカル分析では、液体サンプル中に存在する目的の元素をいくつかの測定手法で特定し、定量します。化学試薬によって分析対象物が色素を比例的に変換し、それを視覚的または光電的に読み取ることができます。

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分析用サンプルの調製では、さまざまな精製方法を使用できます。分析前に精製することでサンプルの複雑さを軽減し、干渉を取り除き、分析物を濃縮することができます。

QuEChERSサンプル調製法

QuEChERSは「迅速、簡単、安価、効果的、堅牢で安全な」サンプルクリーンアップ法で、食品・農産品の残留農薬分析におけるサンプル前処理に用います。QuEChERSでは固相抽出（SPE）法によりサンプル前処理を行います。

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