細胞単離キット

In vivo組織由来の細胞の研究は、細胞生物学および機能を最も良好に予測しますが、標的細胞集団を単離しない限り、生物学的複雑性により結果が交絡される可能性があります。細胞表現型を検討することを目的に、確定的な特性に基づいて細胞集団を単離するためのさまざまな手法が開発されています。細胞集団の単離は生物学的研究を支援するのみならず、臨床診断検査も円滑にします。最も効果的な単離法では、収量、純度、生存率が改善することが示されています。標的集団の濃縮または精製は正／負の選択を用いることで達成できます。標的集団を濃縮するために、正の選択では細胞特異的マーカーに結合する抗体を用いることが多く、負の選択では生物物理学的特性を用いて望ましくない細胞を枯渇させます。

細胞生物学研究では、細胞を細胞内成分に分画することが長い間基本となっていました。細胞内分画技術は広く用いられており、オルガネラや細胞内コンパートメントの構造や機能を検討したり、生体分子の位置、処理、輸送を理解したりすることができます。ほとんどの分画技術の目標は、オルガネラや細胞の巨大分子を、それら本来の生化学的性質が保持されている機能状態で得ることです。これは、穏やかな機械的手法や弱い界面活性剤を用いて細胞を溶解した後、しばしば分画遠心分離による細胞成分の分画を行うことにより達成されます。

表現型別の細胞単離

脂質生成プロセスを検討するため、また分化後に脂質溶解、細胞シグナル伝達、内分泌機能、代謝活性を評価するために、前脂肪細胞を用いることができます。

前脂肪細胞単離キットは、脂肪組織から間質血管細胞分画を単離するために必要なツールと試薬を組み合わせています。得られた間質血管分画を、前脂肪細胞が接着している組織培養プレート上で培養します。前脂肪細胞は、分化誘発成分で処理すると、増殖し脂肪細胞に分化する能力を維持します。

オルガネラおよび細胞内複合体の単離

細胞内成分の誘導はオルガネラ機能の理解を促進し、新たなバイオテクノロジーを導く可能性があります。例えば、哺乳類細胞から単離した核を用いて、内因性RNAの一次転写物を合成できますNuclei EZ Prep Kit（NUC101、NUC201）は、ほとんどの哺乳類細胞から核を迅速に分離するために開発されました。

ミトコンドリアの完全性および膜電位検出のため、ミトコンドリア染色キット（CS0390、CS0760）ではJC-1色素（420200、T4069）を使用しています。この色素はミトコンドリアの基質中で濃縮され、赤色の蛍光凝集体を生成します。ミトコンドリア膜電位を消失させるアポトーシスのようなイベントはミトコンドリア内のJC-1色素の蓄積を妨げるため、蛍光顕微鏡を用いて、生存しているミトコンドリアを障害されたミトコンドリアと識別することができます。

プロテアソームのようなオルガネラ以外の細胞内複合体も、タンパク質分解アッセイ用途に単離できます。この手法では、GSTアガロースに結合したユビキチン様ドメインを持つGST融合タンパク質を含む親和性マトリックスビーズを使用します。

細胞骨格濃縮

Triton X-100のような界面活性剤には細胞骨格成分が溶けないため、従来はアクチン細胞骨格に結合するタンパク質の処理は困難でした。Millipore ProteoExtract^® 細胞骨格濃縮および分離キットは、細胞から可溶性の細胞質タンパク質や核タンパク質を除去しながら、接着斑およびアクチン関連タンパク質を保持する細胞骨格精製バッファーを提供します。この方法では、全細胞ライセートを分析するウェスタンブロット法ではマスクされることが多い、低濃度のアクチン関連タンパク質を検出し、検討する能力が高まります。