A1978

Anti-β-Actin (ACTB) Antibody

mouse monoclonal, AC-15

• Sinonimo/i: Anti-β-actina monoclonale
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• Conjugate: unconjugated
• Clone: AC-15, monoclonal
• Application: ARR, ICC, IF, IHC (f), WB
• Citations: 4100

Proprietà

• Nome del prodotto: Anticorpo anti-β-actina monoclonale murino, clone AC-15, purified from hybridoma cell culture
• biological source: mouse
• Quality Segment: 300
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: AC-15, monoclonal
• form: buffered aqueous solution
• mol wt: antigen 42 kDa
• species reactivity: sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig
• should not react with: Dictyostelium discoideum
• technique(s): immunocytochemistry: 10-40 μg/mL using human foreskin fibroblasts, immunohistochemistry (frozen sections): suitable, indirect immunofluorescence: suitable, microarray: suitable, western blot: 0.5-1 μg/mL using cell extract of human foreskin fibroblasts or chicken fibroblasts.
• isotype: IgG1
• UniProt accession no.: P60709
• application(s): research pathology
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... ACTB(60) ; mouse ... Actb(11461) ; rat ... Actb(81822)

Descrizione

General description

Il gene ACTB (β-actina) è mappato nel cromosoma umano 7p22.1. La β-actina è la proteina più abbondante tra quelle presenti nel nel citoplasma. L′ACTB è espressa diffusamente. L′actina è una delle proteine eucariotiche più conservate ed è espressa nei mammiferi e negli uccelli. Quattro isoforme di actina sono marcatori di differenziazione dei tessuti muscolari, mentre le altre due sono presenti in quasi tutte le cellule. L′anticorpo anti-β-actina monoclonale murino (isotipo IgG1 murino) è derivato dall′ibridoma AC-15 prodotto dalla fusione di cellule di mieloma murino e splenociti di topi BALB/c immunizzati con un peptide N-terminale sintetico lievemente modificato della beta-actina citoplasmatica Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, coniugato con KLH.
Nella colorazione delle criosezioni di tessuti ultrasottili di ventrigli di pollo, l′anticorpo marca i corpi densi, i canali longitudinali che collegano i corpi densi consecutivi (che sono occupati anche dalla desmina) e la placca densa associata alla membrana. Non colora i muscoli cardiaci e scheletrici adulti, si può osservare una lieve colorazione dovuta a contaminazioni del campione con cellule non muscolari o nel caso venga utilizzato tessuto embrionale.

Nella colorazione delle criosezioni di tessuti ultrasottili di ventrigli di pollo, l′anticorpo marca i corpi densi, i canali longitudinali che collegano i corpi densi consecutivi che sono occupati anche dalla desmina, e la placca densa associata alla membrana. Non colora i muscoli cardiaci e scheletrici adulti, tranne che per alcune tracce che sono dovute alla contaminazione del campione con cellule non muscolari o che possono comparire se si utilizzano tessuti embrionali.

Immunogen

peptide N-terminale lievemente modificato della β-actina citoplasmatica, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, coniugato a KLH.

Application

Le actine presenti in cellule provenienti da varie specie e tessuti presentano proprietà immunologiche e fisiche molto simili. Di conseguenza, non è stato facile produrre antisieri potenti contro questa proteina. Pertanto, la disponibilità di anticorpi monoclonali contro la β-actina rappresenta uno strumento utile e specifico per lo studio della distribuzione intracellulare della -actina e degli aspetti statici e dinamici del citoscheletro.
L′anticorpo anti-beta-actina monoclonale può essere utilizzato per analisi di microarray, analisi con immunofluorescenza indiretta e analisi immunoistochimiche. È stato inoltre adoperato per analisi immunocitochimiche a 10-40 μg/mL con fibroblasti di prepuzio umano. L′anticorpo è stato utilizzato anche per analisi con metodica Western blot a 0,5-1 μg/mL con un estratto cellulare di fibroblasti di prepuzio umano o fibroblasti di pollo.
Può essere adoperato per colorare sezioni congelate fissate in acetone, preparati per microscopio elettronico ed esperimenti con microiniezioni. Come fissativi, si possono utilizzare anche B5, methacarn, etanolo o soluzione di Bouin. L′epitopo riconosciuto dall′anticorpo è resistente alla fissazione in formalina e all′inclusione in paraffina.
È stato adoperato nell′immunofissazione.

L′anti-actina murina monoclonale è stata utilizzata come controllo di caricamento per l′analisi con metodica Western blot di lisati di proteine epatiche di ratto.

L′anticorpo anti-actina murino monoclonale è stato utilizzato come controllo di caricamento per l′analisi con metodica Western blot di proteine immunoprecipitate da co-colture di gangli della radice dorsale di ratto.

L′anticorpo anti-beta-actina monoclonale può essere utilizzato per analisi di microarray, analisi con immunofluorescenza indiretta e analisi immunoistochimiche. È stato inoltre adoperato per analisi immunocitochimiche a 10-40 μg/mL con fibroblasti di prepuzio umano. L′anticorpo è stato utilizzato anche per analisi con metodica Western blot a 0,5-1 μg/mL con un estratto cellulare di fibroblasti di prepuzio umano o fibroblasti di pollo.
Può essere adoperato per colorare sezioni congelate fissate in acetone, preparati per microscopio elettronico ed esperimenti con microiniezioni. Si possono utilizzare come fissativi la soluzione B5 o le soluzioni di etanolo, di metacam o di Bouin. L′epitopo riconosciuto dall′anticorpo è resistente alla fissazione in formalina e all′inclusione in paraffina.

Biochem/physiol Actions

Le due principali proteine citoscheletriche coinvolte nella motilità cellulare sono l′actina e la miosina. L′actina e la miosina sono costituenti di molti tipi di cellule e sono implicate in una miriade di processi cellulari, tra cui la locomozione, la secrezione, la ciclosi, la fagocitosi e la citochinesi.
L′ACTB (β-actina) ha un ruolo cruciale nell′organogenesi, specialmente per quanto concerne lo sviluppo del cervello, dei reni e del cuore. È responsabile del mantenimento della proliferazione, della migrazione e della forma cellulare. La proteina dell′actina è essenziale per la formazione delle piastrine mature. β−L′actina è fondamentale per lo sviluppo embrionale. La sovraregolazione della β-actina stimola le protrusioni della membrana e favorisce la motilità cellulare. La proteina codificata β-actina media la migrazione dei fibroblasti nel topo, controllando così la tensione dei tessuti connettivi.
L′actina è una proteina citoscheletrica che regola la motilità, la secrezione, la fagocitosi e la citochinesi cellulare. La regione NH2-terminale dell′actina può funzionare da antigene. Questo terminale può anche modulare le interazioni dell′actina e può associarsi a proteine quali la miosina.

L′anticorpo anti-β-actina monoclonale murino 1, 2 riconosce un epitopo situato sull′estremità N-terminale dell′isoforma β dell′actina.

Physical form

Soluzione in 0,01 M di tampone fosfato salino, pH 7,4, contenente 15 mM di azoturo di sodio.

Preparation Note

Conservazione e stabilità: Per l′uso continuo, conservare a 2-8 °C al massimo per un mese. Se si desidera prolungare la conservazione, la soluzione può essere congelata in aliquote di lavoro a -20 °C. Si raccomanda di evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento e la conservazione in freezer “frost free”. Se la soluzione risulta lievemente torbida dopo un lungo periodo di conservazione, centrifugarla per chiarificarla prima dell′uso. I campioni delle diluizioni di lavoro vanno eliminati se non vengono utilizzati entro 12 ore.

Other Notes

Vincitore del CiteAb Award 2024 per i fornitori che hanno conseguito risultati nella ricerca sul Parkinson

Per visionare una guida alla selezione degli anticorpi anti-actina, visitare www.sigmaaldrich.com/actin.

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• Classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
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