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Merck
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文件

LIBDL-RO

Roche

Liberase DL 研究级

low Dispase concentration

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352200

形狀

lyophilized

包裝

pkg of 100 mg (05466202001 [2 x 50 mg])
pkg of 10 mg (05401160001 [2 x 5 mg])

製造商/商標名

Roche

參數

35-37 °C optimum reaction temp.

最適pH

7.4

運輸包裝

dry ice

儲存溫度

−20°C

一般說明

Liberase DH研究级组织分离酶混合物包含高度纯化的胶原酶I和胶原酶II。这两种胶原酶异构体以精确比例混合,并与高浓度的Dispase®分散酶(一种非梭菌中性蛋白酶)混合。Liberase DL(低分散酶)研究级组织分离酶混合物可用于广泛类型的组织解离,更高纯度的酶混合物带来更高的细胞产率和活力,内毒素等细菌副产物可减少数千倍。

應用

Liberase ®DL(低分散酶)研究级已用于小鼠皮肤干细胞的分离。它还用于广泛的组织类型的分离,更高纯度的酶混合物带来更高的细胞产率和活力,内毒素等细菌副产物可减少数千倍。

特點和優勢

  • 酶混合物具有较低的梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性以及较低的内毒素含量,可最大限度地提高分离细胞的活力和产量。
  • 由于较高的胶原酶 I + II 纯度(通过 HPLC 分析测定),酶混合物的比活性较高。
  • 批间一致性较高,因此实验重现性也较高。

準備報告

稳定剂:
工作浓度:Liberase 研究级酶工作浓度

Liberase 酶比活力明显高于传统的胶原酶。这意味着 Liberase 研究级纯化酶的工作浓度,以 mg/ml 表示,将低于传统胶原酶。

当申请出现在www.collagenase.com网站的罗氏申请列表中时,使用该申请推荐的 Liberase 研究级浓度。

当申请未包含在此列表中时,首先使用的是Liberase TM 研究级浓度 0.08–0.28 Wünsch units/ml。

目标是确定 Liberase 研究级酶混合物的最佳起始浓度。 这是一个起点,由于申请的差异和传统胶原酶的批间差异,最终浓度可能会不同。

胶原酶工作浓度

将先前的胶原酶工作浓度 (mg/ml) 乘以其比活度(Wünsch units/mg,[如上所述]),得到 Wünsch units/ml。为了确定使用多少 Liberase 研究级酶混合物,首先将胶原酶工作浓度(Wünsch units/ml)乘以工作酶溶液的总体积,以获得所需的总胶原酶活性(Wünsch units)。除以 Liberase 研究级贮备液浓度所需的总胶原酶活性(“复溶和储存”),得出在工作酶溶液中使用 Liberase 研究级酶混合物贮备液的毫升数。
储存条件(工作溶液):将未使用的储备液以一次性等分试样储存于-15 至-25°C 条件下。有关产品稳定性的更多信息,请访问 Roche Liberase Enzyme 网站(www.collagenase.com.)。

注意:避免反复冻融!

重構

用注射用无菌水或组织解离缓冲液复溶冻干酶。不得向解离缓冲液中加入血清或其他可能影响酶活性的成分,如白蛋白或蛋白酶抑制剂。在较高浓度和较高温度(4°C)下,酶稳定性降低。同时避免以上两种情况。

复溶整个小瓶。不得称量冻干品的单个等分试样。将水分引入小瓶会导致酶活性下降。

将小瓶置于冰上,使冻干酶再水合。

在 2-8°C 条件下轻轻搅拌小瓶,直至酶完全溶解(最多 30 min)。

根据用于溶解 Liberase 研究级纯化酶混合物的组织解离缓冲液的类型,可以观察到轻微的沉淀物容易溶解在稀释的工作溶液中并且对酶活性没有影响。

取出一份贮备液,制备工作溶液。

复溶体积

2 ml(1 瓶装量为 5 mg–10 mg)
10 ml(1 瓶装量为 50 mg–100 mg)

胶原酶注射用水(单位/ml)

13(1 瓶装量为 5 mg–10 mg)
26

(1 瓶装量为 50 mg–100 mg)胶原酶总浓度 [mg/ml]

2.5(1 瓶装量为 5 mg–10 mg)
5.0(1 瓶装量为 50 mg–100 mg)

其他說明

仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。

法律資訊

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
Liberase is a trademark of Roche
Roche is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

象形圖

Exclamation markHealth hazard

訊號詞

Danger

危險分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

標靶器官

Respiratory system

儲存類別代碼

11 - Combustible Solids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°C)

does not flash


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Maria Fernanda Forni et al.
PloS one, 10(10), e0140143-e0140143 (2015-10-16)
The skin is a rich source of readily accessible stem cells. The level of plasticity afforded by these cells is becoming increasingly important as the potential of stem cells in Cell Therapy and Regenerative Medicine continues to be explored. Several

條款

Your current tissue dissociation protocol, and the extent to which you have been successful with traditional collagenase are good guides for selecting the appropriate Liberase Enzyme Blend.

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