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首頁產品蛋白質生物學蛋白質電泳和 Western 印跡免疫檢測試劑與底物

免疫檢測試劑與底物

Immobilon® Forte、Crescendo 和 Classico 化學發光 Western 印迹底物

在 Western 印迹中，決定實驗成功與否的最重要因素是所用試劑的品質。我們提供一系列預先優化的 Western 印跡試劑，這些試劑可發揮協同作用，提供強大的特異性信號和低背景，幫助您快速產生出版品質的結果。

部分概述

阻斷未結合的膜位點可防止抗體的非特異性結合而導致高背景。傳統的牛奶、明膠和其他蛋白質基礎的阻斷劑對許多印圖應用都很有效，但會掩蓋信號或干擾特定蛋白質靶點的檢測，從而降低靈敏度或檢測率。 Immobilon® Block Noise Cancelling Reagents include protein-free, ready-to-use buffers designed optimized to reduce background levels when using chemiluminescence, fluorescent, or phosphoprotein detection.

Immobilon® 阻斷噪音消除試劑 包括不含蛋白質、即開即用的緩衝液，經過優化，可在使用化學發光、螢光或磷蛋白檢測時降低背景水平。

Western Blot 阻斷試劑選擇指南

Streptavidin and Secondary Antibody Conjugates

現代的免疫檢測方法是利用鏈霉親和素或二抗與酵素（如辣根過氧化酶 (HRP) 或鹼性磷酸酶 (AP)）共價結合的酵素連結檢測。結合的酵素會催化特定底物的降解，進而產生信號。我們提供多種鏈霉親和素、蛋白 A、蛋白 G 和二抗結合物，可用於 Western 印跡技術。 我們也提供廣泛的 HRP 和 AP 底物選擇，可用於 Western 印跡技術中的化學發光、顯色和 化學螢光檢測。

CHEMILUMINESCENT SUBSTRATES FOR WESTERN BLOTTING

Immobilon®

  • Immobilon®Classico、Crescendo 和 Forte 化学发光底物
  • Immobilon® Classico: ~ 6 pg of target protein
  • Immobilon® Crescendo： ~ 1-3 pg target protein
  • Immobilon® Forte： ~400 fg 目標蛋白
     
  • Immobilon®Western HRP、Immobilon® ECL Ultra 和 Immobilon® UltraPlus Western 底物在標準的雙組分格式中提供卓越的靈敏度和長信號壽命。這些配方允許使用更稀的一抗溶液進行免疫印圖檢測。檢測極限：
    • Immobilon® Western HRP 底物：~ 400 fg 目標蛋白
    • Immobilon® ECL Ultra 底物：低 femtogram 範圍
    • Immobilon® ECL UltraPlus Western Blot HRP 底物：低femtogram範圍

    • Immobilon®化學發光HRP底物的相對靈敏度

    二倍稀釋顯示用於 Western 印跡的 Immobilon® 化學發光底物的相對靈敏度，包括：Classico（較低靈敏度）、Crescendo、Forte、Ultra 和 UltraPlus（最高靈敏度）：Classico (較低靈敏度)、Crescendo、Forte、Ultra 及 UltraPlus (最高靈敏度)。

    圖 1. 以 4 μg 蛋白為起點，將 A431 細胞裂解液 [12-110] 稀釋 2 倍，在 10%mPAGE®凝膠 [MP10W15]、MOPS 緩衝液 [MPM0PS]、200V 下運行 25 分鐘。蛋白質在含 10%乙醇的 mPAGE® 轉移緩衝液 [MPTRB] 中轉移至 Immobilon®-P 膜 [IPVH00010] 1 小時。用兔抗 HH3 [H0164] 和山羊抗兔[AP132P] 抗体以列出的稀释度免疫检测 HH3 蛋白 (15kDa)。在Bio-Rad® ChemiDoc系統上，用指定的ECL試劑孵育膠片5分鐘，曝光30秒後拍攝圖像。

    Cytiva™ Amersham™ ECL檢測試劑使用基於增強型luminol的 HRP 檢測，有不同的配方 可供選擇 以滿足 不同的 Western印跡應用需求。

    • Cytiva Amersham™ ECL Western 印迹检测试剂推荐用于确证性 Western 印迹应用。
    • Cytiva Amersham™ ECL Prime Western 印迹检测试剂可在同一张印迹上检测高丰度和低丰度蛋白。
    • Cytiva Amersham™ ECL Select Western 印迹检测试剂即使使用稀释的一抗和二抗也具有高灵敏度。
    • Cytiva Amersham™ ECL Start Western 印迹检测试剂是为中高表达蛋白的化学发光检测而开发的。

    CHROMOGENIC SUBSTRATES FOR WESTERN BLOTTING

    色原檢測利用過氧化酶（如：HRP）或鹼性磷酸酶（AP）結合的酶催化反應，導致不溶性有色沉澱物沉積，以進行檢測、HRP) or alkaline phosphatase (AP) conjugated enzyme to catalyze a reaction that results in the deposition of an insoluble colored precipitate for detection. Our chromogenic substrates for Western blotting are available in solution, powder, and tablet form to provide flexible options for storage and usage.

    • SIGMAFAST™ DAB 片劑（顯色 HRP 底物由比色沉澱底物組成，與辣根過氧化酶反應後產生棕色，可溶解於水中製備即用型緩衝溶液，用於印迹檢測。
    • BCIP/NBT (藍色/紫色) 和 BCIP/TNBT (藍色/棕色) 單一試劑（顯色 AP 底物）是鹼性磷酸酶的高靈敏度比色底物。
    • TMB增強型單組分HRP膜底物（顯色型HRP底物）是產生深藍色產品的單組分比色底物。

    信號增強劑

    • Immobilon®? 信號增強劑 設計用於觀察到低信號強度時的 Western 印跡應用。增強抗體-抗原反應可使信號強度增加 2 到 10 倍。Immobilon® Signal Enhancer 可與 PVDF 和硝酸纖維膜相容，並可用於顯色、化學發光和螢光檢測方法。
    • SignalBoost™免疫反應增強劑套件 專為增強硝酸纖維膜或PVDF膜上的化學發光或比色目標信號而設計

    用於剝離與再探針的試劑與試劑盒

    剝離與再探針試劑是專門配制的，可快速有效地去除 Western 印跡上的抗體，而不會對固定蛋白產生顯著影響。

    • ReBlot™Plus試劑可有效去除探針印跡上結合的抗體。ReBlot™ Plus 試劑提供溫和及強效配方。

    相關產品資源

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    轉移膜與套件
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    相關應用程式
    Western Blotting
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