細胞培養疑難排解

細胞培養已經成為生物系統建模的最基本技術之一，在生物科技和製藥領域的重要性與日俱增，同時也是生命科學研究實驗室的必要程序。雖然這項技術非常容易取得，但成功繁殖細胞以擴大種群或進行建模實驗時，可能會受到污染或其他對細胞活力有負面影響的條件所困擾。共用細胞的常見做法已導致細胞庫存交叉污染的證據廣為發表，而這些細胞庫存的身份之前是無庸置疑的。識別細胞無法茁壯成長的常見和非常見原因，可以提高實驗室效率、增加細胞產品的產量，並確保從體外模型獲得有意義、可靠的下游數據。

細胞株鑑別錯誤

最近的研究估計，鑑別錯誤可能影響到三分之一的使用中細胞株。這些發現有可能使已發表的、基於細胞系模型結果的生物系研究結果受到質疑。導致細胞株誤鑑/交叉感染的因素包括：

• 侵襲性細胞株的污染：同工酶分析顯示許多細胞株與 HeLa 細胞共用一種罕見的酶同工酶。自此之後，HeLa 已經被證明是培養液中最常見的侵襲性細胞株。
• 記錄和標籤實務：細胞培養瓶、平板、低溫瓶和冷凍容器必須清楚標示，並嚴格保存液氮儲存圖，以反映細胞株的添加、撤回和移動：鄰近實驗室之間共用細胞是一種常見的做法，會導致細胞株身份的錯誤。細胞株只應從聲譽良好的細胞庫取得，例如 ECACC（英格蘭公共衛生部的歐洲認證細胞培養物收集中心）。

瞭解細胞株交叉感染的常見原因，以及如何保護您的工作不受其影響。

細胞培養物的微生物污染

細胞培養介質和培養條件為細胞以及細菌、真菌和病毒污染物提供了理想的環境。為了加強對無菌培養技術的堅持，培養物必須定期進行顯微鏡檢查，以找出細菌和真菌入侵的證據。有些無處不在的微生物污染物可躲過肉眼檢測，估計有高達 30% 的培養物受到支原體污染。專門用於檢測隱形支原體的試劑和試劑盒通常以 PCR 擴增技術為基礎，而 PCR 擴增技術也可用於檢測病毒污染物。

Learn how to keep your cultures free of biological and chemical contaminants.

細胞生長不佳

在培養過程中，如果細胞看起來很健康，但卻無法達到融合度，這實在令人沮喪。在排除污染物的情況下，一些可能妨礙健康細胞倍增的因素包括：

• 培養/冷凍培養基的條件和質量
• 補充劑的質量和應用-適用性
• 冷凍或通過過程中細胞計數不準確

當細胞看似有活力但無法擴大時， Learn what you can do to improve culture conditions for optimal growth before heading back to the liquid nitrogen.

學習如何改善培養條件以獲得最佳生長。

黏附細胞表型的脫落

黏附細胞在培養過程中可能會單獨或成片自發脫落。當黏附性培養物不能保持這種狀態時，知道要檢查什麼以及如何恢復培養物的黏附性.

細胞結塊

懸浮液中的細胞模擬活體條件下的單細胞。當細胞開始結塊時，這可能是由於黏稠的核酸，當培養物受壓時存在於培養基。到底是什麼隱藏在培養基中，導致細胞結塊？ 在此閱讀更多有關如何從培養物中消除結塊的資訊。

培養過程中的細胞死亡

當細胞在培養過程中死亡時，首先必須排除微生物的污染。其他可能導致細胞健康不良或行為與表型不符的因素包括

• 冷凍庫存條件
• 細胞通過數量/過度融合
• 環境壓力
• 解離酶過度消化

培養基中的微粒

如果不是污染，培養基中的微粒通常有無機的解釋。了解平衡緩衝液和培養基成分，並 學習更多關於保持培養基成分懸浮的知識.