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Merck

樣品純化

圖表說明親和層析分離的關鍵階段,包括結合、洗滌和洗出步驟。

在分析之前,可以使用各種化學和物理純化方法來分離或濃縮目標分析物質。其中包括吸收、吸附、層析、蒸餾、 過濾、複合物形成、結晶、乾燥等等。分析前的樣品製備有助於將樣品製成與分析技術相容的格式、降低樣品的複雜性、去除干擾雜質,並在分析前濃縮分析物質。適當的樣品製備可防止堵塞,減少對嚴格清洗程序的需求,並可延長色譜介質的壽命。


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透析

透析是一種純化技術,用於去除樣品中的鹽分或其他低分子量分子。它也可用於交換樣品的緩衝成分。透析是一種被動技術,需要大量的緩衝液。

緩衝液交換& 除鹽

除鹽是一種簡單的方法,用於去除樣品中的鹽分和其他低分子量污染物。

分離沉澱

分離沉澱可用於去除小樣本中的雜質。沉澱技術利用溶解度差異的原理分離餾分。

萃取

萃取法樣品製備涉及從複雜樣品或更大樣品容量中分離目標分析物。此過程會去除可能阻塞 HPLC 和 GC 柱的干擾樣品成分。它還能將分析物濃度提高 100 到 5,000 倍,從而顯著提高檢測靈敏度。作為選擇性和特定樣品製備的一部分,萃取有助於確保更可靠的色譜分析。萃取的類型有液液萃取、solid phase microextraction (SPME).

親和層析

親和層析是根據蛋白質與已耦合至層析基質的特定配體之間的可逆性互動來分離蛋白質。

親和層析技術包括捕獲和洗脫兩個步驟。在捕獲階段,目標蛋白會與固定在層析基質上的互補配體進行特異性和可逆性結合。在清洗基質以去除未結合物質後,將結合的目標蛋白質轉換為有利於洗脫的條件,以回收目標蛋白質。使用競爭性配體進行特定洗脫,或透過改變 pH 值、離子強度或極性進行非特定洗脫。洗脱可使目标蛋白质以纯化和浓缩的形式收集。




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