一抗
圖 1.使用一抗、抗-beta-肌動蛋白抗體進行免疫細胞化學染色的範例。
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多克隆抗體
多克隆抗體是通過向動物注射感興趣的抗原而產生的。幾周之後,動物的血清被收集起來,可以直接使用或進一步純化以分離抗體。多克隆抗體通常能辨識多個表位,因此對抗原性質的微小變化有較強的耐受性。
單克隆抗體
單克隆抗體是一種實驗室製造的同種群抗體,由B細胞與永生細胞培養物融合產生雜交瘤,可產生多份完全相同的抗體。它們能識別高度特異和獨特的表位,具有很強的親和力,並降低交叉反應的可能性。
重組抗體
重組抗體是將抗體基因克隆到表達載體中而產生的單克隆抗體,不需要使用雜交瘤。這些抗體可以使用適當的寡核苷酸引物從任何物種克隆。這項技術有助於避免與傳統雜交瘤生產相關的細胞系漂移和突變等問題。
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Advantages and Disadvantages of Different Types of Primary Antibodies
結合一抗通常用於信號放大和檢測,而無需使用第二抗體。一級單株抗體或多株抗體可直接與螢光體、酵素或生物素結合。不同的抗體結合物有不同的穩定性,需要特定的緩衝液和儲存條件才能長時間維持最大活性。
一抗研究領域
.癌症研究的一抗
檢測異常蛋白質和腫瘤相關抗原的一抗是癌症研究的重要工具。一些一抗被用來阻斷致癌通路、刺激抗體依賴性細胞毒性(ADCC)和激活補體依賴性細胞毒性。這些抗體對於研究腫瘤標誌物、腫瘤抑制因子、侵襲、轉移、自噬、凋亡和血管生成至關重要,為癌症生物學和治療的各個方面提供洞察力。
在我們的利用重組抗體研究癌症的標誌頁。
神經科學研究中的一抗
一抗在研究神經系統生理學和病理學中扮演著重要的角色,它允許研究人員識別和分析特定的蛋白質和細胞標記。此外,這些抗體有助於探索神經發炎,這是各種神經系統疾病的關鍵因素。
表觀遺傳研究的主要抗體
主要抗體也有助於探索表觀遺傳過程,這些過程使基因開啟和關閉。 DNA甲基化和組蛋白的轉譯後修飾是主要的表觀遺傳因子。
一抗是用於研究蛋白質及其相互作用的各種實驗室技術中的基本工具。它們能在不同的實驗技術中對特定蛋白質進行精確的檢測、定量和分析,例如:
- ELISA: A plate-based assay technique designed for detecting and quantifying soluble substances.它結合了抗體的特異性與簡單酵素分析的靈敏度。
- Western Blotting:
- 免疫細胞化學: 使用特異性辨識感興趣靶點的抗體來顯現細胞中的蛋白質或其他抗原。
- 免疫組織化學: 選擇性地識別組織切片細胞中的抗原(蛋白質)。
- 免疫沉淀: 使用特異性結合蛋白質的抗體,從溶液中沉澱蛋白質抗原。此技術可從含有數千種不同蛋白質的樣本中分離並濃縮出蛋白質。
- Flow Cytometry: 偵測與量測一群細胞的物理與化學特性。光散射模式可用於判斷細胞的大小和細胞內的複雜性。
- 親和性結合分析: 測量單一抗原和抗體之間結合互動的強度。較低的數字表示較高的結合親和力。
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