媒體準備
細胞培養基的製備對哺乳動物細胞的生長和實驗結果有重大影響。同樣地,也有特定的培養基來支援微生物的體外培養。培養基提供細胞生長所需的能量來源,以及調節細胞過程的化合物。原核和真核培養物都可能有特定的生長需求。培養基的選擇取決於培養類型、培養目的和細胞密度要求。
特色類別
Media Preparation
商業培養基以脫水或粉末、濃縮液或工作溶液的形式提供。肉湯培養的脫水培養基需要在消毒前溶解在蒸餾水中並調整最終 pH 值。用於瓊脂培養物的粉末培養基必須溶解於蒸餾水中,攪拌後煮沸或高壓消毒,再以無菌技術倒入無菌培養皿中。以液體濃縮物提供的培養基必須以蒸餾水無菌稀釋、調整 pH 值,並分裝到無菌容器中儲存。
培養基滅菌
以粉末製備的培養基在使用前必須經過過濾、加熱或高壓滅菌。儘管液體培養基通常是無菌且以即用濃度提供,但仍建議進行無菌過濾,尤其是當使用前要加入血清或其他補充劑時。
培養基補充劑
細胞培養或調控所需的某些補充劑不穩定或可受熱滅菌;因此,使用者必須在使用前將其加入經熱滅菌的基礎培養基中。通常來自牛的血清(FBS)是動物細胞培養基中常用的補充劑。某些細胞類型的生長可能需要荷爾蒙、生長因子和特定訊號分子。IPTG等添加劑用於誘導蛋白質表達。抗生素也可能被添加到培養基中,以控制細菌和真菌污染物的生長,不過只要適當處理和儲存培養基,就能很好地控制污染物。
培養基的儲存與使用
液體形式、澆鑄瓊脂形式或工作溶液形式的商用和製備的培養基通常儲存於 4 °C 的暗處,以抑制機會性微生物的生長,並防止光線引起的培養基成分降解。在接種培養物前,培養基應加熱至細胞生長所需的適當溫度。
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