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Merck

病毒載體下游處理

病毒載體純化製程歷來都是以單克隆抗體所用的系統為基礎,而這些系統的設計並不能提供必要的回收率。

專為基因治療病毒載體下游處理而設計的新技術的引進提供了提高產量和吞吐量的機會。其中可以用來優化病毒載體下游處理的方法包括

  • 超濾/重過濾操作,特別是使用切向流過濾(TFF)進行細胞或病毒採集和純化、下游蛋白質濃縮和重過濾,以及最終制劑
  • 加強色譜製程,可透過高產能、一次性使用的色譜膜吸附器等技術,減少單位操作的數量和規模

這些下游技術有可能將病毒載體的純化時間從數小時縮短至數分鐘,同時提高回收率。此外,這些技術還能促進規模擴大、減少製程佔用空間,並提高設施利用效率。


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Primary Clarification

對含有病毒載體的粗培養基進行深度過濾或同時進行離心和深度過濾,以去除大的細胞碎片和其他污染物。

二次澄淨

一次澄淨後的澄清培養基再經過其他步驟進一步澄淨。

超濾/重濾

超濾和重濾分別用於濃縮和緩衝液交換。利用尺寸過濾將病毒載體與雜質分離。重過濾可去除鹽分和其他分子,並以所選的緩衝液取代。

層析

至少使用兩種層析方法來純化病毒載體,包括離子交換法、親和法和尺寸排阻法。

病毒過濾

將純化後的病毒載體進行 15 奈米孔隙的奈米過濾,以去除偶發病毒、內毒素和任何其他殘留的雜質和聚集物。

無菌過濾

無菌過濾或減少生物負荷,可在製程中多次使用。飼料流通過 0.4 或 0.2 微米的消毒級過濾器,以去除在處理過程中引入的細菌和其他微生物。

最終填充

將純化和無菌的病毒載體填充到最終的預定容器中。這裡需要仔細考慮配方、包裝材料、儲存條件,以確保穩定性和完整性。


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