成像分析與活細胞成像
活細胞成像與分析可讓科學家即時研究動態細胞事件,從而獲得對生物學的獨特見解。這些技術與 PCR、流式細胞計學、免疫細胞化學和組織抗體染色形成對比,前者是以快照的方式分析細胞事件。今天,攝影機、活細胞螢光染料、螢光蛋白、視訊壓縮和延時顯微鏡的改進,提升了我們的能力,讓我們能以非凡的細節和保真度來觀察和分析活細胞、細胞間互動和亞細胞過程。
特色類別
活細胞成像系統
有多種技術可用來觀察細胞的複雜結構和行為。在靜態分析中,細胞會被固定並染色,這需要殺死細胞,因此只能捕捉細胞時間中的單一瞬間。雖然靜態技術適用於某些應用,但無法深入了解細胞活動。動態、活細胞方法可讓活細胞的結構、行為或組成可視化,而無需傳統染色。
活細胞成像系統使用先進的光學、環境控制和試劑,可以對哺乳動物、細菌和酵母細胞進行長期研究。同時採用微流控技術的培養和成像系統可精確控制培養的微環境,如流量、氣體混合物和溫度,同時限制細胞所受的物理壓力。活細胞成像和分析適用於各種應用,包括缺氧、細胞遷移、3D 細胞培養、細胞骨架動態和蛋白質運輸。先進的系統可自動處理培養條件、給藥和撤藥,以及成像間隔,以建立可呈現為靜態影像或視訊資料的影像。
活細胞成像試劑
活細胞成像培養基和補充劑專為保護細胞而設計,使其在延時實驗中不受光線引起的細胞損傷。這些試劑的配方也具有低自發光和光漂白的特性,可大幅提升螢光活細胞影像的品質。
有多種活細胞染色染料可用來研究活細胞的動態過程。活細胞螢光細胞器染料允許對特定細胞器進行選擇性染色,例如細胞膜、核、細胞質、線粒體、溶酶體、內質網 (ER)、高爾基體和細胞骨架蛋白,而且不會增加細胞毒性。
使用 GFP 和 RFP 的生物傳感器可透過螢光顯微鏡或延時視訊擷取偵測特定蛋白質以及該蛋白質在活細胞內的亞細胞位置。慢病毒載體系統是將基因和基因產品導入細胞的常用工具,與化學轉染相比有許多優點。除了細胞器檢測之外,細胞滲透性活細胞染料還可應用於細胞凋亡檢測、細胞存活率、細胞健康、缺氧、活性氧研究、鈣指示劑成像、神經或幹細胞實驗等。
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