免疫組織化學診斷程序
診斷性免疫組織化學(IHC)是一種不同技術的集合,用於識別組織異常、確定預後和指出治療方案。診斷 IHC 的基本原理是抗原-抗體結合反應,使用帶有酵素或螢光染料標記的抗體來觀察特定抗原在組織或組織切片中的定位和分佈。儘管組織學染色是一個多世紀以來的主要分析工具,但診斷免疫組織化學 (IHC) 和分子分析的幾項改進已經為現代臨床病理學領域帶來了革命性的改變。
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診斷 IHC 與臨床病理
IHC 可作為一般病理實驗室的常規服務,提供方便的分析與診斷工具。雖然大部分的臨床診斷仍以標準組織染色為主,如蘇木精及伊紅 (H&E),但 IHC 有許多方法可協助病理學家檢測有問題的病例。診斷性免疫染色常用於鑑定細胞早期細微的形態或發育變化,如增殖或凋亡。臨床用抗體可藉由結合特定的標記蛋白來識別個別的細胞系。這種抗體特異性也可能導致假陽性/假陰性結果,因為免疫染色對組織處理、保存及試劑品質很敏感。臨床病理學實驗室在使用經臨床驗證的診斷抗體、染色劑和試劑時,必須依照既定的方案和訓練計畫進行,以減少檢測錯誤。特別是針對關鍵細胞標誌物的高度特異性單株抗體的開發,已導致診斷 IHC 面板在研究和臨床鑑定疾病狀態及手術病理指導中的使用。
診斷性 IHC 與癌症
大多數癌症可透過在活檢組織中定位特定抗原,結合組織學染色與診斷性免疫組織化學進行鑑定。使用福爾馬林固定組織的標準 H&E 染色來判斷確切的腫瘤類型可能具有挑戰性,尤其是對於轉移性和/或分化不良的腫瘤。IHC 提供了一種相對快速且簡單的方法,可以更好地判斷腫瘤組織的來源,並研究特定腫瘤的行為或進展。原發部位不明的癌症 (CUP) 是一種觀察到癌症轉移但原發部位不明的情況。據估計,在所有癌症中,有 3-5% 的病例屬於 CUP。對於嚴重型 CUP 及其他不典型的病例,當形態與臨床資料不一致時,IHC 對於縮小診斷選擇的範圍非常重要。在某些情況下,IHC 對於癌症表型和原發腫瘤部位的初步診斷提供了重要的啟示。在 IHC 中,免疫染色被證明是檢測許多類型癌症的便利診斷工具,包括 adenocarcinomas (colon, breast, prostate) and 皮膚。 它常用於結腸癌 (HNPCC/Lynch Syndrome) 診斷,以補充經典的檢測方法,如微小衛星不穩定性 (MSI),其特徵為一種重複 DNA 的大量變異。在皮膚癌病理學中,在標準的 H&E 染色切片中辨識表皮內黑色素細胞是不可靠的,尤其是在曬傷的皮膚上。即使仔細觀察,也無法清楚區分色素角質細胞與黑色素細胞,或清楚劃分黑色素細胞的密度。因此,許多病理學家建議使用 IHC 來區別原位黑色素瘤與其仿製品。
Diagnostic IHC and Infectious Agents
診斷免疫組織化學目前可提供患者組織樣本中感染的快速形態分辨,有助於患者照護中的快速診斷決策。異硫氰酸螢光素 (FITC) 標示的抗體已被用來檢測感染組織中的肺炎球菌抗原。在傳染性疾病的檢測中,IHC 對於識別微生物是非常有用的:
- 常規或特殊染色法難以檢測到的微生物
- 染色效果差的微生物
- 存在數量少的微生物
- 不可培養的微生物
某些診斷 IHC 方法應用於乙型肝炎、丙型肝炎、巨細胞病毒感染的病例中,使用針對微生物 DNA 或 RNA 提出的特異性抗體來確認組織中的傳染因子。此外,IHC 還可用於檢測多種皮膚感染,以識別難以單獨使用常規顯微鏡染色確切檢測到的特定病毒和細菌感染。免疫螢光檢測 (IFA) 已廣泛用於人類和獸醫檢測未固定組織中的病原體(病毒、細菌或原生動物)。
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