細胞解離試劑
為了複製其原生環境,粘附的細胞表型(如上皮細胞)通常會被播種到經過組織培養處理的表面上,它們會附著在這些表面上以存活和增殖。 為了繁殖、計數和下游分析,粘附的細胞和來自固體組織的細胞必須被解離以形成懸浮液。
解離試劑可包括天然酵素或更溫和的非酵素替代品。這些試劑通過螯合鈣來阻止膠原蛋白附著在表面或彼此之間,在培養過程中將細胞從這些表面釋放。 用於細胞培養工作流程中的細胞解離試劑可能對細胞外基質 (ECM) 底物具有特異性。
我們全面的細胞解離試劑系列包括:
Trypsin, Recombinant Trypsin, StableCell™ Trypsin
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,也是最常用的脫離酵素之一。/language-masters/zh_tw/technical-documents/protocol/cell-culture-and-cell-culture-analysis/mammalian-cell-culture/cell-dissociation-with-trypsin">黏附細胞株和組織離解最常用的離解酵素之一。粗製的胰蛋白酶製劑通常在這兩種應用上都比較有效率,但以高濃度或太長時間的胰蛋白酶培養細胞,有可能會破壞細胞膜並殺死細胞。最常見的做法是用胰蛋白酶結合 EDTA(乙二胺四乙酸)處理將培養細胞從培養基質中移除,其中胰蛋白酶的濃度可從 0.025% 到 0.5%。
StableCell™胰蛋白酶溶液的開發是為了能像標準胰蛋白酶溶液一樣進行細胞脫離, 而無需將胰蛋白酶分離、冷凍和解凍。這可節省大量時間,因為在進行細胞傳代或實驗時,不需要等胰蛋白酶解凍,並可騰出寶貴的實驗室冷凍室空間。我們的 StableCell™ 胰島素溶液建議儲存於 2-8 °C,但我們的研究顯示,即使儲存於 37 °C,StableCell™ 胰島素仍可保持 90% 的活性與效能。
膠原蛋白酶和 Dispase
Collagenase 可裂解原生三螺旋膠原蛋白中的肽鍵。由於膠原蛋白酶具有水解原生膠原蛋白的獨特能力,因此被廣泛用於從動物組織中分離細胞。膠原蛋白酶存在於各種微生物和許多不同的動物細胞中。最有效的是厭氧細菌 Clostridium histolyticum 所分泌的「粗製」膠原蛋白酶。
Dispases是快速、有效、溫和且中性的蛋白酶,可將培養物中完整的上皮層與基底分離。Dispase I 已用於消化肺組織、處理流式染色的細胞,以及小鼠 CD4 T 細胞的分離。
用於特殊培養的解離試劑
用於解離或分離可能需要較溫和酵素活性的細胞和組織類型,Accumax™ 溶液使用較低濃度的高效酵素。這些溶液:
- 有效分離胚胎和神經幹細胞
- 溫和分離以保持細胞活力& 可提高細胞產量
- 不需要中和<
單細胞分析
單細胞分析在處理組織樣本時,需要有活力的單細胞作為輸入。透過這些分析,研究人員可以研究幹細胞、免疫學和癌症研究中細胞培養群的變化。探索我們高品質的解離試劑,這些試劑對於優化方案、創造最佳實踐,以及確保可靠的單細胞分析資料,都是不可或缺的。
相關產品資源
- Brochure: Enzymes for Cell Dissociation and Lysis
- 胰蛋白酶細胞解離程序
胰蛋白酶常用於將黏附的細胞從表面解離。我們提供多種胰蛋白酶溶液,以滿足您特定的細胞株需求。
- 組織解離指南:膠原蛋白酶、Dispase 和 Liberase 酶類型
膠原蛋白酶指南.膠原蛋白酶是一種能分解將動物組織固定在一起的原生膠原蛋白的酵素,由多種微生物和許多不同的動物細胞製造。
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