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ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys9) purificato- anticorpo per ChIP convalidato e set di primer

from rabbit, purified by using Protein A

• Sinonimo/i: H3K9Ac, Histone H3 (acetyl K9)
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: human, mouse
• Application: ChIP, ICC, IP, WB
• Citations: 49

Proprietà

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• clone: polyclonal
• purified by: using Protein A
• species reactivity: human, mouse
• species reactivity (predicted by homology): mammals
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: Q66I33
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... H3F3B(3021)

Descrizione

General description

17 kDa

Tutti gli anticorpi ChIPAb+ vengono singolarmente convalidati per confermare la precipitazione della cromatina, ogni lotto, sempre. Il set di anticorpi ChIPAb+ include primer di controllo (ogni lotto testato mediante qPCR) per convalidare biologicamente i tuoi risultati di IP in un contesto locus-specifico. Per permettere ai ricercatori di convalidare i protocolli di ChIP quando usano i nostri anticorpi nel loro specifico contesto cromatinico, si forniscono anche il protocollo della qPCR e le sequenze dei primer. Ogni set include anche un anticorpo di controllo negativo per verificare la specificità della reazione di ChIP.
Il set ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys9) include l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys9), un anticorpo di controllo negativo (IgG purificate di coniglio) e i primer per la qPCR che fiancheggiano un sito di legame per il fattore di trascrizione Sp1 nel promotore di p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A) umano che amplificano un prodotto di PCR lungo 105 paia di basi. Gli anticorpi anti-acetil-istone H3 (Lys9) e di controllo negativo sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e si possono usare per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata all′acetil-istone H3 (Lys9).

Immunogen

L′anticorpo purificato anti-acetil-istone H3 (Lys9) è indotto contro un peptide (acetilato in Lys9) corrispondente agli amminoacidi 1-12 dell′istone H3.

Application

Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare

Immunoprecipitazione della cromatina:
la cromatina sonicata preparata da cellule U2OS (equivalenti a 3 X 10⁶ cellule/IP) non trattate o trattate con UV (50 J/m2, 6 ore) è stata immunoprecipitata usando 5 μg di IgG di coniglio normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys9) e il kit Magna ChIP A (N° Cat. 17-610). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys9) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer di controllo per ChIP che fiancheggiano il promotore di p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A) umano (vedere le figure). I dati sono presentati come arricchimento in numero di volte dell′input percentuale normalizzato di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina ottenuta da cellule non trattate o trattate.
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna A ChIP (N° Cat. 17-408) o di EZ-ChIP (N. Cat. 17-371).

Saggio di Western blotting:
l′estratto acido di proteine ottenute da cellule HeLa normali (corsia 1) e trattate con butirrato di sodio 5 mM per 24 ore (corsia 2) è stato risolto mediante elettroforesi, trasferito su una membrana di PVDF e analizzato con l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys9) (1 μg/mL). Le proteine sono state visualizzate mediante un anticorpo secondario di capra anti-coniglio coniugato con HRP e un sistema di rivelazione della chemiluminescenza (vedere le figure).

Questa pratica combinazione di anticorpo ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys9) purificato e convalidato e del set di primer include l′anticorpo & gli specifici primer di controllo per la PCR.

Sottocategoria di ricerca
Biologia della cromatina

Biochem/physiol Actions

Acetil-istone H3 (Lys9)

Packaging

25 saggi/kit, ~5μg/immunoprecipitazione della cromatina

Physical form

Anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys9) (IgG policlonali di coniglio). Una microprovetta contenente 125 μg di anticorpo purificato con proteina A in 125 μL di tampone per la conservazione contenente azoturo di sodio 0,05% e glicerolo 30%.

IgG di coniglio normale. Una microprovetta contenente 125 g di IgG purificate di coniglio in 125 L di tampone per la conservazione contenente azoturo di sodio 0,05%.

Primer per p21 per ChIP. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer specifico 5 μM per la regione del promotore di p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A) umano.
FOR: GTG GCT CTG ATT GGC TTT CTG
REV: CTG AAA ACA GGC AGC CCA AG

Preparation Note

Stabile per 1 anno a -20°C dalla data di ricevimento.

Analysis Note

Controllo
Inclusi un anticorpo di controllo negativo costituito da IgG purificate di coniglio e primer di controllo specifici per il promotore di p21 (WAF1/CIP1/CDKN1A) umano.

Immunoprecipitazione della cromatina:
la cromatina sonicata preparata da cellule U2OS (equivalenti a 3 X 10⁶ cellule/IP) trattate con UV (50 J/m2, 6 ore) è stata immunoprecipitata usando 5 μg di IgG di coniglio normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys9) e il kit Magna ChIP A (N° Cat. 17-610). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys9) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer di controllo per ChIP che fiancheggiano il promotore di p21 p21(WAF1/CIP1/CDKN1A) umano (vedere le figure).
Per i dettagli sperimentali, consultare il protocollo dei kit EZ-Magna A ChIP (N° Cat. 17-408) o EZ-ChIP (N° Cat. 17- 371).

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• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
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• wgk: WGK 2