Espressione e silenziamento genico
La modulazione dell'espressione genica è una delle tecniche più potenti utilizzate dai ricercatori per studiare i complessi network genetici che governano i processi biologici. Gli esperimenti di modulazione dell’espressione genica sono ampiamente utilizzati, in particolare, per identificare terapie efficaci per la cura di diversi tipi di patologie, dal cancro, ai disturbi dell'età evolutiva fino alle malattie neurodegenerative.
Diverse sono le tecnologie disponibili per un'efficace modulazione dell'espressione genica nelle cellule e nei tessuti. La RNAi (o interferenza a RNA) è un meccanismo biologico naturale che consiste in un’inibizione potente e mirata dell'espressione genica per mezzo di siRNA (piccoli RNA interferenti). SigmaAldrich® Advanced Genomics ha avuto un ruolo preminente nello sviluppo di prodotti per RNAi destinati ai ricercatori.
Più di recente, lo sviluppo di sistemi di inibizione e attivazione dell’espressione genica basati su CRISPR (rispettivamente CRISPRi e CRISPRa) ha offerto ai ricercatori un nuovo potente set di strumenti che consentono opzioni di regolazione genica quasi illimitate. Utilizzando l'impareggiabile assortimento di prodotti per CRISPR forniti da SigmaAldrich® Advanced Genomics, i ricercatori sono oggi in grado di raggiungere in modo accurato ed efficiente knock-down, knock-out, attivazione o sovraespressione praticamente di qualsiasi gene.
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Diagramma che mostra i meccanismi di silenziamento genico mediato da shRNA e siRNA nelle cellule.
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Gli screening di genomica funzionale rappresentano uno strumento fondamentale per la ricerca orientata alla scoperta di nuove terapie in quanto consentono di svelare i meccanismi che regolano sistemi biologici, pathway e malattie. Un’efficace analisi di queste complesse reti di interazioni molecolari può essere eseguita utilizzando librerie di shRNA che consentono di ottenere knockdown genici affidabili, efficienti e di lungo termine.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics è il fornitore esclusivo delle collezioni TRC1.5 e TRC2 create da The RNAi Consortium (TRC). Queste librerie di shRNA basate su lentivirus offrono una copertura senza precedenti e sono disponibili in più formati che includono genoma intero, singoli cloni/vettori RNAi e set di famiglie di geni.
CRISPRi e CRISPRa - Per una inibizione e un'attivazione genica efficaci
CRISPRi (CRISPR interference) e CRISPRa (CRISPR activation) consentono rispettivamente il silenziamento e l'attivazione dei geni con elevata efficienza e senza alterare la sequenza del DNA. Usati in screening LOF (loss-of-function) e GOF (gain-of-function) su larga scala, consentono ai ricercatori di identificare pathway genetici unici ma funzionalmente correlati, spesso non identificabili con altri metodi.
Diagrammi schematici di CRISPRa, con il complesso SAM (Synergystic Activation Mediator) e CRISPRi con il dominio KRAB.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics offre una scelta completa di librerie CRISPRi e CRISPRa ottimizzate per esperimenti di sovraespressione e di knockdown genico. Le librerie lentivirali CRISPRi e SAM CRISPRa in pool sono disponibili sia in formato standard, sia personalizzabili in base a esigenze specifiche.
Vuoi sapere se il sistema CRISPR è adatto al tuo progetto? Contatta un esperto Sigma-Aldrich® Advanced Genomics.
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