17-285

Kit con plasmide reporter TCF

Set of transfection grade T cell factor (TCF) reporter plasmids for use in TOPFlash and FOPFlash wnt/b-catenin activity assays.

• Sinonimo/i: TOPFlash/FOPFlash, TOPFlash plasmid, FOPFlash plasmid
• UNSPSC Code: 12161503
• NACRES: NA.51
• eCl@ss: 32161000

Proprietà

• Quality Level: 100
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): transfection: suitable
• NCBI accession no.: NM_000545.4
• UniProt accession no.: P15884, P15923, P20823
• application(s): genomic analysis
• shipped in: dry ice

Descrizione

General description

FOPflash: plasmide reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, contenente due copie complete e una copia incompleta del sito di legame a TCF (mutato) seguito da tre copie di questo a orientamento inverso a monte del promotore minimo della timidina chinasi (TK) e della open reading frame della luciferasi. Questo plasmide funge da controllo negativo per il plasmide TOPflash che contiene i siti di legame a TCF wild-type.

TOPflash: plasmide reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, contenente due set (il secondo dei quali a orientamento inverso) di tre copie ciascuno del sito di legame a TCF (wild-type) a monte del promotore minimo della timidina chinasi e dell′open reading frame della luciferasi. FOPflash contenente siti di legame a TCF mutati è disponibile anche come controllo negativo.

La famiglia di geni Wnt codifica per una serie di glicoproteine secrete che sono implicate nella regolazione della crescita cellulare, nella determinazione del destino cellulare, nell'organogenesi e nell'oncogenesi. Come dedotto dall'analisi genetica della trasduzione del segnalazione di wingless (wg) in Drosophila, nelle cellule di mammifero Wnts trasmette il segnale attraverso la famiglia di recettori Frizzled, fino a Dishevelled. Dishevelled regola negativamente l'attività della glicogeno sintasi chinasi-3ß (GSK-3ß). Ciò si traduce nella stabilizzazione e nell'accumulo nel citosol di ß-catenina, un substrato di GSK-3ß, che quando fosforilata da GSK-3ß, è indirizzata alla proteolisi mediata dall'ubiquitina. ßLa ß-catenina trasloca quindi nel nucleo, dove forma complessi con proteine appartenenti alla famiglia dei regolatori della trascrizione Tcf/LEF e attiva la trascrizione dei geni responsivi al Tcf. Il plasmide reporter contenente Tcf, usato insieme a FOPFLASH (N° Cat. 21-169), permette di quantificare la trasduzione del segnale Wnt/Wg nelle cellule transfettate con questi costrutti.

Application

TOPFlash e FOPFlash, set di plasmidi reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, per l'uso nei saggi di attività di wnt/b-catenina.

Physical form

FOPflash, N° Cat. 21-169, N° Lotto 30860, 5,5 kb. 5 μg di DNA purificato per affinità eluito e confezionato asetticamente in 50 μL di Tris-HCl 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM. Soluzione congelata.

TOPflash, N. Cat 21-170, N. lotto 27752, 5,5 kb. 5 μg di DNA purificato per affinità eluito e confezionato asetticamente in 50 μL di Tris-HCl 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM. Soluzione congelata.

Preparation Note

Stabile per 2 anni dalla data di spedizione a -20°C. Per massimizzare il recupero del prodotto, centrifugare il flaconcino dopo lo scongelamento e prima di togliere il tappo.

Analysis Note

Testato regolarmente mediante analisi della sequenza del DNA per confermare l'identità dei siti di legame per TCF.

Other Notes

FOPflash (con siti di legame a TCF mutato) (N°. Cat.21-169)

TOPflash (plasmide reporter con TCF) (N° Cat. 21-170)

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids