M7074

Membrane Scaffold Protein 1E3D1

recombinant, expressed in E. coli

• Synonym(e): MSP1E3D1
• NACRES: NA.26
• UNSPSC Code: 12352202
• Form: lyophilized powder
• Biological source: Streptomyces kanamyceticus
• Recombinant: expressed in E. coli
• Mol wt: M_w 32599.98 by amino acid sequence

Eigenschaften

• biological source: Streptomyces kanamyceticus
• Quality Segment: 200
• recombinant: expressed in E. coli
• description: N-Terminal histidine-tagged
• form: lyophilized powder
• mol wt: M_w 32599.98 by amino acid sequence
• ε (extinction coefficient): 26,600 M^-1cm^-1 at 280 nm (His-tag-cleaved dissolved in 20 mM Tris pH 7.4, 0.1M NaCl, 0.5mM EDTA and 0.01%NaN₃)(lit.), 29,400 M^-1cm^-1 at 280 nm (uncleaved His-tagged dissolved in 20 mM Tris pH 7.4, 0.1M NaCl, 0.5mM EDTA and 0.01%NaN₃)(lit.)
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Das Nanodisc-Konzept ist von High-density lipoprotein-Teilchen (HDL) und deren primärer Proteinkomponente, Apolipoprotein, abgeleitet. Die Nanodisc ist eine nichtkovalente Struktur aus Phospholipid-Doppelschicht und Membrangerüstprotein (MSP), ein genmanipuliertes Protein, das die Funktion von Apolipoprotein A-1 (ApoA-1) imitiert. Eine lösliche Nanodisc fügt sich zusammen, wenn das Phospholipid eine Doppelschicht bildet, die von zwei amphipathischen MSP-Molekülen eingekreist wird, welche die hydrophoben Alkylketten der Doppelschicht abdecken. Die Länge des MSP bestimmt die Größe der Nanodisc-Struktur. MSP1E3D1 erzeugt Nanodiscs von ~12,9 nm. Die Dicke einer Nanodisc ist von der Art des eingebundenen Phospholipids abhängig (in der Regel 4,6−5,6 nm).

Sequenz: GHHHHHHHDYDIPTTENLYFQGSTFSKLREQLGPVTQEFWDNLEKETEGLRQEMSKDLEEVKAKVQPYLDDFQKKWQEEMELYRQKVEPLRAELQEGARQKLHELQEKLSPLGEEMRDRARAHVDALRTHLAPYLDDFQKKWQEEMELYRQKVEPLRAELQEGARQKLHELQEKLSPLGEEMRDRARAHVDALRTHLAPYSDELRQRLAARLEALKENGGARLAEYHAKATEHLSTLSEKAKPALEDLRQGLLPVLESFKVSFLSALEEYTKKLNTQ

Application

Das Nanodiscsystem wurde eingesetzt, um ein breites Spektrum an Proteinen einzubinden, einschließlich GPCR, P450, Bakteriorhodopsin, Gerinnungsfaktoren, Choleratoxin, TAR-Rezeptor und Aromatase.

Eine ausführliche Liste an Referenzen und Protokollen finden Sie auf der Sligar Lab Website unter sligarlab.life.uiuc.edu/nanodisc.html

Einen Leitfaden zur Verwendung dieser und anderer MSP′ zur Herstellung von Nanodiscs finden Sie auf der Seite Protokolle für Membrangerüstproteine und Nanodiscbildung.

Nanodisc lösliche Lipiddoppelschicht-Systeme sind vielseitig anwendbare Mittel, um Membranproteine in wässrigen Lösungen in einer nativ-ähnlichen Doppelschichtumgebung, in der sie monodispergiert und aktiv bleiben, löslich zu machen. Die kritische Komponente von Nanodiscs ist der umschließende amphiphatische, helixförmige Proteingürtel (Membrangerüstprotein).

Biochem/physiol Actions

Erzeugt Nanodiscs von ~12,9 nm Durchmesser

Physical form

Wird als lyophilisiertes, Histidin-markiertes Protein mit einer TEV-Proteasespaltungsstelle, das mit Tris-HCl, EDTA und NaCl stabilisiert ist, bereitgestellt.

Legal Information

Die Nanodisctechnologie und viele ihrer Anwendungen sind durch die folgenden Patente der University of Illinois geschützt:

• 7.691.414 Membrane scaffold protein
• 7.662.410 Membrane scaffold proteins and embedded membrane proteins
• 7.622.437 Tissue factor compositions and methods
• 7.592.008 Membrane scaffold protein
• 7.575.763 Membrane scaffold proteins and tethered membrane proteins
• 7.083.958 Membrane scaffold protein
• 7.048.949 Membrane scaffold protein

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07
• signalword: Warning
• hcodes: H315,H319,H335
• pcodes: P261 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable