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77170

Pepstatin A

≥100,000 U/mg

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Über diesen Artikel

Empirische Formel (Hill-System):
C34H63N5O9
CAS-Nummer:
Molekulargewicht:
685.89
UNSPSC Code:
12352202
NACRES:
NA.77
PubChem Substance ID:
EC Number:
247-600-0
Beilstein/REAXYS Number:
2201362
MDL number:

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biological source

Streptomyces sp.

Quality Level

form

powder

specific activity

≥100,000 U/mg

mp

233 °C (dec.) (lit.)

solubility

ethanol: soluble 1 mg/mL

storage temp.

2-8°C

SMILES string

CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)C[C@H](O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)CC(C)C)C(C)C)C(C)C)[C@@H](O)CC(O)=O

InChI

1S/C34H63N5O9/c1-17(2)12-23(37-33(47)31(21(9)10)39-34(48)30(20(7)8)38-27(42)14-19(5)6)25(40)15-28(43)35-22(11)32(46)36-24(13-18(3)4)26(41)16-29(44)45/h17-26,30-31,40-41H,12-16H2,1-11H3,(H,35,43)(H,36,46)(H,37,47)(H,38,42)(H,39,48)(H,44,45)/t22-,23-,24-,25-,26-,30-,31-/m0/s1

InChI key

FAXGPCHRFPCXOO-LXTPJMTPSA-N

Application

Pepstatin A is suitable for use:
  • in the inhibitor cocktail in fluorometric matrix metalloproteinase assay[1]
  • as a protease inhibitor during homogenization of tissue[2]
  • as a protease inhibitor during extraction of cells[3]
  • to determine the molar concentrations of cathepsin D by titration with pepstatin A[4]
  • in inhibiting cathepsin D[5]
It can be used in conjunction with E64-d and Leupeptin A to inhibit the degradation of autophagic cargo inside autophagosomes. For this application, the working concentration is typically between 1-10 μM.

Biochem/physiol Actions

Pepstatin A ist ein Inhibitor von sauren Proteasen (Aspartylpeptidasen). Mit Proteasen wie Pepsin, Renin, Cathepsin D, Chymosin des Rindes und Protease B (Aspergillus niger) bildet es einen 1:1-Komplex. Der Inhibitor ist hochgradig selektiv und hemmt nicht Thiolproteasen, neutrale Proteasen oder Serinproteasen. Auch gelöste γ-Sekretase und retrovirale Protease werden von Pepstatin A gehemmt. Es wird verwendet, um Proteasen aus verschiedenen Quellen zu charakterisieren.
Starker Inhibitor von sauren Proteasen, darunter Pepsin, Renin und Cathepsin D sowie zahlreiche bakterielle Asparagin-Proteasen. Wirksame Konzentration 1 μM. Etwa 1 Tag stabil.

Preparation Note

Pepstatin kann mit einer Konzentration von 1 mg/ml in 10 % (v/v) Essigsäure in Methanol (9:1 Methanol:Essigsäure) aufgelöst werden. Die Zugabe von Essigsäure kann erforderlich sein, um dieses Peptid in Methanol oder DMSO aufzulösen. Die Auflösung mit einer Konzentration von 1 bis 2 mg/ml in Ethanol ist möglich, allerdings kann für eine vollständige Auflösung Wärme erforderlich sein. Pepstatin-A-Lösungen können ohne Zerfall des Peptids bis 60 °C erhitzt werden.
Stammlösungen mit einer Konzentration von 1 mg/ml sind bei 4 °C mindestens eine Woche lang stabil. Eine 1-mM-Lösung in Methanol oder DMSO ist bei -20 °C monatelang stabil. Wenn Lösungen einen dunkleren Gelbton annehmen, findet eine Hydrolyse des Reagenz statt.
Eine Arbeitskonzentration von 1 μM ist bei Raumtemperatur mindestens einen Tag lang stabil.

Other Notes

1 U entspricht der Inhibitormenge, welche die Pepsinaktivität um 1 U reduziert (1 Pepsin-U entspricht der Enzymmenge, die bei 280 nm eine Extinktionszunahme von 0.001 pro Minute bei pH 2.0 und 37°C bewirkt (Haemoglobin, Fluka®-Nr. 51290, als Substrat, Testendvolumen: 16 ml); 10′000 Extinktions-U wie oben beschrieben, entsprechen ~1 Bergmeyer-U, wenn 1-Pepsin-U der Enzymmenge entspricht, die 1 μmol Acetyl-L-phenylalanyl-3,5-diiod-L-tyrosin pro Minute bei 2.0 und 37°C hydrolysiert
Strong inhibitor of acid proteases - pepsin, cathepsin D, renin[6]

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Quality Level

300

Quality Level

300

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200

form

powder

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powder

form

lyophilized powder

form

solid

storage temp.

2-8°C

storage temp.

2-8°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

solubility

ethanol: soluble 1 mg/mL

solubility

ethanol: acetic acid (9:1): 1 mg/mL, clear to hazy, colorless

solubility

H2O: 50 mg/mL, 1-butanol: soluble, 1-propanol: soluble, DMSO: soluble, ethanol: soluble, methanol: soluble

solubility

DMF: soluble, DMSO: soluble, ethanol: soluble, ethyl acetate: soluble, methanol: soluble

mp

233 °C (dec.) (lit.)

mp

233 °C (dec.) (lit.)

mp

-

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Eyeshields, Gloves, type N95 (US)



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M Ferreras et al.
FEBS letters, 486(3), 247-251 (2000-12-20)
The angiogenesis inhibitor endostatin is a fragment of the NC1 domain of collagen XVIII. The generation of endostatin has been investigated only in murine hemangioendothelioma cell cultures and was ascribed to cathepsin L. Distinct endostatin-like fragments were detected in human
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The Journal of cell biology, 118(4), 951-959 (1992-08-01)
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Protease inhibitors produced by microorganisms.
H Umezawa
Acta biologica et medica Germanica, 36(11-12), 1899-1915 (1977-01-01)



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SKUGTIN
77170-10MG04061832945217
77170-50MG04061832945224
77170-5MG04054839595448

Questions

  1. Can Pepstatin A (CAS 26305-03-3), product number 77170, be stored in ethanol? If so, what are the recommended temperature and duration for storage? Additionally, should concerns about hydrolysis impact its storage?

    1 answer
    1. Pepstatin A can be stored at -20°C following reconstitution/dissolution and is soluble in ethanol at 1mg/mL. It is also soluble in DMSO, ethanol, or glacial acetic acid (9:1) at 1mg/ml. For dilution, an aqueous buffer at slightly alkaline pH is recommended when using the above organic solvents. However, it is insoluble in dH2O and other aqueous buffers at near neutral pH, and may precipitate from the solution if water or acidic buffer is used for dilution. Solutions of Pepstatin A can be heated as high as 60°C without decomposing the peptide.

      Regarding preparation, Pepstatin A is only sparingly soluble in water, and its solubility is related to the purity of the preparation. Stock solutions at 1mg/mL should be stable for at least a week at 4°C, while a 1mM solution in methanol should be stable for months at –20°C. Any yellowing of the solution indicates hydrolysis. An effective working concentration is 1uM, stable for at least one day at room temperature, with a typical working concentration being 0.5-1ug/ml.

      In terms of stability and solubility, some solutions can be difficult to obtain and can be encouraged by rapid stirring, sonication, or gentle warming (in a 45-60°C water bath). Peptides in solution are less stable than in lyophilized form, especially if they contain certain amino acids. It's recommended to store peptides in solution for as short a time as possible, avoid repeated freeze-thaw cycles, and discard any portion of an aliquot unused after thawing. Additionally, peptides stored in solution can be susceptible to bacterial degradation, so sterile solutions or passing the peptide solution through a 0.2 μm filter to remove potential bacterial contamination are advised whenever possible.

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