S5692

SYPRO^® Orange Protein-Gel-Farbstoff

• Synonym(e): SYPRO^® dye, protein gel stain
• EG-Nummer: 200-664-3
• UNSPSC-Code: 41105322
• NACRES: NA.32

Eigenschaften

• Haltbarkeit: ≥6 mo. (when stored desiccated and protected from light at room temperature, 4 °C or 20 °C.)
• Qualitätsniveau: 200
• Methode(n): protein staining: suitable
• Fluoreszenz: λ_ex 300,470 nm; λ_em 570 nm

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

SYPRO Orange ist ähnlich zu SYPRO Red, es ist jedoch etwas heller und zeigt eine etwas höhere Hintergrundfluoreszenz. Für die Anwendung mit einem Laser-Anregung Gel-Scanner wird ein Argon-Ionen-Laser-basiertes Instrument für SYPRO orange empfohlen. Der Farbstoff wird effizient durch UV- oder Breitband-Belichtung angeregt. Er ist nicht für die Färbung von Proteinen auf Blots oder in IEF-Gelen geeignet und zeigt eine verminderte Empfindlichkeit bei Färbung von Proteinen auf 2-D Gelen.
SYPRO Orange ist:

• Hochempfindlich. Der Farbstoff kann 1 bis 2 ng Protein pro Minigel Bande detektieren, was ihn empfindlicher als Coomassie-Brillant-Blau oder Silber-Färbung macht.
• Schnell. Die Färbung ist in weniger als einer Stunde beendet
• Einfach. Nach der Elektrophorese wird das Gel gefärbt, gespült und fotografiert, keine Fixierungs- oder Entfärbungs-Schritte sind erforderlich
• Kompatibel mit Standard-Laborausrüstung. Gefärbte Proteine ?können mit einem Standard 300 nm UV-Transilluminator oder Laser-Scanner ?visualisiert werden.
• Kostengünstig. Die Färbung mit SYPRO Orange kostet weniger als Silberfärbung und erfordert weniger Zeit.
• Geringe Protein-Protein-Variabilität. Der Farbstoff interagiert mit dem SDS-Mantel um das Protein, was eine konsistentere Färbung von verschiedenen Arten von Proteinen im Vergleich zu Coomassie- oder Silberfärbung ergibt.
• Selektiv für Proteine. SYPRO orange weist Proteine ??so klein wie 6,5 kDa nach und färbt keine Nukleinsäuren oder Lipopolysaccharide. Es färbt glykosylierte Proteine.
• Weiter linearer Detektionsbereich. Die Fluoreszenzintensität der gefärbten Banden ist über drei Größenordnungen mit der Proteinmenge linear (eine viel breiterer Bereich als bei der Coomassie- oder Silberfärbung).

Anwendung

Die orangefarbene SYPRO-Proteingel-Färbung wird in Thermostabilitäts-Assays (thermische Denaturierung bzw. Thermal Shift) von Proteinen von Interesse verwendet. Außerdem kommt der Farbstoff in der Differential-Scanning-Fluorimetrie zum Einsatz.

Vorsicht

Die SYPRO-Stammlösungen sollten lichtgeschützt und mit einem Trockenmittel bei Raumtemperatur, bei 4 °C oder bei 20 °C gelagert werden. Bei ordnungsgemäßer Lagerung sind diese Stammlösungen sechs Monate bis ein Jahr stabil. Das in Puffer oder Essigsäurelösung verdünnte Färbereagenz kann in sehr sauberen und Reinigungsmittel-freien Glas- oder Kunststoffflaschen lichtgeschützt bei 4 °C mindestens drei Monate lang gelagert werden. 

Rechtliche Hinweise

SYPRO is a registered trademark of Life Technologies

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): 188.6 °F - closed cup
• Flammpunkt (°C): 87 °C - closed cup