D9156

Desoxyribonukleinsäure, einsträngig aus Lachshoden

For hybridization

• Synonym(e): single-stranded template DNA
• CAS-Nummer: 68938-01-2
• UNSPSC Code: 41106310
• eCl@ss: 32160414
• NACRES: NA.52
• MDL number: MFCD00130921
• Assay: 9-11 mg/mL (DNA concentration)
• Biological source: fish testis (salmon)
• Form: solution
• Storage temp.: −20°C

Eigenschaften

• biological source: fish testis (salmon)
• Quality Segment: 200
• grade: Molecular Biology
• assay: 9-11 mg/mL (DNA concentration)
• form: solution
• concentration: 10 mg/mL in H₂O
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Eine gebrauchsfertige Lösung von hochwertiger, einsträngiger Template-DNA, die aus Lachshoden isoliert wurde. Die Lösung wird mit einer Konzentration von 9–12 mg/ml geliefert.

Application

Als Blockierungsmittel bei Northern und Southern Blotting.

Bei Hybridisierungen von Nukleinsäuren tragen viele Faktoren zum Signal-Rauschen-Verhältnis bei. Dazu gehören unter anderem die Gegenwart eines Lösungsmittels (Formamid), Temperatur und Länge der Hybridisierung, Menge der Hybridisierungslösung, Grad und Methode der Agitation, Verwendung von Blockierungsreagenzien, Konzentration und spezifische Aktivität der Sonde, Verwendung von molekularen Wirkstoffen zur Steigerung der Reassoziationsrate der Nukleinsäuren sowie der Grad an Strenge, die beim Waschen der Membran herrschte.

Um jede nicht-spezifische Hybridisierung der Sonde an ein Substrat zu verringern, müssen Blockierungsmittel eingesetzt werden. Im Allgemeinen wird dies mit einer Kombination aus Blockierungsreagens, Reinigungsmittel und denaturierter, fragmentierter DNA erreicht. Sigma bietet geschallte, denaturierte DNA von vielen verschiedenen Spezies, die bei Northern und Southern Blotting und bei anderen Methoden für die Hybridisierung von Nukleinsäuren als Blockierungsmittel verwendet werden können.

Einsträngige Desoxyribonukleinsäure aus Lachshoden eignet sich als Blockierungsmittel bei Southern-Hybridisierungen. Sie wurde für die histochemische In-situ-Hybridisierung von Knochenmarks-Biopsieproben[1] und von Monozyten-Subpopulationen aus dem menschlichen Blut verwendet.[2]

Preparation Note

Diese DNA wird in Ethanol ausgefällt und beschallt, wodurch einsträngige Fragmente entstehen, die gemeinsam mit den Markierungsfragmenten für die Basenpaare 587 und 831 migrieren.

Other Notes

Wenn DNA bei Raumtemperatur in Lösung steht, findet ein Reannealing statt; daher wird empfohlen, die Lösung vor der Verwendung 10 Minuten lang zu kochen und dann mindestens 5 Minuten lang auf Eis abzukühlen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)