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16-663

Magna ChIP® magnetische Protein-A+G-Beads

provides a rapid, reproducible and efficient collection of immunocomplexes for ChIP and RIP assays

Synonym(e):

ChIP magnetic A+G beads, ChIP magnetic A/G beads, ChIP magnetic beads

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General description

Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) wird verbreitet für die Untersuchung der genspezifischen und genomweiten Verteilung von speziellen DNA- und RNA-Bindungsproteinen oder Proteinmodifikationen eingesetzt. Ebenso wie gängige Immunpräzipitation-Assays involviert auch ChIP die Isolierung von Immunkomplexen unter Verwendung eines festen Mediums wie Agarose oder magnetische Beads, die an entweder IgG-bindendes rekombinantes Protein A oder Protein G gekoppelt sind. Experimente zum Vergleich von magnetischen Protein-A- vs. Protein-G- vs. Protein-A/G-Bead-Mischungen zeigten, dass eine Mischung aus Protein-A- und -G-Beads mit einem breiten Spektrum von Antikörperisotypen gut funktioniert. Durch die Verwendung von Protein-A/G-Bead-Mischungen entfällt die Notwendigkeit zum Beachten, welche Beads oder Kits verwendet werden müssen, um für eine bestimmte Antikörper/Bead-Bindungsaffinitätskombination zu funktionieren. Zusätzlich zum Vereinfachen des Verfahrens verbessert die Verwendung von Protein-A/G-Bead-Mischungen im Vergleich zur Verwendung von entweder Protein A oder Protein G allein das Signal-Rausch-Verhältnis ohne die Rückgewinnung von eingebrachtem Chromatin in ChIP-Assays zu verringern.

Application

Diese Mischung aus magnetischen Protein-A+G-Beads ermöglicht die Verwendung eines breiteren Spektrums von Antikörpern als A und G allein und liefert eine schnelle, reproduzierbare und wirksame Sammlung von Immunkomplexen für Chromatin-Immunpräzipitation- (ChIP) sowie RNA-Immunpräzipitation-Assays (RIP).

Verwenden Sie 20 µl Bead-Suspension je ChIP-Anwendung. Enthält ausreichend Reagenzien für 50 Ausfällungsreaktionen. Dispergieren Sie die Beads vor dem Pipettieren durch schnelles Vortexen gründlich.

Zum Nachweis/Quantifizieren von: Protein A+G

Physical form

Flüssigsuspension. Als magnetische Beads-Aufschlämmung in phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH-Wert 7,4, mit 0,01 % Tween®-20 und 0,09 % Natriumazid bereitgestellt.

Preparation Note

Bei 2–8 °C ab Versanddatum 1 Jahr haltbar. Nicht einfrieren.

Analysis Note

Regelmäßig mittels Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) unter Verwendung von HeLa-Kernextrakten und dem Magna ChIP® A Kit (Kat.-Nr. 17-610) bewertet.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TWEEN is a registered trademark of Croda International PLC

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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Chromatin immunoprecipitation (ChIP) has been widely adapted for the study of gene-specific and genome-wide distribution of specific DNA- and RNA-binding proteins or protein modifications. Similar to standard protein immunoprecipitation assays, ChIP involves isolation of immunocomplexes using a solid medium, such as agarose or magnetic beads, coupled to either IgG binding recombinant protein A or protein G. In a typical ChIP experiment either protein A or G is selected for enrichment depending on the antibody isotype. However, proteins A and G possess differing affinities for human and mouse IgGs. Complicating this choice, for some antibody isotypes there is affinity for both protein A and G. In addition, we have observed that independent of the isotype the affinity of a specific antibody for protein A or G can vary depending on the specific clone, purification method, and source.

New Products: Antibodies, Assays, Small Molecules, Inhibitors, and Proteins

Chromatin-immunoprecipitation (ChIP) followed by next generation sequencing (ChIP-seq) of the immunoprecipitated DNA is a powerful tool for the investigation of protein:DNA interactions. To perform ChIP-seq, chromatin is isolated from cells or tissues (with or without chemical crosslinking) and fragmented. Antibodies recognizing chromatinassociated proteins of interest are used to enrich the sample for specific chromatin fragments. The DNA is recovered, sequenced on various NGS platforms, and aligned to a reference genome to determine specific protein binding loci. ChIP-seq studies have increased our knowledge of transcription factor biology, DNA methylation and histone modifications.

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