Endonuklease
Endonukleaseenzyme werden zum Reduzieren der Nukleinsäurenkontamination in Bioprocessing-Workflows und Forschungsanwendungen durch Spalten von DNA und RNA in kleinere Fragmente eingesetzt. Obwohl eine Vielfalt natürlicher Quellen verfügbar ist, stellen diese Endonukleaseformulierungen eine Herausforderung dar, da sie Proteaseaktivität und Viruskontamination aufweisen können.
Benzonase®-Endonuklease, eine genetisch veränderte Nuklease aus Serratia marcescens, eliminiert das Risiko von natürlich gewonnenen Endonukleasen und kann alle Formen von DNA und RNA abbauen. Wenn sie unter geeigneten Reaktionsbedingungen verwendet wird, baut Benzonase®-Endonuklease alle Formen von DNA und RNA (einzelsträngig, doppelsträngig, linear und zirkulär) zu Oligonukleotiden von etwa drei bis fünf Basenpaaren Länge ab. Sie weist eine besonders hohe spezifische Aktivität auf ohne nachweisbare proteolytische Aktivität.
Bei einigen Herstellungstemplates kann die Verwendung einer Salzkonzentration oberhalb des physiologischen Spiegels (200 mM NaCl) von Vorteil sein. Benzonase® Salt Tolerant Endonuclease ermöglicht die Verwendung von Salzkonzentrationen von 200 mM bis 1.000 mM NaCl für den Zwischenschritt von Zelllyse und DNA-Verdau während der Herstellung von AAV-Vektoren (Adeno-assoziierte Viren). Diese neue Ergänzung des Benzonase®-Portfolios ist kompatibel mit allen getesteten Detergenzien, einschließlich der Deviron®-Detergenzien, die eine Alternative zu Triton™ X-100 sind.
Erfahren Sie mehr über das Bioprocessing und Forschungsanwendungen von Benzonase®-Endonuklease.
Bioprocessing-Anwendungen
Benzonase®-Endonuklease ist für anspruchsvolle Bioprocessing-Anwendungen gut geeignet. Sie baut Nukleinsäure mit einer Fragmentgröße von deutlich unter 200 Basenpaaren, die von der Weltgesundheitsorganisation (WHO) und US Food and Drug Administration (FDA) gefordert werden, ab, wird unter GMP-IPE-PQG-Bedingungen freigegeben und für sie liegt ein Drug Master File bei der FDA vor, das bei Zulassungsanträgen zitiert werden kann.
Sie ist unter einem breiten Spektrum von Betriebsbedingungen und Anwendungen wirksam, einschließlich:
- Aufreinigung von viralen Impfstoffen und viralen Vektorimpfstoffen
- Aufreinigung von Zell- und Gentherapien
- Aufreinigung von onkolytischen Viren
- Entfernung von DNA und RNA aus Proteinen und anderen Biologika
- Entfernung von Wirtszell-DNA
Um verschiedenen Herstellungsanforderungen gerecht zu werden, sind drei Versionen der IPEG-PQG-GMP-Benzonase®-Endonuklease erhältlich. Alle sind Teil des Emprove®-Programms, das die Erstellung von Dokumenten für regulatorische Einreichungen erleichtert (Tabelle 1).
Benzonase®-Endonukleasen werden im E.-coli-W3110-Expressionssystem hergestellt und bergen ein minimales Risiko einer Viruskontamination.
- Benzonase® Endonuclease Emprove® Expert
- Benzonase® Endonuclease Safety Plus Emprove® Expert wird in einem chemisch definierten Medium hergestellt und jede Charge wird auf Abwesenheit von Adventiv-Viren und Mykoplasma geprüft.
- Die Benzonase® Salt Tolerant Endonuclease wird ebenfalls in einem chemisch definierten Medium hergestellt und jede Charge wird auf Mykoplasma geprüft. On-Demand-Tests für Adventiv-Viren sind erhältlich.
Sind Sie an einer Benzonase®-Produktprobe interessiert? Dann klicken Sie auf die nachstehende Schaltfläche, um mehr zu erfahren.
Forschungsanwendungen
Benzonase®-Endonuklease kann für eine Reihe von Forschungsanwendungen eingesetzt werden, einschließlich:
- Entfernen von Wirts-DNA aus Mikrobiomproben
- Verbesserung der Identifizierung von mikrobieller Taxa für Mikrobiomstudien
- Verhindern von Verklumpen während der Vakzinforschung
- Reduktion der Lysatviskosität während Arbeitsprozessen zur Extraktion von rekombinanten Proteinen, was zu einer gesteigerten Ausbeute des Zielproteins führt
Benzonase®-Endonuklease ist in Form mehrerer hochreiner, hochkonzentrierter Optionen erhältlich.
Benzonase®-Endonuklease ist auch als Kombipack mit Proteinextraktionsreagenzien erhältlich, um Workflows noch stärker zu vereinfachen.
- BugBuster® Mastermix: BugBuster® Proteinextraktionsreagens mit Benzonase® Endonuklease und rLysozyme™ Lösung
- BugBuster® HT Proteinextraktionsreagens: Proteinextraktionsreagens BugBuster und Benzonase®-Endonuklease
- CelLytic™ B Plus Kit: Lysozym, Benzonase®-Endonuklease und Proteaseinhibitoren
Technische Informationen |
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Weitere Produktinformationen
- Data Sheet: Benzonase® Salt Tolerant endonuclease Emprove® Expert
The best-in-class solution for nucleic acid removal at high salt concentrations.
- Technical Poster: AAV process intensification using high salt lysis & Benzonase® Salt Tolerant endonuclease
The overall process yield of adeno-associated virus (AAV) manufacturing is a major concern for biotherapeutic manufacturers
- Family Portfolio Flyer: Explore The Benzonase® endonuclease Portfolio
Ensuring efficiency and regulatory compliance — The smart solution for DNA removal in biopharmaceutical production
- Technical Article: AAV Process Intensification Using High Salt Lysis and Salt Tolerant Endonuclease
Production of adeno-associated virus (AAV) vectors includes a midstream step that combines cell lysis and nuclease treatment.
- Flyer: Deviron® 13-S9
Detergent, EMPROVE® EXPERT
- Data Sheet: What Does it Mean Switching from Benzonase® Endonuclease Emprove® Expert to Benzonase® Endonuclease Safety Plus Emprove® Expert
Optimization of Benzonase® endonuclease use in virus purification.
- Data Sheet: Optimization of Benzonase® Endonuclease Use in Virus Purification
Benzonase® endonuclease— the smart solution for DNA removal in biopharmaceutical production has proven its value for over 30 years.
- Brochure: Benzonase® Endonuclease
Balancing efficiency and regulatory compliance—the smart solution for DNA removal in biopharmaceutical production.
- Technical Article: Benzonase® Nuclease Q&A
Auf dieser Seite sind neun häufig gestellte Fragen und Antworten zu Benzonase® Nuklease aufgeführt.
- Technical Article: Removing DNA and RNA Using Benzonase® Endonuclease During Viral Production
Benzonase®endonuclease efficiently removes nucleic acid contaminants from viral production, crucial for cell and gene therapies and vaccines.
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