This material may be reconstituted in 1X PBS without Calcium and Magnesium. However, when this product is prepared as recommended, in 50 mM HEPES/KOH (pH 7.4) with 150 mM NaCl to 10 mg/mL, or in 10 mM sodium acetate (pH 7.5) with 5 mM calcium acetate, solutions are expected to be stable for 2 weeks at 2-8°C and up to 2 months when stored in aliquots at -20°C. Solution stability in PBS has not been evaluated. Various sources indicate solutions diluted in PBS are stable for approximately 3 days at 2–8 °C.
Fortfahren mit
D4693
Dispase® II
protease
Synonym(e):
Protease aus Bacillus polymyxa
Anmelden zur Ansicht der Organisations- und Vertragspreise.
Größe auswählen
Ansicht ändern
| Ihnen/SKU | Verfügbarkeit | Preis |
|---|
Über diesen Artikel
Specific activity:
≥0.5 units/mg solid
Preise und Verfügbarkeit sind derzeit nicht verfügbar.
Technischer Dienst
Benötigen Sie Hilfe? Unser Team von erfahrenen Wissenschaftlern ist für Sie da.
Unterstützung erhaltenQuality Segment
form
lyophilized solid
specific activity
≥0.5 units/mg solid
technique(s)
cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable
solubility
10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble
storage temp.
2-8°C
Application
Das Enzym von Sigma wurde zur Entwicklung eines Protokolls für die Ex-vivo-Kultivierung von embryonalen Milchgängen der Maus verwendet.[1] Es wurde bei der Behandlung von Herzteilen der Ratte während der Isolierung von Mitochondrien vom Rattenherz verwendet.[2] Es wurde außerdem zur Isolierung von dentalen Pulpa-Stammzellen (DPSCs) durch enzymatische Hydrolyse verwendet. Diese Zellen wurden mit DPSC verglichen, die mit der Explantationsmethode isoliert wurden, um ihre Stammzellen und Differenzierungseigenschaften zu analysieren.[3]
Dispase® II wird für Fluorescence-Activated Cell Sorting (FACS) verwendet.[4] Sie wird außerdem zum Trennen von viszeralen Dottersackschichten eingesetzt.[5]
Geeignet zur Verwendung bei der Herstellung von Einzelzellsuspensionen für die Sequenzierung.
Dispase® II wird für Fluorescence-Activated Cell Sorting (FACS) verwendet.[4] Sie wird außerdem zum Trennen von viszeralen Dottersackschichten eingesetzt.[5]
Geeignet zur Verwendung bei der Herstellung von Einzelzellsuspensionen für die Sequenzierung.
Biochem/physiol Actions
Dispase® II ist eine neutrale Protease, die die N-terminalen Peptidbindungen von unpolaren Aminosäureresten hydrolysiert. Es kann zur Trennung vieler in vitro gezüchteter Gewebe und Zellen verwendet werden. Das Enzym ist sehr schonend und schädigt die Zellmembranen nicht. Es kann auch zur Verhinderung von Verklumpungen in Suspensionskulturen verwendet werden. Diese Protease spaltet Fibronectin und Typ-IV-Collagen, jedoch nicht Laminin, Typ-V-Collagen, Serumalbumin oder Transferrin.[6] Dispase® II ist spezifisch für die Spaltung von Leucin-Phenylalanin-Bindungen. Ca2+, Mg2+, Mn2+, Fe2+, Fe3+ und Al3+ aktivieren das Enzym. EDTA, EGTA, Hg2+ und andere Schwermetalle hemmen die Enzymaktivität.[7] Das Enzym enthält 1 g-atom Zink pro g-mol aufbereitetes Enzym. Wenn dieser Zinkbestandteil durch Chelatbildner wie z. B. EDTA oder EGTA entfernt wird, entsteht ein inaktives Apoenzym. Das Enzym wird durch Serum nicht gehemmt.
Physical form
Lyophilisiertes Pulver, das Calciumacetat und Milchzucker enthält.
Preparation Note
Eine 50-U/ml-Stammlösung kann durch Auflösen des Pulvers in Puffer, der 10 mM NaAc (pH 7,5) und 5 mM CaAc enthält, hergestellt werden. Bei 4 °C aufbewahren.
Analysis Note
Das Enzym kann anfänglich in 50 mM Hepes/KOH pH 7,4, 150 mM NaCl bei 10 mg/ml gelöst werden. Weitere Verdünnungen sollten mit dem für die dissoziierten Zellen am besten geeigneten Kulturmedium vorgenommen werden. Dispase ist eine Metallproteinase und wird durch divalente Kationen, einschließlich Ca2+, Mg2+, Mn2+ und Fe2+ aktiviert.
Other Notes
Eine Einheit hydrolysiert die Caseinmenge, die eine Färbung entsprechend 1,0 μmol (181 μg) Tyrosin pro min bei pH 7,5 und 37 °C produziert (Farbe vom Folin-Ciocalteu Reagenz), sofern nicht anders angegeben.
Legal Information
Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
1 of 1
Dieser Artikel | |||
|---|---|---|---|
| technique(s) cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable | technique(s) cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable | technique(s) cell culture | mammalian: suitable | technique(s) cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable |
| specific activity ≥0.5 units/mg solid | specific activity ≥10 unit/mg solid | specific activity ≥9,000 BAEE units/mg protein | specific activity ≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid |
| form lyophilized solid | form lyophilized solid | form essentially salt-free, lyophilized powder | form essentially salt-free, lyophilized powder |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C |
| solubility 10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble | solubility - | solubility hydrochloric acid: soluble 1 mM | solubility TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble |
| Quality Level 100 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Hier finden Sie alle aktuellen Versionen:
Besitzen Sie dieses Produkt bereits?
In der Dokumentenbibliothek finden Sie die Dokumentation zu den Produkten, die Sie kürzlich erworben haben.
-
Can I also dissolve the powder in 1x PBS?
1 answer-
Helpful?
-
-
Can I aliquot in 10 mM sodium acetate (pH 7.5) + 5 mM calcium acetate, freeze once, and thaw as needed? I need small amounts from the same lot over several months, therefore I cannot store it at 2-8°degrees for only 2 weeks,
1 answer-
Aliquots of this product prepared in 10 mM sodium acetate (pH 7.5) + 5 mM calcium acetate can be stored at -20 °C, where stability is known for up to 2 months.
Helpful?
-
-
How long can I store the powder at -80°C?
1 answer-
In powder form, this product is quite stable and stored at 2-8°C. This product is not assigned an expiration or retest date. A warranty period of 1 year from the date of shipment applies. The long term stability of this material when stored at -20°C or -80°C has not been investigated. Prepared solutions are expected to be stable for 2 weeks at 2-8°C and up to 2 months when stored in aliquots at -20°C.
Helpful?
-
-
Could I dissolve in another work solution instead Hepes/KOH 50 mM pH 7,4, NaCl 150 mM?
1 answer-
Two approaches are available for reconstituting this lyophilized enzyme formulation. The first approach is for making a solution used in cell dissociation, and the second is a more generic method, such as for assaying Dispase activity:
1. Dissolve in 50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl at 10 mg/mL. Further dilutions should be made in the cell culture media most appropriate for the cells being dissociated.
2. A 50 U/mL stock solution may be prepared by dissolving the powder in a buffer containing 10 mM sodium acetate (pH 7.5) and 5 mM calcium acetate.
Helpful?
-
-
how many units in 1 mg for the product D4693
1 answer-
The enzymatic activity varies from lot to lot and is reported in the Certificate of Analysis. A brief survey of recent lots reveals an average activity of 1.2 u/mg solid. Please see the link below to review a sample or lot specific Certificate:
https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/d4693*product-documentationHelpful?
-
-
Once dissolved into a stock solution, how long is it stable at 4 degrees C?
1 answer-
The reconstituted stock solution can be stored at 2 to 8 °C for 2 weeks. Alternatively, it can be stored at - 20 deg C in aliquots to minimize freeze-thaw cycles where it should be stable for up to 2 months. The working solution, diluted in PBS from the stock solution, is stable for approximately 3 days at 2 to 8 °C.
Helpful?
-
-
Is Dispase II esteril for isolating cells from tissues for doing cell cultures? Thanks Monica
1 answer-
This product has been used in the ex vivo culture of mouse embryonic mammary buds. Please see protocols in the published article: https://link.springer.com/article/10.1007/s10911-013-9288-2
Helpful?
-
-
What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
Helpful?
-