A7011

Alcohol-Dehydrogenase aus Saccharomyces cerevisiae

≥300 units/mg protein, lyophilized powder (contains buffer salts), M_w 141-151 kDa

• Synonym(e): ADH1, Adh1p, SCAD, YDAH-1, YIM-1, ADH, Alcohol-Dehydrogenase aus Hefe, Alkohol:NAD⁺ -Oxidoreduktase
• CAS-Nummer: 9031-72-5
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-870-4
• MDL number: MFCD00081305
• EG-Nummer: 1.1.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥300 units/mg protein
• Biological source: Saccharomyces cerevisiae

Eigenschaften

• biological source: Saccharomyces cerevisiae
• Quality Segment: 300
• form: lyophilized powder (contains buffer salts)
• specific activity: ≥300 units/mg protein
• mol wt: M_w 141-151 kDa
• purified by: crystallization
• storage condition: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• greener alternative product characteristics: Waste Prevention; Design for Energy Efficiency; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• color: white to light yellow-brown, Light brown
• optimum pH: 8.6-9.0
• solubility: H₂O: soluble 1.0 mg/mL, clear to slightly hazy, colorless to faintly yellow, soluble
• UniProt accession no.: A0A3G3NDH9, S5RCH3, S5RK20, S5S176
• application(s): diagnostic assay manufacturing
• greener alternative category: , Enabling
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Forschungsbereich: Neurowissenschaft

Hefealkoholdehydrogenase 1 (ADH1) gehört zur Familie der zinkhaltigen Alkoholdehydrogenasen. Sie ist ein Homotetramer, bei dem jede Untereinheit eine katalytische Domäne und eine coenzymbindende Domäne aufweist.[1]

Application

Alkoholdehydrogenase wurde zusammen mit der laktischen Dehydrogenase für die enzymatische Reduktion von Acetaldehyd mittels Natrium(R,S)-[2-³H]-Laktat verwendet.[2] Sie wurde außerdem zur Untersuchung der hemmenden Wirkung von Zink-chelatisierten Silymarinflavonolignanen auf Hefealkoholdehydrogenase eingesetzt.[3]

Die Ethanolkonzentration kann durch Überwachung der enzymatischen Reduktion von NAD mittels Alkoholdehydrogenase nach vorheriger Entfernung der Aldehydgruppe kolorimetrisch bestimmt werden.[4]

Biochem/physiol Actions

ADH (Alkoholdehydrogenase) ist eines der ersten Enzyme, die isoliert und aufgereinigt wurden. NAD⁺ ist sein Kofaktor. Es wurden drei Isozyme von Hefe-ADH, d. h. Hefe-Alkoholdehydrogenase 1, 2 und 3 (Yeast Alcohol Dehydrogenase, YADH) nachgewiesen. YADH-1 wird während anaerober Fermentation exprimiert, YADH-2 wird im Zytoplasma exprimiert und YADH-3 ist in den Mitochondrien lokalisiert. Ein 141kDa-Tetramer mit 4 gleichen Untereinheiten. Die aktive Stelle jeder Untereinheit enthält ein Zinkatom. Jede aktive Stelle enthält außerdem 2 reaktive Sulfhydrylgruppen und einen Histidinrest.

Isoelektrischer Punkt: 5,4–5,8

Optimaler pH-Wert: 8,6–9,0

Substrate: Hefe-ADH ist am aktivsten mit Ethanol. Ihre Aktivität nimmt mit wachsender oder abnehmender Größe des Alkohols ab. Verzweigtkettige Alkohole und sekundäre Alkohole weisen ebenfalls eine sehr niedrige Aktivität auf.

K_M (Ethanol) = 2,1 × 10^-2 M
K_M (Methanol = 1,3 × 10^-1 M
K_M (Isopropanol) = 1,4 × 10^-1 M

Inhibitoren: Verbindungen, die mit freien Sulfhydrylen reagieren, wie N-Alkylmaleimide und Iodacetamid.
Zink-Chelator-Inhibitoren
8-Hydroxychinolin, 2,2′-Dipyridyl und Thioharnstoff.
Substratanaloge Inhibitoren, wie β-NAD-Analoga, Purin- und Pyrimidinderivate, Chlorethanol und Fluorethanol.

Extinktionskoeffizient: E^{1 %} = 14,6 (Wasser, 280 nm)

Hefealkoholdehydrogenase 1 (YADH1) katalysiert die Umwandlung von Acetaldehyd zu Ethanol im Glucosefermentationsweg.[5] Sie ist auch an der Produktion von Alkohol beim Aufschluss von Aminosäuren bei der Aminosäuregärung beteiligt.

Physical form

Feststoffe mit einem Gehalt von ≤ 2 % Natriumcitrat als Puffersalz

Preparation Note

Löst sich in Wasser auf und bildet eine leicht trübe, farblose bis leicht gelbliche Lösung mit einer Konzentration von 1 mg/ml.

Other Notes

Eine Einheit konvertiert 1,0 μmol Ethanol pro Minute bei 25 °C und einem pH-Wert von 8,8 zu Acetaldehyd.

Disclaimer

Enthält gebundene β-NAD und β-NADH und eignet sich nicht für das Recycling von β-NAD- und β-NADH-Mikroassays. Falls ADH für diesen Zweck benötigt wird, siehe Bestellnr. A3263.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)