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Trypsin-Inhibitor aus Glycine max (soybean)

lyophilized powder, ~10000 U/mg

Synonym(e):

Hageman Faktor-Inhibitor, Popkorn-Inhibitor, SBTI

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Über diesen Artikel

CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352202
EC Number:
232-906-9
NACRES:
NA.77
MDL number:

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biological source

Glycine max (soybean)

Quality Segment

form

lyophilized powder

specific activity

~10000 U/mg

mol wt

Mr ~20000

solubility

0.1 M phosphate pH 7.6: 5 mg/mL, clear, colorless to almost colorless

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

Biochem/physiol Actions

Dieser Inhibitor wirkt gegen Trypsin und in geringerem Maß auch gegen Chymotrypsin und Plasmin. Er hemmt auch Proteasen mit ähnlichen Mechanismen wie Trypsin, Plasmakallikrein und Gerinnungsfaktor X. Der Trypsininhibitor wirkt nicht gegen Metallproteasen, gewebebasiertes Kallikrein, Säureproteasen oder Thioproteasen. Dieser Inhibitor wirkt, indem er einen 1:1-stöchiometrischen Komplex mit der proteaseaktiven Stelle bildet und anschließend eine einzelne Arginin-Isoleucin-Bindung an dem Inhibitor spaltet. Die Hemmung ist sowohl reversibel als auch pH-Wert-abhängig.

Preparation Note

Der Trypsininhibitor ist zu 10 mg/ml in Wasser und Phosphatpuffern löslich. Er ist in Balanced Salt Solutions zu 1 mg/ml und in serumfreien Medien löslich. Konzentrierte Lösungen von mehr als 10 mg/ml können trüb und gelblich bis bernsteinfarben sein. Nach der Trypsinisierung von Zellen in 1 ml Trypsininhibitorlösung zu 1 mg/ml für jeden ml Trypsinlösung für die Dissoziation erneut suspendieren. Die Zellsuspension sollte anschließend bei 1.000 U/min zentrifugiert werden, um ein Zellpellet zu bilden.

Lösungen können eine Aktivität behalten, wenn sie kurzzeitig bei 2–8 °C gelagert werden. Lösungen sind in gefrorenen Aliquoten bei -20 °C stabil.

Other Notes

For the inhibition of proteolytic activity[1][2]; Use in affinity chromatography for the purification of trypsin; Prepared by the method of M. Kunitz[3]
1 U entspricht der Inhibitormenge, welche die Trypsinaktivität um 1 BAEE-U reduziert. (1 BAEE-U ist die Enzymmenge, die bei 253 nm eine Extinktionszunahme von 0.001 pro Minute bei pH 7.6 und 25°C bewirkt; BAEE, Fluka®-Nr. 12880, als Substrat)
Eine Trypsineinheit = A253 von 0,001 je Minute mit N-Alpha-benzoyl-L-argininethylester (BAEE) als Substrat bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C.

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Quality Level

100

Quality Level

300

Quality Level

300

Quality Level

400

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

form

powder

form

lyophilized powder

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−20°C

storage temp.

2-8°C

storage temp.

2-8°C

storage temp.

2-8°C

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wet ice

shipped in

-

shipped in

ambient

shipped in

wet ice

solubility

0.1 M phosphate pH 7.6: 5 mg/mL, clear, colorless to almost colorless

solubility

H2O: >10 mg/mL, phosphate buffer: >10 mg/mL (hazy above 10 mg/ml), soluble

solubility

balanced salt solution: 1 mg/mL, serum-free medium: soluble

solubility

0.067 M sodium phosphate buffer, pH 7.6: 1 mg/mL, clear, colorless to very faintly yellow


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Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. What is the molecular weight and amino acid sequence of trypsin inhibitor from Glycine max (soybean)?

    1 answer
    1. Soybean trypsin inhibitor is a mixture of the three types. We have not characterized our trypsin inhibitor products in terms of how much of each of the three types may be present. All three have a molecular weight of between 20,000 and 20,200 daltons, so one might use 20,100 daltons as an average.The three types vary in the amino acids at a few positions. The detailed summary of the three types (or variants) was published in the following linked reference:     J. Biochem. (Japan), 98, 435-448 (1985).Note that the authors use Tia, Tib and Tic to indicate the three variants.

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