T6522

Trypsin-Inhibitor aus Glycine max (soybean)

powder, BioReagent, suitable for cell culture

• Synonym(e): Hageman Faktor-Inhibitor, Popkorn-Inhibitor, SBTI
• CAS-Nummer: 9035-81-8
• EG-Nummer: 232-906-9
• MDL-Nummer: MFCD00082103
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.75

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Glycine max (soybean)
• Typ: Type I-S
• Produktlinie: BioReagent
• Form: powder
• Spezifische Aktivität: (One mg will inhibit 1.0-3.0 mg of trypsin with activity of approx. 10,000 BAEE units per mg protein.)
• Mol-Gew.: 20.1 kDa
• Konzentration: 10 mg/mL
• Methode(n): cell culture | mammalian: suitable
• Löslichkeit: balanced salt solution: 1 mg/mL; serum-free medium: soluble
• Versandbedingung: ambient
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Anwendung

Dieses Produkt wurde für Zellkulturanwendungen geprüft. Trypsin wurde in einer Studie zur Beurteilung der potenziellen Anwendung einer alkalischen Protease aus einem nicht toxigenen Mangrovenisolat von Vibri sp. V26 in Tierzellkulturen eingesetzt. Trypsin wurde außerdem in einer Studie zur Verbesserung des Nachweises von Pilzen in eosinophilem Mucin eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Dieser Inhibitor wirkt gegen Trypsin und in geringerem Maß auch gegen Chymotrypsin und Plasmin. Er hemmt auch Proteasen mit ähnlichen Mechanismen wie Trypsin, Plasmakallikrein und Gerinnungsfaktor X. Der Trypsininhibitor wirkt nicht gegen Metallproteasen, gewebebasiertes Kallikrein, Säureproteasen oder Thioproteasen. Dieser Inhibitor wirkt, indem er einen 1:1-stöchiometrischen Komplex mit der proteaseaktiven Stelle bildet und anschließend eine einzelne Arginin-Isoleucin-Bindung an dem Inhibitor spaltet. Die Hemmung ist sowohl reversibel als auch pH-Wert-abhängig.

Komponenten

Der Sojabohnentrypsininhibitor ist ein monomeres Protein, das 181 Aminosäurenreste in einer einzelnen Polypeptidkette, die mit zwei Disulfidbrücken vernetzt ist, enthält.

Einheitendefinition

Eine Trypsin-Einheit erzeugt ein ΔA₂₅₃ von 0,001 je Minute mit BAEE als Substrat bei einem pH-Wert von 7,6 bei 25 °C; Reaktionsvolumen 3,2 ml, 1 cm Lichtweg.

Eine Trypsineinheit = A₂₅₃ von 0,001 je Minute mit N-Alpha-benzoyl-L-argininethylester (BAEE) als Substrat bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C.

Angaben zur Herstellung

Der Trypsininhibitor ist zu 10 mg/ml in Wasser und Phosphatpuffern löslich. Er ist in Balanced Salt Solutions zu 1 mg/ml und in serumfreien Medien löslich. Konzentrierte Lösungen von mehr als 10 mg/ml können trüb und gelblich bis bernsteinfarben sein. Nach der Trypsinisierung von Zellen in 1 ml Trypsininhibitorlösung zu 1 mg/ml für jeden ml Trypsinlösung für die Dissoziation erneut suspendieren. Die Zellsuspension sollte anschließend bei 1.000 U/min zentrifugiert werden, um ein Zellpellet zu bilden.

Lösungen können eine Aktivität behalten, wenn sie kurzzeitig bei 2–8 °C gelagert werden. Lösungen sind in gefrorenen Aliquoten bei -20 °C stabil.

Hinweis zur Analyse

Ein mg Trypsininhibitor hemmt 1,0 bis 3,0 mg Trypsin mit einer Aktivität von ~10.000 BAEE-Einheiten je mg Protein.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H317,H334
• P-Sätze: P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313
• Gefahreneinstufungen: Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)