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SCT120

BioTracker 488 Kernfarbstoff, grün

Live cell imaging green nuclear staining dye with greater photostability than traditional blue fluorescent nuclear stains such as DAPI and Hoechst 33342.

BioTracker 488 Green Nuclear Dye

Synonym(e):

Live cell imaging probe, Live cell nuclear imaging probe

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Über diesen Artikel

NACRES:
NA.47
UNSPSC Code:
12352207
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technique(s)

cell based assay: suitable

detection method

fluorometric

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ambient

storage temp.

2-8°C

General description

Der Kern ist eine von einer Membran umschlossene Organelle, die in eukaryotischen Zellen vorkommt. Die Zellkerne enthalten einen Großteil des genetischen Materials der Zelle, das in Form von mehreren langen linearen DNA-Molekülen in einem Komplex mit einer Vielzahl von Proteinen wie Histonen angeordnet ist, um Chromosomen zu bilden. Traditionell wurden DNA-Färbungen wie DAPI und Hoechst für die Mikroskopie verwendet, für die jedoch eine Fixierung erforderlich ist und die für die Bildgebung von lebenden Zellen nicht verwendet werden können.

BioTracker 488 Kernfarbstoff, grün, ist ein Zellmembranen-undurchlässiger, grün fluoreszierender DNA-Farbstoff für die spezifische Färbung von Kernen in lebenden oder fixierten Zellen. Er weist eine hervorragende DNA-Spezifität auf, erfordert keinen Waschschritt und verfügt über eine geringe Toxizität für die Bildgebung von lebenden Zellen. Der Farbstoff wird mit einem Fläschchen Verapamil, einem Effluxpumpen-Inhibitor, der die Sondenretention und die Färbung von lebenden Zellen in bestimmten Zelltypen optimieren kann, geliefert.

Hinweis: BioTracker Kernfarbstoffe sind im DAPI-Kanal auch blau fluoreszierend, weshalb sie für die Bildgebung mit mehreren Farben und blauen Sonden möglicherweise nicht geeignet sind.

Spektrale Eigenschaften
Extinktion: 500 nm
Emission: 515 nm

Application

Fluoreszenzbildgebung lebender Zellen
Forschungskategorie
Zellbildgebung
Forschungsunterkategorie
Farbstoff für lebende Zellen
Grüner Kernfarbstoff für die Bildgebung von lebenden Zellen, der eine höhere Photostabilität aufweist als traditionelle blau fluoreszierende Kernfabstoffe wie DAPI und Hoechst 33342.

Physical form

Flüssig

Preparation Note

BioTracker 488 Kernfarbstoff, grün, bei 2–8 ºC aufbewahren. Vor Licht schützen.
Hinweis: Das Fläschchen kurz zentrifugieren, damit sich der Inhalt vor dem Öffnen am Fläschchenboden sammelt.

Analysis Note

Spektrale Eigenschaften
Extinktion: 500 nm
Emission: 515 nm

Other Notes

1) 1 Fläschchen mit 50 µl BioTracker 488 Kernfarbstoff, grün (1000X in DMSO) (CS224594)

2) 1 Fläschchen mit 100 µl Verapamil HCL (100 mM in DMSO) (CS224592)

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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storage temp.

2-8°C

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-10 to -25°C

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2-8°C

storage temp.

2-8°C

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ambient

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ambient

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detection method

fluorometric

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fluorometric

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fluorometric

detection method

fluorometric


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Exclamation markEnvironment

signalword

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Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2

Lagerklasse

10 - Combustible liquids



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Questions

1–8 of 8 Questions  
  1. Could the BioTracker 488 Green Nuclear Dye SCT120 prevent mitosis in 2D in vitro cultures?

    1 answer
    1. This product will not prevent mitosis. However, if verapamil is used during the experiment (included in the kit to help with probe retention), it can inhibit mitosis in a dose-dependent manner.

      Helpful?

  2. Does the fluorescence intensity increase by chromosome condensation similarly to DAPI or Hoechst?

    1 answer
    1. This product has not been tested for an increase in fluorescence intensity with chromosome condensation.

      Helpful?

  3. Is there any toxicity data available for extended (>48h) live cell staining?

    1 answer
    1. The dye with verapamil showed no obvious toxicity in MCF-7 cells over the course of 72 hours. It may be different for different cell lines and different experimental conditions.

      Helpful?

  4. How can I optimize staining using SCT120?

    1 answer
    1. The recommended protocol for using SCT120 is as follows:

      1. Dilute the BioTracker™ Nuclear Dye from its 1000X stock solution to a working concentration of 1X in cell culture medium. To achieve this, one could add 1 µL of dye to 1 mL of culture medium. It is important to note that the optimal concentration of the probe may vary depending on the cell type. Optionally, verapamil can be included in the staining solution to enhance probe retention in live cells. The ideal concentration of verapamil will likely be different across cell types, and it is suggested to test concentrations ranging from 10-100 µM.

      2. Discard the culture medium from the cells and replace it with the diluted BioTracker™ Nuclear Dye solution. Incubate the cells at 37°C for a minimum of 10 minutes.

      To optimize staining, consider the following adjustments:

      • Probe Dilution: Although the standard dilution is 1:1000, experimenting with other dilutions such as 1:500 or 1:750 could be beneficial. Observe the results and, if necessary, test additional dilutions to find the most effective concentration.

      • Verapamil Concentration: The suggested range for verapamil is between 10 to 100 µM. Trial with two or three different dilutions within this spectrum may help to refine the staining process.

      • Incubation Time: Initially, a 10-minute incubation is recommended. However, extending this period to 20, 40, or even 60 minutes at 37°C could improve staining results. If positive changes are noted, further experimentation with the duration may be warranted to optimize the staining signal.

      It is vital to only change one variable at a time during these optimizations. Altering multiple factors simultaneously, such as the dye dilution, verapamil concentration, and incubation time, would make it difficult to identify which specific change led to any observed improvements. Additionally, checking cell viability before staining is advisable. Using Trypan Blue to determine cell viability might provide insights into the overall health and suitability of the cells for staining.

      Helpful?

  5. Will SCT120, BioTracker 488 Green Nuclear Dye SCT work with the FITC channel?

    Will SCT120, BioTracker 488 Green Nuclear Dye SCT work with the FITC channel?

    1 answer
    1. Yes, for SCT120 we do recommend analyzing the cells using the FITC channel.

      Please refer to the product's data sheet, found in the DOCUMENTATION section of the Product Detail Page: https://www.sigmaaldrich.com/product/mm/sct120#product-documentation

      Helpful?

  6. Is it possible to use SCT120 BioTracker 488 Green Nuclear Dye and PKH26 Red Fluorescent Cell Linker for in vivo applications, and what is their stability duration?

    1 answer
    1. The PKH series of dyes are designed for membrane labeling and can be used to track cells through several divisions. The intensity of the dye decreases by half with each cell division, so the duration of visibility will depend on the cell division rate of the specific cell type.

      Regarding SCT120 nuclear dye, there is limited information about the viability of cells after staining or the photostability of the dye once the cells have been stained.

      Currently, there is no available information on the compatibility or effects of using SCT120 in conjunction with PKH26GL for dual staining of cells.

      Helpful?

  7. Could you please provide the chemical structure and formula for BIOTRACKER 488 GREEN NUCLEAR DYE, if available?

    1 answer
    1. This information is considered proprietary.

      Helpful?

  8. Hi I was wondering if this stain would work in a 100% alcoholic liquid, or whether it requires protons to fluoresce?

    1 answer
    1. The dye has not been validated for DNA binding under 100% alcoholic liquid. It does not require protons to fluoresce.

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Reviews

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  1. Lewiston, ME
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    Great!

    Works perfectly for my application with accurate results.

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