GF003AF

Fibroblast Growth Factor basic, human

Animal free, >95% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, suitable for cell culture

• Synonym(e): FGF-2, bFGF, basic-FGF, Heparin-Binding Growth Factor 2, Prostatropin
• UNSPSC Code: 12352202
• eCl@ss: 32160405
• NACRES: NA.75
• Biological source: human
• Assay: >95% (SDS-PAGE)
• Impurities: <0.1 EU/μg Endotoxin (of bFGF)

Eigenschaften

• Produktname: Basischer Fibroblasten-Wachstumsfaktor, human rekombinant, ohne tierische Bestandteile, The Fibroblast Growth Factor-basic (or bFGF protein) is a heparin binding growth factor which stimulates the proliferation of a wide variety of cells including mesenchymal, neuroectodermal & endothelial cells.
• biological source: human
• Quality Segment: 100
• assay: >95% (SDS-PAGE)
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): cell culture | stem cell: suitable
• impurities: <0.1 EU/μg Endotoxin (of bFGF)
• input: sample type epithelial cells; sample type mesenchymal stem cell(s); sample type: human embryonic stem cell(s); sample type neural stem cell(s); sample type pancreatic stem cell(s)
• NCBI accession no.: NM_002006.4
• UniProt accession no.: P09038

Beschreibung

General description

Der basische Fibroblasten-Wachstumsfaktor (basic Fibroblast Growth Factor, bFGF) ist ein heparinbindender Wachstumsfaktor, der die Proliferation einer Vielzahl von Zellen, einschließlich mesenchymaler, neuroektodermaler und Endothelzellen, stimuliert. bFGF hat auch eine stark angiogenetische Wirkung in vivo. Der humane bFGF ist ein 17,2-kDa-Protein, das 155 Aminosäurenreste enthält. Xu, et al. haben gezeigt, dass bFGF synergistisch mit dem BMP-Antagonisten Noggin wirkt, um eine undifferenzierte Proliferation humaner embryonaler Stammzellen (hES) unter Feeder-freien Bedingungen zu erhalten. GF003AF wurde ohne tierische Bestandteile entwickelt und kann zur Kultivierung von hES-Zellen in einem Feeder-freien Kultivierungssystem ohne tierische Bestandteile verwendet werden.

Produktquelle: in E. coli exprimiert

Application

In den meisten In-vitro-Anwendungen entfaltet bFGF seine biologische Aktivität bei Konzentrationen im Bereich von 0,1–10,0 ng/mL. Responderzellen sind unter anderem: Endotheliale, mesenchymale Zellen. Humane ES-Zellen benötigen Konzentrationen im Bereich von 4–100 ng/mL je nach Kultivierungsmethode.

Physical form

Lyophilisiert aus einer Lösung von 5 mM Tris, pH-Wert 7,6 mit 150 mM NaCl.

Preparation Note

Das lyophilisierte Material kann bei -20 °C bis zum auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum aufbewahrt werden.

Allgemeine Anwendungen:
Nach einer kurzen Zentrifugation in 0,1 M Phosphatpuffer mit pH 6,8, auf eine Konzentration von 0,1–1,0 mg/mL rekonstituieren. Der rekonstituierte bFGF sollte in Arbeitsaliquoten bei -20 °C bis zu 6 Monate gelagert werden. Mehrere Gefrier-/Auftauzyklen haben eine signifikante Aktivitätsminderung zur Folge.

Für humane ES-Zellkulturen:
Nach einer kurzen Zentrifugation in einer filtrierten Lösung von 0,5 % BSA, 1 mM DTT und 10 % Glycerin in Dulbeccos PBS auf 10 μg/mL rekonstituieren. In Aliquote aufteilen und bei -20 °C bis zu 6 Monate aufbewahren. Diese Lösung kann anschließend aufgetaut und für die Kultivierung humaner ES-Zellen mit einer Feeder-Schicht auf 4 ng/mL oder als Zusatz zu mit Mausembryonen-Fibroblasten konditionierten Medien (für eine Feeder-freie Kultivierung humaner ES-Zellen) verdünnt werden.

Analysis Note

Spezifische Aktivität: Humaner bFGF ist verglichen mit Standards biologisch voll aktiv. Die ED₅₀ wurde durch eine dosisabhängige Stimulierung der Thymidinaufnahme von FGF-Rezeptoren exprimierenden NIH3T3- Zellen bestimmt.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3