D4184

JumpStart^™ Taq-DNA-Polymerase

without MgCl₂

• Synonym(e): hot start DNA polymerase, hot start PCR
• MDL-Nummer: MFCD00166026
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 300
• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 1500 reactions; sufficient for 250 reactions; sufficient for 50 reactions
• Leistungsmerkmale: dNTPs included: no; hotstart
• Konzentration: 2.5 units/μL
• Methode(n): PCR: suitable
• Farbe: colorless
• Aufnahme: purified DNA
• Eignung: suitable for PCR
• Anwendung(en): agriculture
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die Taq-DNA-Polymeraseaktivität wird durch das Kombinieren des Enzyms mit dem JumpStart^™ Taq-Antikörper, einem neutralisieren monoklonalen Antikörper für Taq-DNA-Polymerase, inaktiviert. Die Antikörper-Inaktivierung bietet eine einfache und wirksame Methode für Hot-Start-Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Hot-Start-PCR kann die Ergebnisse der DNA-Amplifikation signifikant verbessern, indem die Erzeugung von nichtspezifischen Amplifikationsprodukten und Primer-Dimer-Artefakten verringert wird. Bei der Verwendung in PCR ist die JumpStart Taq-DNA-Polymerase bei geringer Temperatur (Raumtemperatur) inaktiv. Wenn die Temperatur im ersten Denaturierungsschritt des Zyklusverfahrens auf über 70 °C erhöht wird, dissoziiert der Komplex und die Polymerase wird voll aktiv.

Anwendung

Die JumpStart^™ Taq-DNA-Polymerase wird wie folgtverwendet:

• Bei der PCR-Amplifikation von aus Herbariumproben isolierter DNA.
• In der PCR-Reaktionsmischung für die Randomly Amplified Polymorphic DNA-Polymerasekettenreaktion (RAPD PCR).
• Zur Amplifikation und zum Nachweis einer Punktmutation im EGFR-Exon 19 unter Verwendung spezifischer Krebszelllinien
• In der quantitativen Echtzeit-PCR
• PCR-Amplifikation von komplexen genomischen oder cDNA-Matrizen
• PCR-Amplifikation von Zielen mit sehr geringer Kopienzahl
• PCR-Amplifikation mit vielen thermischen Zyklen (>35) und mehreren Primer-Paaren im selben Reaktionsröhrchen

• Für PCR-Amplifikationen, die eine reduzierte unspezifische Amplifikation erfordern
• Für Multiplex-PCR
• Für die Reduzierung von Primer-Dimeren

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Reduziert unspezifische Amplifikation
• Erhöht PCR-Spezifität und Ausbeute
• Reduziert die Vorbereitungszeit, die mit manuellen Methoden oder Heißstart-Methoden mit Wachs verbunden ist
• Aktivierungszeit von weniger als 1 Minute

Verpackung

JumpStart Taq DNA-Polymerase wird mit einem 10× Reaktionspuffer angeboten, der mit und ohne MgCl_{2 erhältlich ist.} Zum magnesiumfreien 10× Puffer gehört auch ein separates Fläschchen mit 25 mM MgCl₂ für die Optimierung.

Mit 10× Reaktionspuffer ohne MgCl₂. Separates Röhrchen mit 25 mM MgCl_{2 im Lieferumfang enthalten.}

Sonstige Hinweise

JumpStart Taq DNA-Polymerase von Sigma ist ein Antikörper-inaktiviertes Heißstartenzym, das zur Minimierung unspezifischer Amplifikation und gleichzeitig zur Erhöhung der Target-Ausbeute dient. Wenn die Reaktionstemperatur 70°C erreicht, wird die Aktivität der Taq DNA-Polymerase wiederhergestellt und die daraus resultierende PCR zeigt eine höhere Spezifität und Ausbeute. Dieser Antikörper-Enzym-Komplex ermöglicht ein einfaches und bequemes Einrichten mit einem geringeren Kontaminationsrisiko als bei manuellen Heißstarttechniken. Das Enzym kann auch in der Master-Mischung enthalten sein, was zu höherer Beständigkeit von einer Reaktion zur anderen führt.

Genauere Informationen über JumpStart Taq Enzyme finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/hotstart.

Einheitendefinition

Eine Einheit baut innerhalb von 30 Minuten bei 74 °C 10 nmol Gesamt-dNTPs in säurefällbare DNA ein.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt einem oder mehreren der folgenden US-Patente und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA: US 8,404,464 und US 7,972,828. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen.

Antikörper lizenziert für In-vitro-Forschung im Rahmen der US- Patente Nr. 5,338,671 und 5,587,287 und der entsprechenden Patente in anderen Ländern.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable