C5896

Cholinoxidase aus Alcaligenes sp.

lyophilized powder, ≥10 units/mg solid

• Synonym(e): Choline: oxygen 1-oxidoreductase
• CAS-Nummer: 9028-67-5
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-840-0
• MDL number: MFCD00130787
• EG-Nummer: 1.1.3.17 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥10 units/mg solid

Eigenschaften

• form: lyophilized powder
• Quality Segment: 200
• specific activity: ≥10 units/mg solid
• mol wt: ~95 kDa
• technique(s): cell based assay: suitable
• suitability: suitable for assay of choline, suitable for molecular biology
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Isoelektrischer Punkt:4,1 ± 0,1
Michaelis-Konstanten:2,84 x 10¯³M (Cholin), 5,33 x 10¯³M (Betainaldehyd)
Struktur:Ein Mol FAD wird kovalent an ein Mol des Enzyms gebunden
Inhibitoren:p-Chlorquecksilberbenzoat, Cu⁺⁺, Co⁺⁺, Hg⁺⁺, Ag⁺
Optimaler pH:8,0 – 8,5
Optimale Temperatur:40 – 45 °C
pH-Stabilität:pH 7,0 – 9,0 (30 °C, 2 h)
Wärmestabilität: Unter 37 °C (pH 7,5, 10 min)

Application

Cholinoxidase von Alcaligenes sp. wird wie folgt eingesetzt:

• in einer Studie zur Untersuchung eines Cholin-Biosensors mit einer Chitinmembran und seiner Anwendung zur Messung von cholinesterase-hemmenden Aktivitäten
• Verwendung in spektroskopischen Untersuchungen zur Photoreaktion von Cholinoxidase mit kovalent gebundenem Flavin
• als Komponente einer phosphatgepufferten Kochsalzlösung (PBS) zur Messung der Cholin-Acetyltransferase(ChAT)-Aktivität in Hirngewebehomogenaten[1]
• Messung des Cholins, welches mittels ATX-Aktivitätsassay[2][3] von Autotaxin (ATX) und mittels PLD-Aktivitäts-Assay von Phospholipase-D (PLD) erzeugt wird[4]

Biochem/physiol Actions

Cholinoxidase katalysiert die Vier-Elektronenoxidation von Cholin zu Glycinbetain, wobei Betainaldehyd als der intermediäre und molekularer Sauerstoff als der primäre Elektronenakzeptor fungiert. Das Enzym kann außerdem Betainaldehyd als ein Substrat akzeptieren. Dies ermöglicht die Untersuchung des Reaktionsmechanismus für die Umwandlung von Cholin in das intermediäre Aldehyd & von Betain-Aldehyd in Glycinbetain.[5] Das Enzym ist ein Flavoprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 72.000 Da (Gelfiltration) oder 66.000 Da (SDS-Gelelektrophorese).[6]

Other Notes

Eine Einheit bildet 1 μMol H₂O₂ unter Oxidation von 1 μMol Cholin zu Betainaldehyd pro Minute bei pH 8,0 und 37 °C. Hinweis: Bei der Umwandlung von Cholin zu Betain durch Cholinoxidase werden 2 μMole H₂O₂ für jedes μMol Cholin gebildet.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)