This product is not assigned an expiration or retest date. This type of product includes a warranty period of 1 year from the date of shipment, provided that the components are stored and handled properly. Please see the link below to review additional information available in the product datasheet:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/415/176/s7150-man-ver-10-0.pdf
S7150
OxyBlot Proteinoxidations-Nachweiskit
The OxyBlot Protein Oxidation Detection Kit provides the reagents to perform the immunoblot detection of carbonyl groups introduced into proteins by oxidative reactions with ozone or oxides of nitrogen or by metal catalyzed oxidation.
Synonym(e):
OxyBlot-Assay, Proteinoxidationskit
Anmelden zur Ansicht der Organisations- und Vertragspreise.
Größe auswählen
Ansicht ändern
| Packungsgröße | SKU | Verfügbarkeit | Preis |
|---|
Über diesen Artikel
UNSPSC Code:
12161503
NACRES:
NA.84
eCl@ss:
32161000
Preise und Verfügbarkeit sind derzeit nicht verfügbar.
Technischer Dienst
Benötigen Sie Hilfe? Unser Team von erfahrenen Wissenschaftlern ist für Sie da.
Unterstützung erhaltenQuality Level
manufacturer/tradename
Chemicon®, OxyBlot
technique(s)
western blot: suitable
detection method
chemiluminescent
shipped in
wet ice
General description
Die oxidative Modifikation von Proteinen durch freie Sauerstoffradikale und andere reaktive Spezies tritt in physiologischen und pathologischen Vorgängen auf. Als Folge der Modifikation werden Carbonylgruppen durch einen stellenspezifischen Mechanismus in Proteinseitenketten eingebracht. Das OxyBlot-Kit stellt Reagenzien für eine einfache und empfindliche Immundetektion dieser Carbonylgruppen bereit, was ein Merkmal des Oxidationszustands von Proteinen ist.
Application
Aufbereitung von Zelllysat
1. Waschen Sie anhaftende Zellen zweimal in der Schale oder dem Kolben mit eiskaltem PBS und lassen Sie das PBS abfließen. Waschen Sie nicht anhaftende Zellen in PBS und zentrifugieren Sie bei 800 bis 1.000 U/min in einer Tischzentrifuge 5 Minuten, um die Zellen zu pelletieren.
2. Geben Sie eiskalten RIPA-Puffer zu den Zellen (1 ml je 107 Zellen/100-mm-Schale/150-cm²-Kolben; 0,5 ml je 5 x 106 Zellen/60-mm-Schale/75-cm²-Kolben).
3. Schaben Sie anhaftende Zellen entweder mit einem Gummiwischer oder Kunststoff-Zellschaber, der in eiskaltem destillierten Wasser gekühlt wurde, von der Schale oder dem Kolben ab. Geben Sie die Zellsuspension in ein Zentrifugenröhrchen. Schütteln Sie die Suspension vorsichtig entweder auf einem Wippschüttler oder Kreisschüttler 15 Minuten lang in einem kalten Raum, um Zellen zu lysieren.
4. Zentrifugieren Sie das Lysat bei 14.000 x g in einer vorgekühlten Zentrifuge 15 Minuten lang. Geben Sie den Überstand sofort in ein frisches Zentrifugenröhrchen und entsorgen Sie den Rückstand.
5. Verdünnen Sie das Zelllysat mindestens 1:10, bevor Sie die Proteinkonzentration bestimmen, aufgrund der Überlagerung des Detergens im Lysepuffer mit dem Reagens auf Coomassie-Basis. In diesem Schritt kann die Probe in Aliquote unterteilt und bei -20 ¡C bis zu einen Monat aufbewahrt werden.
HINWEIS: Wenn Sie mit großen Volumina von nicht anhaftenden Zellen arbeiten, könnten die Zellen nicht schnell genug gekühlt werden, um die Aktivität des zu untersuchenden Proteins zu erhalten. Schütten Sie die Zellsuspension in diesem Fall in eine Mischung einer gleichen Masse aus 2 x PBS und Eis. Sammeln Sie die Zellen anschließend mittels Zentrifugieren und führen Sie die Lyse wie vorstehend beschrieben durch.
RIPA-Lysepuffer:
Katalognummer 20-188
http://www.millipore.com/catalogue/item/20-188
Reduktionsmittel ist sehr wichtig, um eine Oxidation zu verhindern:
Das Proteinlysat kann durch eine Reihe an Protokollen hergestellt werden. Die meisten Standardpuffer wie RIPA und Triton eignen sich auch. Es empfiehlt sich, ein Reduktionsmittel zum Lysepuffer zu geben, um die Oxidation von Proteinen, die nach der Zelllyse auftreten kann, zu verhindern. Lysepuffer, der entweder 1 bis 2 % 2-Mercaptoethanol oder 50 mM DTT enthält, hemmt diese Oxidation ausreichend, weist aber keine nachteilige Wirkung auf die Derivatisierungsreaktion im OxyBlot Protokoll auf. Aufgereinigte Proteinproben eignen sich auch für die Analyse mit dem OxyBlot Kit.
Für allgemeine Informationen zur Proteinextraktion sehen Sie sich bitte folgenden Link an:
http://www.millipore.com/immunodetection/id3/proteinextraction
1. Waschen Sie anhaftende Zellen zweimal in der Schale oder dem Kolben mit eiskaltem PBS und lassen Sie das PBS abfließen. Waschen Sie nicht anhaftende Zellen in PBS und zentrifugieren Sie bei 800 bis 1.000 U/min in einer Tischzentrifuge 5 Minuten, um die Zellen zu pelletieren.
2. Geben Sie eiskalten RIPA-Puffer zu den Zellen (1 ml je 107 Zellen/100-mm-Schale/150-cm²-Kolben; 0,5 ml je 5 x 106 Zellen/60-mm-Schale/75-cm²-Kolben).
3. Schaben Sie anhaftende Zellen entweder mit einem Gummiwischer oder Kunststoff-Zellschaber, der in eiskaltem destillierten Wasser gekühlt wurde, von der Schale oder dem Kolben ab. Geben Sie die Zellsuspension in ein Zentrifugenröhrchen. Schütteln Sie die Suspension vorsichtig entweder auf einem Wippschüttler oder Kreisschüttler 15 Minuten lang in einem kalten Raum, um Zellen zu lysieren.
4. Zentrifugieren Sie das Lysat bei 14.000 x g in einer vorgekühlten Zentrifuge 15 Minuten lang. Geben Sie den Überstand sofort in ein frisches Zentrifugenröhrchen und entsorgen Sie den Rückstand.
5. Verdünnen Sie das Zelllysat mindestens 1:10, bevor Sie die Proteinkonzentration bestimmen, aufgrund der Überlagerung des Detergens im Lysepuffer mit dem Reagens auf Coomassie-Basis. In diesem Schritt kann die Probe in Aliquote unterteilt und bei -20 ¡C bis zu einen Monat aufbewahrt werden.
HINWEIS: Wenn Sie mit großen Volumina von nicht anhaftenden Zellen arbeiten, könnten die Zellen nicht schnell genug gekühlt werden, um die Aktivität des zu untersuchenden Proteins zu erhalten. Schütten Sie die Zellsuspension in diesem Fall in eine Mischung einer gleichen Masse aus 2 x PBS und Eis. Sammeln Sie die Zellen anschließend mittels Zentrifugieren und führen Sie die Lyse wie vorstehend beschrieben durch.
RIPA-Lysepuffer:
Katalognummer 20-188
http://www.millipore.com/catalogue/item/20-188
Reduktionsmittel ist sehr wichtig, um eine Oxidation zu verhindern:
Das Proteinlysat kann durch eine Reihe an Protokollen hergestellt werden. Die meisten Standardpuffer wie RIPA und Triton eignen sich auch. Es empfiehlt sich, ein Reduktionsmittel zum Lysepuffer zu geben, um die Oxidation von Proteinen, die nach der Zelllyse auftreten kann, zu verhindern. Lysepuffer, der entweder 1 bis 2 % 2-Mercaptoethanol oder 50 mM DTT enthält, hemmt diese Oxidation ausreichend, weist aber keine nachteilige Wirkung auf die Derivatisierungsreaktion im OxyBlot Protokoll auf. Aufgereinigte Proteinproben eignen sich auch für die Analyse mit dem OxyBlot Kit.
Für allgemeine Informationen zur Proteinextraktion sehen Sie sich bitte folgenden Link an:
http://www.millipore.com/immunodetection/id3/proteinextraction
Preparation Note
Lagern Sie den Proteinstandard (Komponente 90450) nach Erhalt bei -25 °C bis -15 °C. Lagern Sie alle anderen Komponenten bei 2 °C bis 8 °C.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
1 of 1
Dieser Artikel | |||
|---|---|---|---|
| technique(s) western blot: suitable | technique(s) flow cytometry: suitable | technique(s) immunohistochemistry: suitable | technique(s) flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable |
| shipped in wet ice | shipped in dry ice | shipped in - | shipped in dry ice |
| detection method chemiluminescent | detection method fluorometric | detection method colorimetric | detection method fluorometric |
| manufacturer/tradename Chemicon®, OxyBlot | manufacturer/tradename Chemicon®, MitoLight | manufacturer/tradename OxyIHC | manufacturer/tradename ApopTag, Chemicon® |
| Quality Level 100 | Quality Level 100 | Quality Level 100 | Quality Level 100 |
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Met. Corr. 1 - Skin Sens. 1
wgk
WGK 2
Lagerklasse
10 - Combustible liquids
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
Besitzen Sie dieses Produkt bereits?
In der Dokumentenbibliothek finden Sie die Dokumentation zu den Produkten, die Sie kürzlich erworben haben.
Verwandter Inhalt
"Aging: getting older, exhibiting the signs of age, the decline in the physical (and mental) well-being over time, leading to death. Since the beginning of time, man has been obsessed with trying to slow down, stop, or even reverse the signs of aging. Many have gone as far as experimenting with nutritional regimens, eccentric exercises, fantastic rituals, and naturally occurring or synthetic wonder-elements to evade the signs of normal aging. Biologically speaking, what is aging? And what does the latest research tell us about the possibility of discovering the elusive “fountain of youth”? Many advances in our understanding of aging have come from systematic scientific research, and perhaps it holds the key to immortality. Scientifically, aging can be defined as a systems-wide decline in organismal function that occurs over time. This decline occurs as a result of numerous events in the organism, and these events can be classified into nine “hallmarks” of aging, as proposed by López-Otin et al. (2013). Several of the pathologies associated with aging are a direct result of these events going to extremes and may also involve aberrant activation of proliferation signals or hyperactivity. The hallmarks of aging have been defined based on their fulfillment of specific aging related criteria, such as manifestation during normal aging, acceleration of aging if experimentally induced or aggravated, and retardation of aging if prevented or blocked, resulting in increased lifespan. The nine hallmarks of aging are genomic instability, telomere attrition, epigenetic alterations, loss of proteostasis, deregulated nutrient sensing, mitochondrial dysfunction, cellular senescence, stem cell exhaustion, and altered intercellular communication. The biological processes underlying aging are complex. By understanding the hallmarks in greater detail, we can get closer to developing intervention strategies that can make the aging process less of a decline, and more of a recline."
OxyBlot Protein Oxidation Detection Kit
Ketone bodies stimulate chaperone-mediated autophagy.
Finn, Patrick F and Dice, J Fred
The Journal of Biological Chemistry, 280, 25864-25870 (2005)
David Bernhard et al.
FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 19(9), 1096-1107 (2005-06-30)
Smoking is a significant risk factor for development of atherosclerosis. However, the pathophysiology of smoking-mediated vessel wall damage is not understood. With tools ranging from analytical chemistry to cell biology, we show that cigarette smoke contains metals that catalyze the
A transient antioxidant stress response accompanies the onset of disuse atrophy in human skeletal muscle.
Dalla Libera, Luciano, et al.
Journal of Applied Physiology, 107, 549-557 (2009)
Global Trade Item Number
| SKU | GTIN |
|---|---|
| S7150 | 08436037122958 |
-
유통기한이 어느정도일까요?
1 answer-
Helpful?
-