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ChIPAb+-Acetyl-Histon H3 (Lys27) - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

clone CMA309, from mouse

• Synonym(e): H3K27Ac, Histone H3 (acetyl K27), Histone H3K27Ac
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.32
• eCl@ss: 32160702
• Clone: CMA309, monoclonal
• Species reactivity: vertebrates, human
• Application: ChIP, IP, WB
• Citations: 26

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• clone: CMA309, monoclonal
• species reactivity: vertebrates, human
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: P84243, Q66I33
• shipped in: dry ice

Beschreibung

General description

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-Acetyl-Histon-H3(Lys27)-Set enthält den Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys27)-Antikörper, einen Negativkontrolle-Antikörper (aufgereinigtes Maus-IgG) und qPCR-Primer, die eine 178-bp-Region innerhalb des Promotors des humanen RPL10-Gens amplifizieren. Das Acetyl-Histon H3 (Lys27) und die Negativkontrolle-Antikörper werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von Acetyl-Histon-H3(Lys27)-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Der zuvor zugewiesene Protein-Identifikator Q66I33 wurde mit P84243 zusammengefasst. Die vollständigen Details finden Sie in der UniProt-Datenbank.

Die Lysin-Acetylierung ist eine dynamische, reversible und streng regulierte Protein- und Histon-Modifikation, die eine wichtige Rolle bei der Chromatin-Remodellierung und der Regulation der Genexpression in verschiedenen Zellfunktionen spielt. Die Histon-Acetylierung steht oft mit der Transkriptionsaktivierung in Verbindung und die Acetylierung von H3K27 kommt in aktiven Verstärkern vor.

~ 17 kDa

Immunogen

Der aufgereinigte Acetyl-Histon-H3(Lys27)-Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid (an Lys27 acetyliert), das den Aminosäuren 19–37 von Histon H3 entspricht, entwickelt.

Epitop: A.S. 19–37

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10⁶ Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Maus-IgG oder Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys27)-Antikörper und dem Magna ChIP G (Katalognr. 17-611) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Acetyl-Histon H3 (Lys27) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit β-Globin-Promotor-ChIP-Primern gegenüber RPL10-Promotor-Primern verifiziert (siehe Abbildungen). Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna G ChIP (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

Western-Blot-Analyse:
Säureextrakte aus unbehandelten (Bahn 1) und mit Natriumbutyrat behandelten (Bahn 2) HeLa-Zellen wurden durch Elektrophorese aufgelöst, auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys27), Klon CMA309 (0,1 μg/ml) untersucht. Die Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten
Anti-Maus-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert (siehe Abbildungen).

Durch ChIP validiertes Acetyl-Histon-H3(Lys27)-Antikörper- und Primer-Set, einschließlich Antikörper in ChIP-Qualität und spezifische PCR-Kontrollprimer für die Chromatin-Immunpräzipitation von H3K27Ac.

Forschungs-Unterkategorie
Chromatin-Biologie

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Biochem/physiol Actions

Die Peptidsequenz ist bei einem breiten Spektrum von Tier- und Pflanzenspezies identisch.

Erkennt Histon H3, Molekülmasse 17 kDa, an Lys27 acetyliert.

Packaging

25 Assays je Kit, ~2 μg je Chromatin-Immunpräzipitation

Physical form

Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys27) (monoklonales Maus-IgG1, Klon CMA309). Ein Fläschchen mit 50 μg mit Protein G aufgereinigtem Antikörper in 50 μl PBS mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.

Normales Maus-IgG. Zwei Fläschchen mit 25 μg aufgereinigtem Maus-IgG in 25 μl Lagerpuffer mit 0,1 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.

ChIP-Primer, RPL10-Promotor. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für die Promotor-Region von humanem RPL10. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
REV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG

Format: Aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Nach dem Auftauen aliquotieren, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10⁶ Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Maus-IgG oder Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys27)-Antikörper und dem Magna ChIP G (Katalognr. 17-611) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Acetyl-Histon H3 (Lys27) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern für den RPL10-Promotor verifiziert (siehe Abbildungen).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna G ChIP (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

Kontrolle
Einschließlich Maus-IgG-Antikörper als Negativkontrolle und für den humanen RPL10-Promotor spezifische Kontrollprimer.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 2