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ChIPAb+-JHDM1B-Antikörper

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonym(e): JMJD, Lysine (K)-specific demethylase 2B, F-box protein FBL10, [Histone-H3]-lysine-36 demethylase 1B, JEMMA (Jumonji domain, EMSY-interactor, methyltransferase motif) protein, F-box and leucine-rich repeat protein 10, Protein containing CXXC domain 2, Ju
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.32
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: horse, mouse, pig, human
• Application: ChIP, DB, WB
• Citations: 8

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: horse, mouse, pig, human
• species reactivity (predicted by homology): porcine (based on 100% sequence homology), equine (based on 100% sequence homology), chimpanzee (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology), rabbit (based on 100% sequence homology)
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, dot blot: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_115979
• UniProt accession no.: Q8NHM5
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... KDM2B(84678)

Beschreibung

General description

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-JHDM1B-Set enthält den JHDM1B-Antikörper, ein normales Kaninchen-IgG und Kontrollprimer, die eine 110-bp-Region des ChIP-Primers, humanes β-Globin amplifizieren. JHDM1B und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von JHDM1B-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

JHDM1B (jumonji domain-containing histone demethylation protein 1B) und KDM2B. Aufgrund des Vorhandenseins eines F-Box-Motivs ist dieses Protein auch als F-box/LRR-Repeat-Protein 10 (FBXL 10) bekannt. Dieses Protein dient als Histon-Demethylase für Lysin 36 von Histon H3 und demethyliert bevorzugt dimethyliertes Lysin 3 mit schwacher oder keiner Aktivität für mono- und oder trimethyliertes H3-Lysin 36.

~ 165 kDa gemessen. In manchen Lysaten kann eine nichtcharakterisierte Bande bei einer geringeren Molekülmasse nachgewiesen werden.

Immunogen

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das menschlichem JHDM1B entspricht.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µl Kaninchen-IgG oder Anti-JHDM1B und dem Magna ChIP A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit JHDM1B assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanem β-Globin als positive Stelle und β-Aktin-Promotor-Primern als negative Stelle verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
HeLa-Zellkernextrakt wurde mit Anti-JHDM1B (1 μg/ml) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG-Sekundärantikörper vom Esel und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
Der Pfeil zeigt JHDM1B (~165 kDa). (Abbildung 3) In einigen Lysaten tritt bei ~109 kDa eine nichtcharakterisierte Bande auf.
Immunzytochemische Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
Konfokale Fluoreszenzanalyse von NIH/3T3- und HeLa-Zellen mit Anti-JHDM1B (rot). Aktinfilamente wurden mit dem Alexa Fluor 488-Farbstoff Phalloidin (grün) markiert. Kernfärbung mit DAPI (blau). Dieser Antikörper färbt den Zellkern positiv. (Abbildung 4)

Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-JHDM1B-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.

Forschungs-Unterkategorie
Histone

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Packaging

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: 1,4 μg (2 μl) Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Physical form

Affinitätsgereinigt

Komponenten:
Anti-JHDM1B (Kaninchen, polyklonal). Ein Fläschchen mit 50 µl aufgereinigtem polyklonalem Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl und 0,05 % Natriumazid vor der Zugabe von Glycerin zu 30 %. Bei -20 °C aufbewahren.
Konzentration: 0,7 mg/ml
Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 µg Kaninchen-IgG in 125 µl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer, humanes β-Globin. Ein Fläschchen mit 75 μl jedes Primers (5 μmol/l), spezifisch für den humanen β-Globin-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis: Ein Abfall der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µl normalem Kaninchen-IgG oder Anti-JHDM1B und dem Magna ChIP^® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von JHDM1B-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanes β-Globin verifiziert (Abbildung 1).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ ChIP (Katalognr. 17-371).

Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchen-IgG und für humanes β-Globin spezifische Primer.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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