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ChIPAb+ JMJD1C - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonym(e): JMJD, jumonji domain containing 1C, thyroid receptor interacting protein 8, probable JmjC domain-containing histone demethylation protein 2C, thyroid hormone receptor interactor 8, Thyroid receptor-interacting protein 8, Jumonji domain-containing protein
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: human
• Application: ChIP, ICC, WB
• Citations: 5

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• antibody form: affinity purified immunoglobulin
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): chimpanzee (based on 100% sequence homology), orangutan (based on 100% sequence homology), rhesus macaque (based on 100% sequence homology), rabbit (based on 100% sequence homology)
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_116165
• UniProt accession no.: Q15652
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... JMJD1C(221037)

Beschreibung

General description

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-JMJD1C-Set enthält den JMJD1C-Antikörper, ein normales Kaninchen-IgG und Kontrollprimer, die eine 110-bp-Region des ChIP-Primers, humanes β-Globin amplifizieren. JMJD1C und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von JMJD1C-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

JMJD1C (jumonji domain-containing protein 1C) ist auch als TRIP8 bekannt und Mutationen dieser Histondemethylase stehen mit bestimmten Formen von Autismus in Verbindung. Es wird angenommen, dass JMJD1C auch bei der Reaktivierung von Genen in embryonalen Stammzellen, Langerhans-Inseln und Magenkrebs agiert. JMJD1C wurde auch als Regulator der Genexpression impliziert. Kürzlich wurde gezeigt, dass JMJD1C und WHISTLE eine Rolle bei der Entwicklung von Mäusehoden spielen. JMJD1C wurde als Zellkernrezeptor-Co-Aktivator identifiziert und ist ein Kandidatengen für Autismus.

~284 kDa gemessen

Immunogen

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das menschlichem JMJD1C entspricht.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1,4 µg normalem Kaninchen-IgG oder Anti-JMJD1C und dem Magna ChIP^® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit JMJD1C assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanem β-Globin als positive Stelle und β-Aktin-Promotor-Primern als negative Stelle verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
HeLa-Zellkernextrakt wurde mit Anti-JMJD1C (1 μg/ml) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG-Sekundärantikörper des Esels und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem veranschaulicht.
Der Pfeil zeigt JMJD1C (~284 kDa). (Abbildung 3)
Immunzytochemische Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
Konfokale Fluoreszenzanalyse von HeLa-Zellen mit Anti-JMJD1C (rot). Aktinfilamente wurden mit dem Alexa Fluor 488-Farbstoff Phalloidin (grün) markiert. Kernfärbung mit DAPI (blau). Dieser Antikörper färbt den Zellkern positiv. (Abbildung 4)

Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-JMJD1C-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.

Forschungs-Unterkategorie
Histon-modifizierende Proteine

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Packaging

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: 1,4 µg (2 µl) Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Physical form

Affinitätsgereinigt

Anti-JMJD1C (Kaninchen, polyklonal). Ein Fläschchen mit 50 µl aufgereinigtem polyklonalem Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl und 0,05 % Natriumazid vor der Zugabe von Glycerin zu 30 %. Bei -20 °C aufbewahren.
Konzentration: 0,7 mg/ml
Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 µg Kaninchen-IgG in 125 µl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer, humanes β-Globin. Ein Fläschchen mit 75 μl jedes Primers (5 μmol/l), spezifisch für den humanen β-Globin-Promotor.
Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis: Ein Abfall der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1,4 µ g normalem Kaninchen-IgG oder Anti-JMJD1C und dem Magna ChIP^® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von JMJD1C-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanes β-Globin verifiziert (Abbildung 1).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ ChIP (Katalognr. 17-371).

Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchen-IgG und für humanes β-Globin spezifische Primer.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
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