S9684

Anti-SNAP-25 in Kaninchen hergestellte Antikörper

IgG fraction of antiserum, buffered aqueous solution

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.46
• MDL number: MFCD00675279
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: ARR, IHC (p), WB
• Citations: 58

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 200
• conjugate: unconjugated
• antibody form: IgG fraction of antiserum
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• form: buffered aqueous solution
• mol wt: antigen 25 kDa
• species reactivity: rat, mouse
• packaging: antibody small pack of 25 μL
• technique(s): immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): 1:5,000 using rat cerebellum sections, microarray: suitable, western blot: 1:10,000 using rat pheochromocytoma PC12 cell extract, western blot: 1:5,000 using mouse brain extract
• UniProt accession no.: P60879
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... SNAP25(6616) ; mouse ... Snap25(20614) ; rat ... Snap25(25012)

Beschreibung

General description

SNAP-25 (ein 25 kDa schweres Synaptosom-assoziiertes Protein) ist ein membrangebundenes Protein in präsynaptischen Nervenendigungen, das eine wesentliche Rolle bei der synaptischen Vesikelfusion und Exozytose spielt. Das SNAP-25-codierende Gen ist auf dem humanen Chromoson 20 lokalisiert.

Anti-SNAP-25 wird unter Anwendung eines synthetischen Peptids entwickelt, das dem N-Terminus von humanem SNAP-25 entspricht und an KLH als Immunogen konjugiert ist. Diese Sequenz ist identisch in den alternativ gespleißten SNAP-25-Isoformen SNAP-25A und SNAP-25B bei Maus-, Ratten- und Hühner-SNAP-25 und hoch konserviert (80-85 %) bei Goldfisch- und Zebrafisch-SNAP-25. Voll-Antiserum wird fraktioniert und anschließend durch Ionenaustauschchromatographie weiter aufgereinigt, um die Antiserum-IgG-Fraktion zu erhalten, die praktisch frei von anderen Kaninchen-Serumproteinen ist. Anti-SNAP-25 erkennt SNAP-25 (25 kD) der Maus. Der Antikörper kreuzreagiert mit SNAP-25 der Ratte. Anwendungen umfassen die Detektion und Lokalisierung von SNAP-25 (25 kDa) durch Immunblots und Immunhistochemie. Die Färbung von SNAP-25 im Immunblot wird mit SNAP-25 Immunisierungspeptid (SNAP-25, Maus) spezifisch gehemmt.

Immunogen

An KLH konjugiertes synthetisches Peptid entsprechend dem N-Terminus humaner SNAP-25 (Synaptosom-assoziiertes Protein-25) Aminosäuren.

Application

Der Anti-SNAP-25-Antikörper vom Kaninchen wurde eingesetzt:

• zum Primärnachweis von SNAP-25
• im Enzym-Immunoassay mit humanen Neuroblastom-Zelllinien
• in der Immunhistochemie
• im Western Blot mit humanen neuronalen Zellen

Biochem/physiol Actions

Das 25 kDa große, Synaptosom-assoziierte Protein codiert für ein Protein, das axonales Wachstum, synaptische Plastizität und präsynaptische Neuronen, die für die Regulierung der Neutroansmitterfreisetzung notwending sind, beeinflusst.

An den komplexen molekularen Ereignissen, die zur Neutroansmitterfreisetzung im synaptischen Spalt führen, sind mehrere interagierende Proteine beteiligt, die allgemein als SNAP-Rezeptoren (SNAREs) bezeichnet werden. Es wurde angeführt, dass SNAP-25 und Syntaxin auf der neuronalen Plasmamembran (t-SNARE) und Synaptobrevin/VAMP auf dem synaptischen Vesikel (v-SNARE) einen stabilen ternären Komplex bilden. Dieser Kernkomplex dient als Docking-Komplex für zwei weitere Membranfusionsproteine, β-SNAP und NSF. Die ATP-Hydrolyse durch NSF verursacht die Auflösung des Komplexes im Priming-Schritt der Exozytose. Die SNAP-25-induzierte Neubildung des Komplexes und Interaktion mit Synaptotagmin (Syt) treibt vermutlich die durch Ca²⁺ ausgelöste Vesikel-Plasma-Membranfusion und Exozytose an. SNAP-25 spielt eine Schlüsselrolle bei sich entwickelnden sowie reifen Neuronen. Während der Entwicklung korreliert die SNAP-25-Expression mit Synaptogenese, axonalem Wachstum und neuronaler Reifung und ist vorwiegend in Zellkörpern im neonatalen Gehirn zu finden. Im Nervensystem von Erwachsenen ist SNAP-25 an präsynaptischen Nervenendigungen lokalisiert, wo es schnell axonal transportiert wird.

Es gibt zwei Isoformen von SNAP-25 (SNAP-25a und SNAP-25b), die durch alternatives Spleißen entstehen und in Neuronen und neuroendokrinen Zellen unterschiedlich exprimiert werden. SNAP-25a und SNAP-25b unterscheiden sich durch neun Aminosäuren in der zentralen Domäne. Zwei dieser Reste verändern die relative Positionierung angehäufter Cysteinreste, die für die an der Membranverankerung beteiligte posttranslationale Palmitoylierung erforderlich sind, was schließen lässt, dass die beiden SNAP-25-Isoformen verschiedene Rollen bei vesikulären Fusionsereignissen spielen.

Die Immunogensequenz ist identisch bei SNAP-25A und SNAP-25B Spleißvarianten in Maus-, Ratten- und Hühner-SNAP-25 und hoch konserviert (70-80 %) in Rinder-, Goldfisch-, Zitterrochen- und Drosophila-SNAP-25.

Physical form

Lösung in 0,01 M phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH 7,4, mit 15 mM Natriumazid.

Preparation Note

Für regelmäßige Verwendung bei 2-8 °C bis zu 1 Monat aufbewahren. Zur Langzeitlagerung in Arbeitsaliquoten einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen wird nicht empfohlen. Eine Aufbewahrung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor der Verwendung durch Zentrifugieren klären. Nicht verwendete Arbeitsverdünnungen sollten nach 12 Stunden verworfen werden.

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: nwg
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)